| 附件 | 第5-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 缩写词表 | 第13-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-31页 |
| 1 低温胁迫对植物的损伤 | 第16-19页 |
| 1.1 低温引起的细胞膜结构改变 | 第16-17页 |
| 1.2 低温胁迫可诱导植物活性氧和自由基的产生 | 第17-18页 |
| 1.3 渗透调节方面的研究 | 第18-19页 |
| 1.4 导致光合系统变化 | 第19页 |
| 2 植物抗寒基因工程研究 | 第19-26页 |
| 2.1 保护基因的遗传转化 | 第20-21页 |
| 2.2 抗寒调控基因 | 第21-26页 |
| 3 植物转基因技术的研究进展 | 第26-28页 |
| 3.1 常用的植物转基因方法 | 第26-27页 |
| 3.2 植物转基因技术的应用及展望 | 第27-28页 |
| 4 立题依据及本研究的目的意义 | 第28-31页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第31-45页 |
| 第一节 油菜 ICE1 基因的克隆与序列分析 | 第31-37页 |
| 1 实验材料 | 第31-32页 |
| 2 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.1 油菜 ICE1 基因的克隆 | 第32-36页 |
| 2.2 油菜 ICE1 基因生物信息学分析 | 第36页 |
| 2.3 低温对油菜 ICE1 基因转录水平的影响 | 第36-37页 |
| 2.4 油菜 ICE1 基因组织特异性表达检测 | 第37页 |
| 第二节 油菜 ICE1 基因亚细胞定位 | 第37-40页 |
| 1 实验材料 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-40页 |
| 2.1 植物表达载体 pBI121-ICE1-GFP 的构建 | 第37-39页 |
| 2.2 农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备 | 第39页 |
| 2.3 冻融法转化农杆菌 | 第39页 |
| 2.4 pBI121-ICE1-GFP 重组蛋白亚细胞定位 | 第39-40页 |
| 第三节 农杆菌介导的油菜 ICE1 基因转化烟草 | 第40-45页 |
| 1 实验材料 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-42页 |
| 2.1 植物表达载体 pBI121-ICE1 的构建 | 第40-41页 |
| 2.2 农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备及转化 | 第41页 |
| 2.3 转基因烟草的获得 | 第41-42页 |
| 3 转基因烟草植株的检测 | 第42-43页 |
| 3.1 PCR 检测 | 第42页 |
| 3.2 转化拷贝数的鉴定 | 第42页 |
| 3.3 转基因烟草的抗寒性检测 | 第42-43页 |
| 4 转基因烟草的抗逆性分析 | 第43-45页 |
| 4.1 T_l代转基因植株的培养 | 第43页 |
| 4.2 低温胁迫生理指标测定 | 第43-45页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第45-67页 |
| 第一节 油菜 ICE1 基因的克隆与序列分析 | 第45-54页 |
| 1 油菜 ICE1 基因的克隆 | 第45-49页 |
| 2 油菜 ICE1 基因的序列分析 | 第49-50页 |
| 3 油菜 ICE1 生物信息学分析 | 第50-53页 |
| 4 油菜 ICE1 基因转录水平表达分析 | 第53-54页 |
| 第二节 油菜 ICE1 的亚细胞定位 | 第54-57页 |
| 1 植物表达载体的构建 | 第54-56页 |
| 2 pBI121-ICE1-GFP 重组蛋白亚细胞定位 | 第56-57页 |
| 第三节 农杆菌介导的油菜 ICE1 基因转化烟草 | 第57-67页 |
| 1 植物表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 2 转基因烟草的获得 | 第58-60页 |
| 3 转基因烟草的检测 | 第60-62页 |
| 4 转基因烟草在冷胁迫（2℃）下的抗性分析 | 第62-67页 |
| 第四章 讨论 | 第67-70页 |
| 第五章 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-82页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
