| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语/中英文对照 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 研究现状、成果 | 第13-14页 |
| 研究目的、方法 | 第14-15页 |
| 一、TNIK在胰腺癌组织中表达及临床意义 | 第15-38页 |
| 1.1 实验材料 | 第15-18页 |
| 1.1.1 胰腺癌组织标本 | 第15-16页 |
| 1.1.2 实验试剂及耗材 | 第16-17页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 1.2 实验方法 | 第18-27页 |
| 1.2.1 主要试剂的配制 | 第18-19页 |
| 1.2.2 qPCR法检测胰腺癌及癌旁正常组织TNIK mRNA表达 | 第19-22页 |
| 1.2.3 Western blot法检测胰腺癌及癌旁正常组织的蛋白表达 | 第22-25页 |
| 1.2.4 免疫组化法检测石蜡包埋胰腺癌组织中TNIK蛋白的表达 | 第25-27页 |
| 1.2.5 统计学处理 | 第27页 |
| 1.3 结果 | 第27-36页 |
| 1.3.1 胰腺癌组织总RNA浓度、纯度测定及质量鉴定 | 第27-28页 |
| 1.3.2 实时定量PCR扩增、熔解曲线分析与扩增产物鉴定 | 第28-29页 |
| 1.3.3 胰腺癌及癌旁组织TNIK mRNA的表达 | 第29页 |
| 1.3.4 胰腺癌及癌旁组织TNIK蛋白的表达 | 第29-30页 |
| 1.3.5 TNIK蛋白在胰腺癌组织芯片中的表达 | 第30-32页 |
| 1.3.6 TNIK表达与胰腺癌各临床病理特征的关系 | 第32-33页 |
| 1.3.7 TNIK表达与胰腺癌生存预后的关系 | 第33-36页 |
| 1.4 讨论 | 第36-37页 |
| 1.5 小结 | 第37-38页 |
| 二、筛选靶向TNIK的有效SiRNA序列 | 第38-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 2.1.1 胰腺癌细胞株 | 第39页 |
| 2.1.2 实验试剂及耗材 | 第39页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第39-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-44页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第40-41页 |
| 2.2.2 qPCR法检测各胰腺癌细胞株TNIK mRNA的表达 | 第41页 |
| 2.2.3 Western blot法检测各胰腺癌细胞株TNIK蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 2.2.4 筛选干扰效果最明显的SiRNA序列 | 第42-44页 |
| 2.2.5 统计学处理 | 第44页 |
| 2.3 结果 | 第44-49页 |
| 2.3.1 四种胰腺癌细胞系TNIK在mRNA水平的表达差异 | 第44-45页 |
| 2.3.2 四种胰腺癌细胞系TNIK在蛋白水平的表达情况 | 第45-46页 |
| 2.3.3 阳离子脂质体Lipofectamine~(TM) 2000法干扰效率的检测 | 第46-47页 |
| 2.3.4 qPCR检测各处理组mRNA水平的干扰效率 | 第47-48页 |
| 2.3.5 Western blot检测各处理组蛋白水平的干扰效率 | 第48-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-51页 |
| 2.5 小结 | 第51-52页 |
| 三、TNIK对胰腺癌细胞Panc-1生物学活性的影响 | 第52-62页 |
| 3.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 3.1.1 胰腺癌细胞株 | 第52页 |
| 3.1.2 试验试剂及耗材 | 第52-53页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第53页 |
| 3.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 3.2.1 MTT法绘制转染细胞生长曲线 | 第53-54页 |
| 3.2.2 Transwell法检测胰腺癌细胞侵袭 | 第54页 |
| 3.2.3 划痕愈合实验检测细胞迁移 | 第54-55页 |
| 3.2.4 Annexin V-FITC/PI荧光双标法检测细胞凋亡 | 第55页 |
| 3.2.5 统计学处理 | 第55页 |
| 3.3 结果 | 第55-59页 |
| 3.3.1 MTT法检测SiRNA下调TNIK对Panc-1细胞增殖活性影响 | 第55-56页 |
| 3.3.2 Transwell法检测SiRNA下调TNIK对Panc-1侵袭能力的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.3 划痕愈合实验检测SiRNA下调TNIK对Panc-1迁移能力的影响 | 第57-58页 |
| 3.3.4 Annexin V-FITC/PI法检测SiRNA下调TNIK对Panc-1凋亡的影响 | 第58-59页 |
| 3.4 讨论 | 第59-61页 |
| 3.5 小结 | 第61-62页 |
| 全文结论 | 第62-63页 |
| 论文创新点 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第70-71页 |
| 综述1 | 第71-82页 |
| 综述1 参考文献 | 第79-82页 |
| 综述2 | 第82-96页 |
| 综述2 参考文献 | 第89-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
