| 目录 | 第6-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 植物的耐盐性研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 盐胁迫对植物的影响 | 第13页 |
| 1.1.2 植物的耐盐机理 | 第13-15页 |
| 1.2 植物MYB转录因子在抗盐中作用 | 第15-16页 |
| 1.2.1 MYB转录因子 | 第15页 |
| 1.2.2 MYB转录因子在植物应答非生物胁迫中的作用 | 第15-16页 |
| 1.3 葡萄遗传转化研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 葡萄遗传转化途径 | 第16-17页 |
| 1.3.2 葡萄遗传转化再生系统的建立 | 第17-18页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料及生长条件 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第19页 |
| 2.1.3 酶、各种化学试剂及生化试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第20页 |
| 2.1.5 仪器与设备 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-34页 |
| 2.2.1 植物组织总RNA提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2 cNDA链的合成 | 第21页 |
| 2.2.3 DNA的提取 | 第21-23页 |
| 2.2.4 PCR扩增 | 第23页 |
| 2.2.5 PCR产物的回收 | 第23-24页 |
| 2.2.6 连接 | 第24页 |
| 2.2.7 大肠杆菌感受态的转化 | 第24-25页 |
| 2.2.8 测序 | 第25页 |
| 2.2.9 根癌农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第25-26页 |
| 2.2.10 表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.11 拟南芥的转化(参照Clough and Bent 1998,稍有改动) | 第27页 |
| 2.2.12 酵母双杂技术 | 第27-30页 |
| 2.2.13 酵母单杂技术 | 第30页 |
| 2.2.14 GUS组织化学染色 | 第30-31页 |
| 2.2.15 离子含量测定 | 第31页 |
| 2.2.16 半定量表达分析 | 第31-32页 |
| 2.2.17 实时荧光定量PCR分析 | 第32页 |
| 2.2.18 葡萄砧木“1103P”的NaCl、PEG6000和低温处理 | 第32页 |
| 2.2.19 葡萄遗传转化体系建立 | 第32-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-52页 |
| 3.1 葡萄上受盐诱导的R2R3-MYB转录因子的筛选及其在盐处理不同时间的表达分析 | 第34-35页 |
| 3.2 受盐诱导的葡萄R2R3-MYB与拟南芥R2R3-MYB蛋白的系统进化比较 | 第35-36页 |
| 3.3 受盐诱导的葡萄R2R3-MYB基因在不同组织中的表达 | 第36-37页 |
| 3.4 受盐诱导的葡萄R2R3-MYB基因对不同盐浓度的表达响应 | 第37-38页 |
| 3.5 受盐诱导的葡萄R2R3-MYB在PEG6000和冷处理下的表达 | 第38页 |
| 3.6 VvMYB62基因基本生化特性分析 | 第38-42页 |
| 3.6.1 VvMYB62基因序列分析 | 第39-40页 |
| 3.6.2 VvMYB62启动子的克隆和序列分析 | 第40-41页 |
| 3.6.3 VvMYB62的组织定位分析 | 第41页 |
| 3.6.4 VvMYB62蛋白的自主激活活性和同源结合特性分析 | 第41-42页 |
| 3.7 VvMYB62抗盐功能鉴定 | 第42-45页 |
| 3.7.1 VvMYB62过量表达能增强拟南芥种子萌发及植株对盐胁迫的抵抗能力 | 第42-44页 |
| 3.7.2 VvMYB62基因能调节转基因植株中的Na~+、K~+离子平衡 | 第44-45页 |
| 3.8 VvMYB62过量表达提高了盐胁迫相关基因的表达 | 第45-46页 |
| 3.9 VvSOS1、VvNHX1、VvP5CS不是VvMYB62的直接靶基因 | 第46-47页 |
| 3.10 VvMYB62转化葡萄砧木“1103P” | 第47-52页 |
| 3.10.1 基于叶圆盘培养的再生体系 | 第47-49页 |
| 3.10.2 基于生长点悬浮培养的再生体系 | 第49-50页 |
| 3.10.3 卡那霉素对葡萄砧木“1103P”茎尖再生的影响 | 第50-51页 |
| 3.10.4 头孢霉素对葡萄砧木“1103P”茎尖再生的影响 | 第51页 |
| 3.10.5 转基因葡萄植株的获得 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-57页 |
| 4.1 葡萄中盐诱导的MYB转录因子 | 第52-53页 |
| 4.2 VvMYB62的抗盐功能及其可能的调控机制 | 第53-55页 |
| 4.3 葡萄砧木“1103P”的遗传转化 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 附录 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第77页 |
