| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第7-11页 |
| 文献综述 | 第11-22页 |
| 1. 禽白血病 | 第11-15页 |
| 1.1 ALV病毒分子生物学特性 | 第11-13页 |
| 1.2 ALV病毒的理化特性 | 第13页 |
| 1.3 ALV病毒的致病性 | 第13-14页 |
| 1.3.1 ALV病毒的致瘤性 | 第13页 |
| 1.3.2 ALV病毒的免疫抑制 | 第13-14页 |
| 1.4 ALV传播与诊断 | 第14-15页 |
| 1.4.1 ALV的流行特点 | 第14页 |
| 1.4.2 ALV的检测方法 | 第14-15页 |
| 1.4.2.1 血清型诊断 | 第14页 |
| 1.4.2.2 PCR检测 | 第14-15页 |
| 1.4.2.3 ELISA检测 | 第15页 |
| 1.4.2.4 荧光抗体检测 | 第15页 |
| 1.4.2.5 病毒的分离与鉴定 | 第15页 |
| 1.4.3 ALV的防治措施 | 第15页 |
| 2. 天然免疫系统 | 第15-22页 |
| 2.1 天然免疫的模式识别受体 | 第16-18页 |
| 2.2 免疫相关细胞因子与MAPK信号通路 | 第18-22页 |
| 2.2.1 细胞因子 | 第18-20页 |
| 2.2.2 MAPK通路 | 第20-22页 |
| 研究内容一: 禽白血病病毒衣壳蛋白p27的免疫抑制功能研究 | 第22-35页 |
| 1. 材料与方法 | 第22-27页 |
| 1.1 细胞、质粒 | 第22-23页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第23页 |
| 1.3 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
| 培养基的配置 | 第23页 |
| 其他试剂的配置 | 第23-24页 |
| 1.4 引物的设计 | 第24-25页 |
| 1.5 禽白血病衣壳蛋白p27真核表达载体的构建 | 第25-26页 |
| 1.5.1 真核表达载体在DF-1细胞中的暂态表达 | 第25-26页 |
| 1.5.2 免疫蛋白印迹检测 | 第26页 |
| 1.5.3 共聚焦间接免疫荧光检测 | 第26页 |
| 1.6 禽白血病病毒衣壳蛋白p27抑制细胞因子的转录作用 | 第26-27页 |
| 1.6.1 DF-1细胞的RNA提取与反转录 | 第26-27页 |
| 1.6.2 Real-time PCR检测相关基因表达 | 第27页 |
| 1.6.3 剂量依赖实验 | 第27页 |
| 2. 结果 | 第27-33页 |
| 2.1 p27真核表达载体的构建及鉴定 | 第27-29页 |
| 2.1.1 p27全长及分段表达载体的构建 | 第27-28页 |
| 2.1.2 p27全长及分段载体暂态表达鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2 禽白血病病毒衣壳蛋白p27抑制细胞因子的转录作用 | 第29-33页 |
| 2.2.1 p27抑制细胞因子的转录作用 | 第29-31页 |
| 2.2.2 pcDNA3.1-p27剂量依赖实验 | 第31-32页 |
| 2.2.3 pcDNA3.1分段表达抑制细胞因子转录作用 | 第32-33页 |
| 3. 分析与讨论 | 第33-35页 |
| 研究二: 禽白血病病毒衣壳蛋白p27免疫抑制作用机理的初探 | 第35-44页 |
| 1. 材料与方法 | 第36-38页 |
| 1.1 细胞、质粒 | 第36页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第36页 |
| 1.3 引物设计 | 第36-37页 |
| 1.4 LPS和Poly (I:C)刺激后相关信号通路分子的研究 | 第37页 |
| 1.5 双荧光酶报告基因实验 | 第37-38页 |
| 1.6 蛋白磷酸化实验检测 | 第38页 |
| 2. 结果 | 第38-42页 |
| 2.1 p27蛋白抑制LPS刺激细胞反应 | 第38-40页 |
| 2.1.1 p27蛋白对LPS刺激信号通路相关分子表达影响 | 第38-39页 |
| 2.1.2 p27蛋白抑制LPS刺激细胞转录因子启动子活性 | 第39-40页 |
| 2.1.3 p27蛋白抑制LPS刺激细胞MAPK信号途径p38蛋白的磷酸化水平 | 第40页 |
| 2.2 p27蛋白抑制Poly (I:C)刺激细胞反应 | 第40-42页 |
| 2.2.1 P27蛋白对Poly (I:C)刺激信号通路相关分子表达影口向 | 第40-41页 |
| 2.2.2 p27蛋白抑制IFN-β启动子活性 | 第41-42页 |
| 2.2.3 p27蛋白抑制Poly(I:C)刺激细胞中MAPK信号途径p38蛋白的磷酸化水平 | 第42页 |
| 3. 分析与讨论 | 第42-44页 |
| 全文总结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第50-51页 |
