| 摘要 | 第8-12页 |
| Abstract | 第12-17页 |
| 英文缩略词表 | 第18-19页 |
| 前言 | 第19-24页 |
| 第一章 miR-221在NSCLC中的表达及意义 | 第24-40页 |
| 1 材料 | 第24-26页 |
| 1.1 一般资料 | 第24-25页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第25页 |
| 1.3 主要试验仪器 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-29页 |
| 2.1 组织样本采集 | 第26页 |
| 2.2 miR-221表达检测 | 第26-29页 |
| 2.3 统计学分析 | 第29页 |
| 3 结果 | 第29-35页 |
| 3.1 琼脂糖凝胶电泳检测总RNA质量 | 第29-30页 |
| 3.2 miR-221表达检测结果 | 第30-31页 |
| 3.3 不同临床病理参数间miR-221表达的比较 | 第31-32页 |
| 3.4 miR-221表达水平与NSCLC患者临床病理参数的关系 | 第32-34页 |
| 3.5 采用Cox回归分析NSCLC死亡患者OS的相关性因素 | 第34页 |
| 3.6 miR-221与NSCLC患者中位生存期的相关性分析 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-40页 |
| 第二章 miR-221与TRPS1蛋白的靶向关系验证 | 第40-63页 |
| 1 材料 | 第40-44页 |
| 1.1 病理组织 | 第40-41页 |
| 1.2 细胞系 | 第41页 |
| 1.3 miR-221 mimic | 第41页 |
| 1.4 TRPS1 3'UTR-WT和TRP S1 3'UTR-Mut质粒 | 第41页 |
| 1.5 主要实验试剂 | 第41页 |
| 1.6 主要实验仪器 | 第41-42页 |
| 1.7 主要实验试剂配制 | 第42-44页 |
| 2 方法 | 第44-55页 |
| 2.1 细胞的复苏、传代与冻存 | 第44-45页 |
| 2.2 TRPS1在NSCLC组织中的表达 | 第45-46页 |
| 2.3 miR-221靶基因预测 | 第46页 |
| 2.4 miR-221靶基因的验证 | 第46-47页 |
| 2.5 miR-221对TRPS1 mRNA表达的影响 | 第47-50页 |
| 2.6 miR-221对TRPS1蛋白表达的影响 | 第50-54页 |
| 2.7 统计学分析 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-59页 |
| 3.1 miR-221靶基因预测结果 | 第55页 |
| 3.2 TRPS1 mRNA在NSCLC组织中的表达 | 第55-57页 |
| 3.3 荧光素酶表达检测 | 第57页 |
| 3.4 miR-221表达上调后TRPS1 mRNA表达检测 | 第57-58页 |
| 3.5 miR-221表达上调后TRPS1蛋白表达检测 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-63页 |
| 第三章 miR-221靶向TRPS1蛋白对NSCLC细胞生物学行为和移植瘤生长的影响 | 第63-83页 |
| 1 材料 | 第63-65页 |
| 1.1 细胞系 | 第63-64页 |
| 1.2 miR-221 mimic和miR-221 inhibitor | 第64页 |
| 1.3 质粒 | 第64页 |
| 1.4 主要实验试剂 | 第64页 |
| 1.5 主要实验仪器 | 第64-65页 |
| 2 方法 | 第65-73页 |
| 2.1 细胞实验分组 | 第65页 |
| 2.2 TRPS1表达抑制的人肺癌PC14细胞的构建 | 第65-70页 |
| 2.3 CCK-8实验 | 第70-71页 |
| 2.4 细胞凋亡检测 | 第71页 |
| 2.5 细胞侵袭能力检测 | 第71-72页 |
| 2.6 细胞划痕实验 | 第72-73页 |
| 2.7 统计学分析 | 第73页 |
| 3 结果 | 第73-79页 |
| 3.1 各组细胞中miR-221、TRPS1 mRNA表达检测 | 第73-74页 |
| 3.2 细胞增殖活性检测 | 第74页 |
| 3.4 细胞凋亡检测 | 第74-76页 |
| 3.5 细胞侵袭能力检测 | 第76-78页 |
| 3.6 细胞迁移能力检测 | 第78-79页 |
| 4 讨论 | 第79-83页 |
| 第四章 沉默miR-221对NSCLC裸鼠移植瘤的抑制作用及分子机制 | 第83-98页 |
| 1 材料 | 第83-85页 |
| 1.1 细胞系 | 第83页 |
| 1.2 实验动物 | 第83-84页 |
| 1.3 主要实验试剂 | 第84页 |
| 1.4 主要实验仪器同上面问题 | 第84-85页 |
| 2 方法 | 第85-91页 |
| 2.1 细胞分组 | 第85页 |
| 2.2 miR-221对裸鼠肺癌移植瘤生长的影响 | 第85-87页 |
| 2.2.1 动物分组 | 第85-86页 |
| 2.2.2 裸鼠皮下肺癌细胞移植瘤模型建立 | 第86页 |
| 2.2.3 裸鼠移植瘤瘤体大小测量 | 第86页 |
| 2.2.4 肿瘤重量测量 | 第86-87页 |
| 2.3 移植瘤中TRPS1 mRNA表达检测 | 第87-89页 |
| 2.4 免疫组化法检测移植瘤中TRPS1蛋白表达 | 第89-91页 |
| 2.5 western blot法检测移植瘤中TRPS1蛋白表达 | 第91页 |
| 2.6 统计学分析 | 第91页 |
| 3 结果 | 第91-95页 |
| 3.1 裸鼠一般情况观察 | 第91-92页 |
| 3.2 裸鼠移植瘤体积检测结果 | 第92页 |
| 3.3 裸鼠移植瘤重量检测 | 第92-93页 |
| 3.4 移植瘤组织中TRPS1 mRNA表达检测 | 第93-94页 |
| 3.5 免疫组化法检测移植瘤组织中TRPS1蛋白表达 | 第94-95页 |
| 3.6 western blot法检测移植瘤组织中TRPS1蛋白表达 | 第95页 |
| 4 讨论 | 第95-98页 |
| 参考文献 | 第98-107页 |
| 综述 | 第107-117页 |
| 综述参考文献 | 第112-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
