| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-28页 |
| 1.1 L-精氨酸的生物学功能 | 第14页 |
| 1.2 谷氨酸棒状杆菌中L-精氨酸的生物合成途径的研究 | 第14-16页 |
| 1.2.1 谷氨酸棒状杆菌中L-精氨酸的生物合成途径概述 | 第14-16页 |
| 1.2.2 谷氨酸棒状杆菌中与L-精氨酸生物合成相关的基因 | 第16页 |
| 1.3 ArgR的研究进展 | 第16-22页 |
| 1.3.1 ArgR的调控机制 | 第16-20页 |
| 1.3.2 ArgR的结构 | 第20-21页 |
| 1.3.3 ArgR氨基酸序列及ARG box的保守性 | 第21-22页 |
| 1.4 转录组、转录组测序及其应用 | 第22-24页 |
| 1.4.1 转录组与转录组学 | 第22-23页 |
| 1.4.2 转录组测序 | 第23页 |
| 1.4.3 转录组测序技术的应用 | 第23-24页 |
| 1.5 凝胶阻滞实验 | 第24-25页 |
| 1.5.1 凝胶阻滞实验的发展 | 第24页 |
| 1.5.2 凝胶阻滞实验原理 | 第24-25页 |
| 1.5.3 凝胶阻滞实验的应用 | 第25页 |
| 1.6 立题背景及意义 | 第25-28页 |
| 1.6.1 立题背景 | 第25-26页 |
| 1.6.2 立题意义 | 第26页 |
| 1.6.3 主要研究内容 | 第26-28页 |
| 第二章 谷氨酸棒状杆菌ATCC 14067 ArgR的克隆和表达 | 第28-48页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第28-32页 |
| 2.2.1 主要仪器与设备 | 第28-29页 |
| 2.2.2 主要实验试剂 | 第29-30页 |
| 2.2.3 菌株和质粒 | 第30页 |
| 2.2.4 培养基与溶液的配制 | 第30-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-42页 |
| 2.3.1 菌株的培养与保存 | 第32页 |
| 2.3.2 重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pET22b-argR的构建 | 第32-39页 |
| 2.3.3 融合蛋白ArgR的纯化与分子量测定 | 第39-42页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第42-47页 |
| 2.4.1 重组表达大肠杆菌的构建 | 第42-44页 |
| 2.4.2 融合蛋白ArgR的纯化与分子量测定 | 第44-47页 |
| 2.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 基于转录组测序结果对谷氨酸棒状杆菌ATCC 14067中ArgR生物学功能的初步分析 | 第48-67页 |
| 3.1 引言 | 第48页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第48-50页 |
| 3.2.1 主要仪器与设备 | 第48-49页 |
| 3.2.2 主要实验试剂 | 第49-50页 |
| 3.2.3 菌株和质粒 | 第50页 |
| 3.2.4 培养基的配制 | 第50页 |
| 3.3 实验方法 | 第50-53页 |
| 3.3.1 argR过表达菌株的构建 | 第50页 |
| 3.3.2 ArgR功能缺失菌株的构建 | 第50-51页 |
| 3.3.3 总mRNA的提取 | 第51-52页 |
| 3.3.4 转录组测序 | 第52页 |
| 3.3.5 转录组测序分析 | 第52-53页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第53-66页 |
| 3.4.1 argR过表达菌株的构建 | 第53页 |
| 3.4.2 ArgR功能缺失菌株的构建 | 第53-54页 |
| 3.4.3 总RNA的提取 | 第54页 |
| 3.4.4 测序饱和度分析 | 第54-56页 |
| 3.4.5 基因表达量聚类分析 | 第56-57页 |
| 3.4.6 差异表达基因检测 | 第57-58页 |
| 3.4.7 差异表达基因GO功能分析 | 第58-64页 |
| 3.4.8 阻遏蛋白ArgR对谷氨酸棒状杆菌ATCC 14067中精氨酸合成相关基因转录水平的影响 | 第64-66页 |
| 3.5 本章小结 | 第66-67页 |
| 第四章 凝胶阻滞实验观察ArgR蛋白与DNA片段在体外的相互作用 | 第67-79页 |
| 4.1 引言 | 第67页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第67-70页 |
| 4.2.1 主要仪器与设备 | 第67-68页 |
| 4.2.2 主要实验试剂 | 第68-69页 |
| 4.2.3 溶液的配制 | 第69-70页 |
| 4.3 实验方法 | 第70-73页 |
| 4.3.1 合成片段 | 第70页 |
| 4.3.2 EMSA实验方法的建立 | 第70-73页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第73-78页 |
| 4.4.1 EMSA实验方法的建立 | 第73-74页 |
| 4.4.2 ArgR蛋白与DNA片段在体外的相互作用 | 第74-78页 |
| 4.5 本章小结 | 第78-79页 |
| 结论与展望 | 第79-81页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 展望 | 第80页 |
| 本论文创新点 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 附件 | 第87页 |
