摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
缩略语表 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-30页 |
1.1 逆境胁迫与离子转运 | 第15-20页 |
1.1.1 Na~+进入植物细胞后的宿命 | 第17-18页 |
1.1.2 盐生植物中的离子胁迫与离子运输 | 第18-20页 |
1.2 逆境胁迫与渗透调节 | 第20-22页 |
1.2.1 无机离子与渗透胁迫 | 第21页 |
1.2.2 小分子有机物质与渗透胁迫 | 第21-22页 |
1.3 逆境胁迫与氧化调节 | 第22-26页 |
1.3.1 植物抗氧化胁迫及活性氧的清除 | 第23-24页 |
1.3.2 植物热胁迫的信号传导 | 第24-26页 |
1.4 逆境胁迫与激素调控 | 第26-28页 |
1.4.1 逆境胁迫与ABA | 第26-27页 |
1.4.2 逆境胁迫与IAA | 第27-28页 |
1.5 植物抗逆性的形态表现及抗逆性评价 | 第28-29页 |
1.5.1 植物抗逆性的形态表现 | 第28页 |
1.5.2 植物抗逆性评价指标体系 | 第28-29页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
第二章 液泡膜矿H~+-PPase基因的系统发育分析 | 第30-59页 |
2.1 前言 | 第30页 |
2.2 实验材料 | 第30-32页 |
2.2.1 本研究所选的7种荒漠植物的生境及其生育特点 | 第30-32页 |
2.2.2 菌株和载体 | 第32页 |
2.3 实验方法 | 第32-34页 |
2.3.1 荒漠植物RNA的提取、纯化及H~+-PPase基因的克隆 | 第32-34页 |
2.3.2 新克隆的基因通过BLAST软件进行同源性比对 | 第34页 |
2.3.3 系统发育树的构建和保守域的多样性分析 | 第34页 |
2.3.4 H~+-PPase蛋白3D结构预测 | 第34页 |
2.4 结果与分析 | 第34-53页 |
2.4.1 荒漠植物RNA的电泳检测 | 第34-35页 |
2.4.2 新克隆H~+-PPase基因的分析鉴定 | 第35-38页 |
2.4.3 新克隆H~+-PPase基因与NCBI数据库中H~+-PPase基因的同源性分析及系统发育分析 | 第38-46页 |
2.4.4 H~+-PPase基因保守域的分析比较 | 第46-49页 |
2.4.5 H~+-PPase基因可能存在新的保守结构域 | 第49-51页 |
2.4.6 H~+-PPase蛋白的3D结构预测 | 第51-53页 |
2.5 讨论 | 第53-59页 |
2.5.1 H~+-PPase基因家族与酸钙体的关系 | 第53-55页 |
2.5.2 H~+-PPase基因家族保守结构域的功能 | 第55-57页 |
2.5.3 SaVP3可能是苦豆子中SaVP1基因的旁系同源基因 | 第57-59页 |
第三章 苦豆子SaVP1基因增强转基因拟南芥抗逆性的研究 | 第59-81页 |
3.1 前言 | 第59-60页 |
3.2 实验材料 | 第60-61页 |
3.2.1 植物材料 | 第60页 |
3.2.2 菌株和载体 | 第60-61页 |
3.3 实验方法 | 第61-65页 |
3.3.1 苦豆子材料处理、RNA提取、H~+-PPase基因的克隆及SaVP1的表达模式分析 | 第61页 |
3.3.2 植物超表达载体的构建及转化 | 第61-62页 |
3.3.2.1 超表达载体的构建 | 第61-62页 |
3.3.2.2 农杆菌介导法转化拟南芥 | 第62页 |
3.3.3 转基因植株检测及表达量分析 | 第62页 |
3.3.4 转基因拟南芥的逆境处理 | 第62-64页 |
3.3.4.1 转基因拟南芥的NaCl处理 | 第62页 |
3.3.4.2 转基因拟南芥的干旱处理 | 第62-64页 |
3.3.4.3 转基因拟南芥的高温处理 | 第64页 |
3.3.5 逆境处理下转基因植株的生理指标测定 | 第64页 |
3.3.6 高温处理下转基因植株生长素的含量测定 | 第64页 |
3.3.7 高温处理下转基因植株的气孔开度测定 | 第64页 |
3.3.8 高温处理下转基因植株的角果长度及种子数统计 | 第64-65页 |
3.4 结果与分析 | 第65-77页 |
3.4.1 SaVP1基因在苦豆子的根和叶中都有高量表达 | 第65页 |
3.4.2 SaVP1基因可以在拟南芥中高效表达 | 第65-66页 |
3.4.3 SaVP1基因具有增强转基因拟南芥耐盐性的功能 | 第66-68页 |
3.4.4 SaVP1基因具有增强转基因拟南芥耐旱性的功能 | 第68-70页 |
3.4.5 SaVP1基因具有增强转基因拟南芥耐高温的功能 | 第70-76页 |
3.4.5.1 苗期高温处理及生理指标测定结果 | 第70-72页 |
3.4.5.2 SaVP1基因能提高高温处理下转基因拟南芥的结实性 | 第72-75页 |
3.4.5.3 SaVP1基因提高了拟南芥花器官中IAA的含量 | 第75页 |
3.4.5.4 SaVP1基因能增加转基因拟南芥在高温胁迫下的气孔开度 | 第75-76页 |
3.4.6 与离子转运体和通道蛋白相关基因的表达分析 | 第76-77页 |
3.5 讨论 | 第77-81页 |
3.5.1 SaVP1基因能够增强转基因植株对干旱和高盐的耐受性 | 第77-79页 |
3.5.2 SaVP1基因能够增强转基因植株对高温的耐受性 | 第79-81页 |
第四章 花花柴KcNHX1基因增强转基因拟南芥抗逆性研究 | 第81-104页 |
4.1 前言 | 第81页 |
4.2 实验材料 | 第81-82页 |
4.2.1 植物材料 | 第81-82页 |
4.2.2 菌株和载体 | 第82页 |
4.3 实验方法 | 第82-85页 |
4.3.1 各材料处理、RNA提取、KcNHX1基因的克隆及表达模式分析 | 第82页 |
4.3.2 拟南芥超表达载体的构建及转化 | 第82页 |
4.3.2.1 超表达载体的构建 | 第82页 |
4.3.2.2 农杆菌介导法转化拟南芥 | 第82页 |
4.3.3 阳性转基因植株检测及表达量分析 | 第82-84页 |
4.3.4 转基因拟南芥的逆境处理 | 第84-85页 |
4.3.4.1 转基因拟南芥的NaCl处理 | 第84页 |
4.3.4.2 转基因拟南芥的干旱处理 | 第84页 |
4.3.4.3 转基因拟南芥的高温处理 | 第84-85页 |
4.4 结果与分析 | 第85-100页 |
4.4.1 来自荒漠植物的NHX基因与来自其他物种的NHX基因同源性比较 | 第85-89页 |
4.4.2 AtNHX1和KcNHX1基因的表达模式比较 | 第89-90页 |
4.4.3 KcNHX1基因的耐盐性功能验证 | 第90-92页 |
4.4.4 KcNHX1基因的耐旱性功能验证 | 第92-93页 |
4.4.5 KcNHX1基因的耐高温性功能验证 | 第93-98页 |
4.4.5.1 苗期高温处理及生理指标测定结果 | 第93-95页 |
4.4.5.2 KcNHX1基因能提高高温处理下转基因拟南芥的结实性 | 第95-97页 |
4.4.5.3 高温处理下气孔开度标测定 | 第97-98页 |
4.4.6 与离子转运体和离子通道蛋白相关的基因表达分析 | 第98-100页 |
4.5 讨论 | 第100-103页 |
4.5.1 KcNHX1基因增强转基因植株的耐旱耐盐性 | 第100-102页 |
4.5.2 KcNHX1基因增强转基因植株的耐高温性 | 第102页 |
4.5.3 KcNHX1基因提高了转基因植株中IAA的含量 | 第102-103页 |
4.6 展望 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-116页 |
附录 | 第116-119页 |
攻读学位期间已发表和待发表论文 | 第119页 |
攻读学位期间申请的专利 | 第119-120页 |
致谢 | 第120-121页 |