| 摘要 | 第12-15页 |
| Abstract | 第15-17页 |
| 前言 | 第19-24页 |
| 第一章 分离筛选优质乳酸杆菌 | 第24-42页 |
| 1 实验材料 | 第26-27页 |
| 1.1 菌株 | 第26页 |
| 1.2 试剂耗材 | 第26-27页 |
| 1.3 仪器设备 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.1 人群选择 | 第27-28页 |
| 2.2 唾液样本的采集 | 第28页 |
| 2.3 乳酸杆菌的分离和DNA提取 | 第28-29页 |
| 2.4 对细菌基因组16s区域进行PCR扩增 | 第29页 |
| 2.5 测序结果比对分析 | 第29-30页 |
| 2.6 API细菌鉴定系统进行菌种鉴定 | 第30页 |
| 2.7 菌种的复苏、培养和保存 | 第30页 |
| 2.8 pH测定 | 第30-31页 |
| 2.9 产H202能力分析 | 第31页 |
| 2.10 抗生素敏感性测定 | 第31-32页 |
| 2.11 抑菌能力分析 | 第32页 |
| 2.12 生物膜形成能力和对变异链球菌生物膜抑制能力分析 | 第32-33页 |
| 3 实验结果 | 第33-39页 |
| 3.1 样本情况统计 | 第33页 |
| 3.2 乳酸菌的分离和鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3 产酸能力分析 | 第34页 |
| 3.4 产H2O2能力测定 | 第34-35页 |
| 3.5 抗生素敏感性测定 | 第35-36页 |
| 3.6 抗菌能力测定 | 第36页 |
| 3.7 生物膜形成能力和对变异链球菌生物膜抑制能力测定 | 第36-37页 |
| 3.8 优质乳酸菌的保藏和专利申请 | 第37-39页 |
| 4 小结 | 第39-42页 |
| 第二章 乳酸菌12857的基因组测序及分析 | 第42-53页 |
| 1 实验材料 | 第43-44页 |
| 1.1 菌株 | 第43页 |
| 1.2 试剂耗材 | 第43-44页 |
| 1.3 仪器设备 | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-45页 |
| 2.1 细菌培养和基因组DNA提取 | 第44页 |
| 2.2 测序平台和技术 | 第44-45页 |
| 2.3 基因组组装 | 第45页 |
| 2.4 基因预测和功能注释 | 第45页 |
| 3 实验结果 | 第45-51页 |
| 3.1 基因预测结果 | 第45-46页 |
| 3.2 非编码RNA的预测 | 第46-47页 |
| 3.3 基因功能注释 | 第47-51页 |
| 4 小结 | 第51-53页 |
| 第三章 乳酸菌12857的安全性评价 | 第53-70页 |
| 1 实验材料 | 第54-56页 |
| 1.1 实验动物 | 第54页 |
| 1.2 实验菌株 | 第54页 |
| 1.3 试剂耗材 | 第54-55页 |
| 1.4 仪器设备 | 第55页 |
| 1.5 统计方析 | 第55-56页 |
| 2 实验方法 | 第56-59页 |
| 2.1 大鼠急性毒性实验 | 第56页 |
| 2.2 大鼠慢性毒性实验 | 第56-58页 |
| 2.3 动物组织包埋切片观察 | 第58-59页 |
| 2.4 牙齿表面生物膜结构观察 | 第59页 |
| 3 实验结果 | 第59-67页 |
| 3.1 急性毒性实验结果 | 第59-60页 |
| 3.2 慢性毒性实验主实验组结果 | 第60-63页 |
| 3.3 慢性毒性实验恢复组结果 | 第63-65页 |
| 3.4 动物脏器组织切片 | 第65-66页 |
| 3.5 牙齿表面生物膜结构 | 第66-67页 |
| 4 小结 | 第67-70页 |
| 第四章 乳酸菌12857在细胞水平的免疫调节功能评价 | 第70-92页 |
| 1 实验材料 | 第72-74页 |
| 1.1 细胞和菌株 | 第72页 |
| 1.2 试剂耗材 | 第72-74页 |
| 1.3 仪器设备 | 第74页 |
| 2 实验方法 | 第74-81页 |
| 2.1 参与本部分实验的细菌 | 第74-75页 |
| 2.2 细菌黏附细胞能力评价 | 第75页 |
| 2.3 体外模拟细胞免疫实验 | 第75-78页 |
| 2.4 细菌培养上清液的细胞毒性 | 第78-79页 |
| 2.5 细菌培养上清液对细胞活性的影响 | 第79页 |
| 2.6 细胞凋亡、自噬的测定 | 第79-81页 |
| 3 实验结果 | 第81-90页 |
| 3.1 细菌黏附能力评价 | 第81-82页 |
| 3.2 细胞炎性反应条件建立 | 第82-84页 |
| 3.3 细菌对细胞免疫调节的影响 | 第84-86页 |
| 3.4 细胞毒性测定结果 | 第86-87页 |
| 3.5 细胞活性测定结果 | 第87-88页 |
| 3.6 乳酸菌对细胞自噬作用观察 | 第88-89页 |
| 3.7 乳酸菌对细胞凋亡作用观察 | 第89-90页 |
| 4 小结 | 第90-92页 |
| 第五章 乳酸菌12857对人群口腔菌群的调节作用 | 第92-113页 |
| 1 实验材料 | 第93-95页 |
| 1.1 菌株 | 第93-94页 |
| 1.2 试剂耗材 | 第94-95页 |
| 1.3 仪器设备 | 第95页 |
| 2 实验方法 | 第95-101页 |
| 2.1 12857的大规模发酵及片剂生产 | 第95-96页 |
| 2.2 口腔干预措施和样本采集 | 第96页 |
| 2.3 牙菌斑微生物总DNA提取 | 第96-97页 |
| 2.4 唾液中微生物总DNA提取 | 第97页 |
| 2.5 口腔样本DNA的处理和分析 | 第97-98页 |
| 2.6 结肠癌病人的粪便样本收集和提取 | 第98-99页 |
| 2.7 LAMP检测方法 | 第99-100页 |
| 2.8 PCR检测与分析 | 第100-101页 |
| 3 结果 | 第101-111页 |
| 3.1 样品和样本情况 | 第101页 |
| 3.2 序列质量评估和处理 | 第101-102页 |
| 3.3 OTU聚类分析 | 第102-103页 |
| 3.4 稀疏性曲线 | 第103-104页 |
| 3.5 Beta多样性分析 | 第104-107页 |
| 3.6 多样品物种分类 | 第107-109页 |
| 3.7 LAMP对具核梭杆菌的检测 | 第109-111页 |
| 4 小结 | 第111-113页 |
| 第六章 结论与展望 | 第113-117页 |
| 参考文献 | 第117-132页 |
| 附录A 健康志愿者一般情况统计 | 第132-134页 |
| 作者在学期间取得的学术成果 | 第134-136页 |
| 主要简历 | 第136-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
