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血清4型和8b型禽Ⅰ群腺病毒二价油乳剂灭活疫苗的研制

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
缩略词表第11-13页
文献综述第13-20页
    1 禽Ⅰ群腺病毒的病原学特性第13-14页
        1.1 禽Ⅰ群腺病毒的血清学分型第13页
        1.2 禽Ⅰ群腺病毒的形态学和理化特性第13-14页
    2 禽Ⅰ群腺病毒的主要蛋白质及功能第14页
    3 禽Ⅰ群腺病毒的流行现状与致病性第14-15页
    4 禽Ⅰ群腺病毒感染的诊断第15-17页
        4.1 电子显微镜法和包涵体检查第15页
        4.2 病毒的分离第15-16页
        4.3 聚合酶链式反应技术第16页
        4.4 实时荧光定量PCR第16页
        4.5 琼脂扩散试验第16-17页
        4.6 酶联免疫吸附试验第17页
    5 禽Ⅰ群腺病毒疫苗研究进展第17-18页
        5.1 禽Ⅰ群腺病毒组织灭活苗的研制第17-18页
        5.2 禽Ⅰ群腺病毒基因工程亚单位疫苗的研制第18页
        5.3 禽Ⅰ群腺病毒DNA疫苗的研制第18页
    6 研究目的和意义第18-20页
第一章 FAdV-8b QD2016株的分离鉴定及基因序列分析第20-33页
    1 材料与方法第20-24页
        1.1 材料第20-21页
            1.1.1 病料与细胞第20页
            1.1.2 主要实验试剂第20页
            1.1.3 主要仪器设备第20-21页
        1.2 方法第21-24页
            1.2.1 病料的处理第21页
            1.2.2 病毒的分离第21页
            1.2.3 间接免疫荧光试验第21页
            1.2.4 FAdV-8b QD2016株全基因组序列的测定及分析第21-24页
    2 结果第24-32页
        2.1 病毒的分离第24-25页
        2.2 间接免疫荧光(IFA)检测第25页
        2.3 FAdV-8b QD2106株全基因序列的测定第25-26页
        2.4 FAdV-8b QD2016株全基因组序列的分析第26-32页
            2.4.1 FAdV-8b QD2016株基因组的分析第26-28页
            2.4.2 FAdV-8b QD2016株全基因组序列的同源性分析第28页
            2.4.3 FAdV-8b QD2016株全基因组的系统发育进化分析第28-30页
            2.4.4 FAdV-8b QD2016株Hexon基因序列的同源性分析第30页
            2.4.5 FAdV-8b QD2016株Hexon基因的系统发育进化分析第30-32页
    3 小结与讨论第32-33页
第二章 血清4型和8b型禽Ⅰ群腺病毒二价油乳剂灭活疫苗的研制第33-49页
    1 材料与方法第33-38页
        1.1 材料第33-34页
            1.1.1 细胞与毒株第33页
            1.1.2 主要实验试剂第33-34页
            1.1.3 主要仪器设备第34页
            1.1.4 鸡胚与实验动物第34页
        1.2 方法第34-38页
            1.2.1 种毒的纯净性检验第34页
            1.2.2 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术的应用第34页
            1.2.3 FAdV-4 GX2013株在LMH细胞上增殖培养条件的优化第34-35页
            1.2.4 FAdV-8b QD2016株在LMH细胞上增殖培养条件的优化第35页
            1.2.5 细胞工厂放大培养实验第35-36页
            1.2.6 甲醛最佳灭活浓度及灭活时间的确定第36页
            1.2.7 FAdV-4和FAdV-8b二价油乳剂灭活疫苗的制备第36-38页
    2 结果第38-47页
        2.1 种毒的纯净性检验第38-39页
        2.2 FAdV-4 GX2013株在LMH细胞上增殖培养条件的优化第39页
            2.2.1 基础种子批TCID_(50)和基因拷贝数第39页
            2.2.2 最佳感染复数(MOI)和适宜收毒时间第39页
        2.3 FAdV-8b QD2016株在LMH细胞上增殖培养条件的优化第39-41页
            2.3.1 基础种子批TCID_(50)和基因拷贝数第39页
            2.3.2 最佳感染复数(MOI)和适宜收毒时间第39-41页
        2.4 细胞工厂放大培养第41页
        2.5 甲醛的最佳灭活浓度和灭活时间第41页
        2.6 油乳剂灭活疫苗的性状检验结果第41页
            2.6.1 粘度检验第41页
            2.6.2 稳定性检验第41页
            2.6.3 无菌检验第41页
            2.6.4 保存期检验第41页
        2.7 安全性检验第41页
        2.8 最小免疫剂量第41-43页
        2.9 免疫抗体水平监测结果第43-45页
            2.9.1 血清中和试验(SNT)检测结果第43-44页
            2.9.2 琼脂扩散试验(AGPT)检测结果第44-45页
        2.10 攻毒保护试验第45-47页
    3 小结与讨论第47-49页
全文总结第49-50页
参考文献第50-54页
致谢第54-55页

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