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荒漠植物H~+-PPase基因的系统发育分析及SaVP1和KcNHX1基因的功能鉴定

摘要第8-11页
Abstract第11-13页
缩略语表第14-15页
第一章 文献综述第15-30页
    1.1 逆境胁迫与离子转运第15-20页
        1.1.1 Na~+进入植物细胞后的宿命第17-18页
        1.1.2 盐生植物中的离子胁迫与离子运输第18-20页
    1.2 逆境胁迫与渗透调节第20-22页
        1.2.1 无机离子与渗透胁迫第21页
        1.2.2 小分子有机物质与渗透胁迫第21-22页
    1.3 逆境胁迫与氧化调节第22-26页
        1.3.1 植物抗氧化胁迫及活性氧的清除第23-24页
        1.3.2 植物热胁迫的信号传导第24-26页
    1.4 逆境胁迫与激素调控第26-28页
        1.4.1 逆境胁迫与ABA第26-27页
        1.4.2 逆境胁迫与IAA第27-28页
    1.5 植物抗逆性的形态表现及抗逆性评价第28-29页
        1.5.1 植物抗逆性的形态表现第28页
        1.5.2 植物抗逆性评价指标体系第28-29页
    1.6 本研究的目的和意义第29-30页
第二章 液泡膜矿H~+-PPase基因的系统发育分析第30-59页
    2.1 前言第30页
    2.2 实验材料第30-32页
        2.2.1 本研究所选的7种荒漠植物的生境及其生育特点第30-32页
        2.2.2 菌株和载体第32页
    2.3 实验方法第32-34页
        2.3.1 荒漠植物RNA的提取、纯化及H~+-PPase基因的克隆第32-34页
        2.3.2 新克隆的基因通过BLAST软件进行同源性比对第34页
        2.3.3 系统发育树的构建和保守域的多样性分析第34页
        2.3.4 H~+-PPase蛋白3D结构预测第34页
    2.4 结果与分析第34-53页
        2.4.1 荒漠植物RNA的电泳检测第34-35页
        2.4.2 新克隆H~+-PPase基因的分析鉴定第35-38页
        2.4.3 新克隆H~+-PPase基因与NCBI数据库中H~+-PPase基因的同源性分析及系统发育分析第38-46页
        2.4.4 H~+-PPase基因保守域的分析比较第46-49页
        2.4.5 H~+-PPase基因可能存在新的保守结构域第49-51页
        2.4.6 H~+-PPase蛋白的3D结构预测第51-53页
    2.5 讨论第53-59页
        2.5.1 H~+-PPase基因家族与酸钙体的关系第53-55页
        2.5.2 H~+-PPase基因家族保守结构域的功能第55-57页
        2.5.3 SaVP3可能是苦豆子中SaVP1基因的旁系同源基因第57-59页
第三章 苦豆子SaVP1基因增强转基因拟南芥抗逆性的研究第59-81页
    3.1 前言第59-60页
    3.2 实验材料第60-61页
        3.2.1 植物材料第60页
        3.2.2 菌株和载体第60-61页
    3.3 实验方法第61-65页
        3.3.1 苦豆子材料处理、RNA提取、H~+-PPase基因的克隆及SaVP1的表达模式分析第61页
        3.3.2 植物超表达载体的构建及转化第61-62页
            3.3.2.1 超表达载体的构建第61-62页
            3.3.2.2 农杆菌介导法转化拟南芥第62页
        3.3.3 转基因植株检测及表达量分析第62页
        3.3.4 转基因拟南芥的逆境处理第62-64页
            3.3.4.1 转基因拟南芥的NaCl处理第62页
            3.3.4.2 转基因拟南芥的干旱处理第62-64页
            3.3.4.3 转基因拟南芥的高温处理第64页
        3.3.5 逆境处理下转基因植株的生理指标测定第64页
        3.3.6 高温处理下转基因植株生长素的含量测定第64页
        3.3.7 高温处理下转基因植株的气孔开度测定第64页
        3.3.8 高温处理下转基因植株的角果长度及种子数统计第64-65页
    3.4 结果与分析第65-77页
        3.4.1 SaVP1基因在苦豆子的根和叶中都有高量表达第65页
        3.4.2 SaVP1基因可以在拟南芥中高效表达第65-66页
        3.4.3 SaVP1基因具有增强转基因拟南芥耐盐性的功能第66-68页
        3.4.4 SaVP1基因具有增强转基因拟南芥耐旱性的功能第68-70页
        3.4.5 SaVP1基因具有增强转基因拟南芥耐高温的功能第70-76页
            3.4.5.1 苗期高温处理及生理指标测定结果第70-72页
            3.4.5.2 SaVP1基因能提高高温处理下转基因拟南芥的结实性第72-75页
            3.4.5.3 SaVP1基因提高了拟南芥花器官中IAA的含量第75页
            3.4.5.4 SaVP1基因能增加转基因拟南芥在高温胁迫下的气孔开度第75-76页
        3.4.6 与离子转运体和通道蛋白相关基因的表达分析第76-77页
    3.5 讨论第77-81页
        3.5.1 SaVP1基因能够增强转基因植株对干旱和高盐的耐受性第77-79页
        3.5.2 SaVP1基因能够增强转基因植株对高温的耐受性第79-81页
第四章 花花柴KcNHX1基因增强转基因拟南芥抗逆性研究第81-104页
    4.1 前言第81页
    4.2 实验材料第81-82页
        4.2.1 植物材料第81-82页
        4.2.2 菌株和载体第82页
    4.3 实验方法第82-85页
        4.3.1 各材料处理、RNA提取、KcNHX1基因的克隆及表达模式分析第82页
        4.3.2 拟南芥超表达载体的构建及转化第82页
            4.3.2.1 超表达载体的构建第82页
            4.3.2.2 农杆菌介导法转化拟南芥第82页
        4.3.3 阳性转基因植株检测及表达量分析第82-84页
        4.3.4 转基因拟南芥的逆境处理第84-85页
            4.3.4.1 转基因拟南芥的NaCl处理第84页
            4.3.4.2 转基因拟南芥的干旱处理第84页
            4.3.4.3 转基因拟南芥的高温处理第84-85页
    4.4 结果与分析第85-100页
        4.4.1 来自荒漠植物的NHX基因与来自其他物种的NHX基因同源性比较第85-89页
        4.4.2 AtNHX1和KcNHX1基因的表达模式比较第89-90页
        4.4.3 KcNHX1基因的耐盐性功能验证第90-92页
        4.4.4 KcNHX1基因的耐旱性功能验证第92-93页
        4.4.5 KcNHX1基因的耐高温性功能验证第93-98页
            4.4.5.1 苗期高温处理及生理指标测定结果第93-95页
            4.4.5.2 KcNHX1基因能提高高温处理下转基因拟南芥的结实性第95-97页
            4.4.5.3 高温处理下气孔开度标测定第97-98页
        4.4.6 与离子转运体和离子通道蛋白相关的基因表达分析第98-100页
    4.5 讨论第100-103页
        4.5.1 KcNHX1基因增强转基因植株的耐旱耐盐性第100-102页
        4.5.2 KcNHX1基因增强转基因植株的耐高温性第102页
        4.5.3 KcNHX1基因提高了转基因植株中IAA的含量第102-103页
    4.6 展望第103-104页
参考文献第104-116页
附录第116-119页
攻读学位期间已发表和待发表论文第119页
攻读学位期间申请的专利第119-120页
致谢第120-121页

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