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BR突变体bri1-301温度依赖性缺陷表型的研究以及一个BR途径新调控元件的鉴定

缩略词表第3-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 文献综述第14-25页
    1.1 油菜素类固醇是一类在植物中广泛分布的甾醇类激素第14-15页
    1.2 油菜素类固醇具有广泛的生物学功能第15页
    1.3 拟南芥体内油菜素类固醇激素的生物合成第15-18页
        1.3.1 油菜素类固醇合成路径概述第15-17页
        1.3.2 油菜素类固醇生物合成路径中的催化酶第17-18页
    1.4 拟南芥中油菜素类固醇信号转导途径第18-25页
        1.4.1 信号的感知和起始第18-20页
        1.4.2 信号途径中的其他组分以及磷酸化/去磷酸化的传递第20-23页
        1.4.3 转录因子BES1和BZR1的功能及调控第23-25页
第二章 BR突变体bri1-301温度依赖性缺陷表型的研究第25-64页
    2.1 前言第25-28页
        2.1.1 温度和油菜素类固醇共同调节拟南芥的生长发育第25-26页
        2.1.2 拟南芥中BRs受体BRI1的功能及其调控第26-27页
        2.1.3 对弱突变体的研究和bri1-301的鉴定第27-28页
    2.2 材料和方法第28-34页
        2.2.1 植物材料第28-29页
        2.2.2 菌株和质粒第29页
        2.2.3 仪器设备第29-30页
        2.2.4 药品和试剂第30页
        2.2.5 拟南芥的培养和表型观察第30页
        2.2.6 拟南芥基因型鉴定第30-31页
        2.2.7 基因表达定量分析第31-32页
        2.2.8 蛋白质提取和分析第32-33页
        2.2.9 载体构建和遗传转化第33-34页
        2.2.10 蛋白质亚细胞定位观察第34页
    2.3 结果与分析第34-54页
        2.3.1 温度变化会造成bri1-301不同程度的BR缺陷表型第34-36页
        2.3.2 温度表型是由bri1-301中G989I突变造成的第36-37页
        2.3.3 温度升高特异的抑制bri1-301生长第37-40页
        2.3.4 温度升高通过阻断BRs信号转导来抑制bri1-301的生长第40-42页
        2.3.5 过表达共受体BAK1对bri1-301的恢复依赖于生长温度第42页
        2.3.6 温度升高降低bri1-301蛋白质的稳定性第42-43页
        2.3.7 较高的生长温度导致bri1-301蛋白内吞的加剧第43-44页
        2.3.8 温度变化对BRI1和bri1-301激酶活性的影响第44-46页
        2.3.9 温度升高对BRI1、bri1-301与BAK1相互作用的影响第46-47页
        2.3.10 温度对bri1-301稳定性的影响与基于N-glycan的ERQC无关第47-49页
        2.3.11 温度对bri1-301稳定性的调节不依赖于温度信号转导第49-50页
        2.3.12 共分子伴侣TWD1与bri1-301温度表型之间的关系第50-51页
        2.3.13 热激蛋白与bri1-301温度表型之间的关系第51-52页
        2.3.14 对BRI1蛋白G989氨基酸不同突变的研究第52-54页
        2.3.15 以bri1-301为遗传背景进行的二次诱变筛选第54页
    2.4 讨论第54-59页
        2.4.1 bri1-301具有部分的BRs受体功能第54-56页
        2.4.2 温度升高加剧bri1-301的BRs缺陷表型第56页
        2.4.3 温度降低bri1-301稳定性不依赖基于糖基化修饰的ERQC第56-57页
        2.4.4 受体bri1-301蛋白的稳定性维持与热激蛋白之间的关系第57-59页
    2.5 本章参考文献第59-64页
第三章 一个BR途径新调控元件的鉴定第64-89页
    3.1 前言第64-67页
        3.1.1 拟南芥根的生长发育和调节概述第64-66页
        3.1.2 油菜素甾醇调控初生根发育的研究进展第66-67页
    3.2 材料与方法第67-72页
        3.2.1 植物材料第67页
        3.2.2 菌株和质粒第67页
        3.2.3 仪器设备第67页
        3.2.4 药品和试剂第67页
        3.2.5 拟南芥的培养、表型观察和遗传杂交第67页
        3.2.6 突变体T-DNA插入位点侧翼序列的克隆第67-68页
        3.2.7 拟南芥基因型鉴定第68页
        3.2.8 基因表达定量分析第68页
        3.2.9 蛋白质提取和分析第68页
        3.2.10 载体构建和遗传转化第68页
        3.2.11 蛋白质亚细胞定位观察第68-69页
        3.2.12 GUS报告基因染色观察第69页
        3.2.13 酵母双杂交检测蛋白质之间的相互作用——mbSUS第69-71页
        3.2.14 酵母双杂交检测蛋白质之间的相互作用——ProQuest第71-72页
    3.3 结果与分析第72-83页
        3.3.1 遗传筛选获得一株对BRs敏感性增加的突变体第72-74页
        3.3.2 缺失突变体erib1的初生根生长对外源BL超敏感第74-75页
        3.3.3 ERIB1的表达模式分析和ERIB1蛋白的亚细胞定位观察第75-76页
        3.3.4 ERIB1调节的根发育特异的对外源BL超敏感第76-77页
        3.3.5 缺失突变体erib1体内BRs信号过量输出第77-78页
        3.3.6 erib1对外源BL的超敏反应依赖于BL的感知和信号转导第78-79页
        3.3.7 突变体erib1初生根生长变缓,根尖分生区发育异常第79-80页
        3.3.8 突变体erib1初生根根尖静止中心细胞分裂增加第80-82页
        3.3.9 ERIB1与BRI1、BAK1和BIN2在体外没有相互作用第82-83页
    3.4 讨论第83-86页
        3.4.1 拟南芥根的正常生长发育需要体内BRs的稳态平衡第83-84页
        3.4.2 拟南芥根部细胞的分裂、分化和伸长都受到BRs的调节第84页
        3.4.3 ERIB1通过特异性抑制根部BR信号来调节初生根生长发育第84-86页
    3.5 本章参考文献第86-89页
附表一第89-92页
参考文献第92-108页
在学期间的科研成果第108-109页
致谢第109页

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