中文摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-35页 |
·PRRSV 的病原学特征 | 第12-13页 |
·PRRSV 分子生物学特征 | 第13-17页 |
·5’端非编码区(5’-UTR) | 第17页 |
·3’端非编码区(3’-UTR) | 第17页 |
·PRRSV 蛋白组学特征 | 第17-22页 |
·非结构蛋白 | 第17-18页 |
·结构蛋白 | 第18-22页 |
·GP5 | 第18-20页 |
·M 蛋白 | 第20页 |
·N 蛋白 | 第20-21页 |
·其他次要结构蛋白(GP2,GP3 和GP4) | 第21-22页 |
·病毒基因组及蛋白的变异 | 第22-24页 |
·5’UTR 的变异 | 第23页 |
·非结构蛋白编码区的变异 | 第23页 |
·结构蛋白编码区的变异 | 第23-24页 |
·PRRSV 的致病及免疫 | 第24-29页 |
·PRRSV 的致病特点 | 第24-28页 |
·细胞免疫 | 第27-28页 |
·体液免疫 | 第28页 |
·抗体依赖性增强作用 | 第28-29页 |
·PRRS 的预防及控制 | 第29-30页 |
·PRRSV GP5 蛋白抗原表位研究进展 | 第30-32页 |
·PRRSV 的宿主细胞受体研究进展 | 第32-35页 |
2 材料与方法 | 第35-44页 |
·材料 | 第35-36页 |
·试验所用溶液及配制 | 第36-38页 |
·原核表达用溶液及配制 | 第36页 |
·细胞培养用溶液及配制 | 第36-37页 |
·I-ELISA 用溶液及配制 | 第37页 |
·IFA 用溶液及配制 | 第37-38页 |
·ELISA 用溶液及配制 | 第38页 |
·试验所用仪器 | 第38页 |
·表达载体的构建 | 第38-40页 |
·PRRSV-SD-TA TORF5 基因片段的分段扩增 | 第38-39页 |
·目的基因的原核重组表达载体的构建和鉴定 | 第39-40页 |
·基因工程重组表达菌的诱导表达 | 第40页 |
·纯化重组蛋白 | 第40-41页 |
·包涵体的分离与纯化(谷红,2004) | 第40-41页 |
·切胶纯化蛋白 | 第41页 |
·WESTERN-BLOT 免疫印迹 | 第41页 |
·制备小鼠抗GP5 分段蛋白抗血清 | 第41-42页 |
·I-ELISA检测抗GP5分段蛋白小鼠血清抗体效价 | 第42页 |
·MARC-145 细胞培养 | 第42页 |
·IFA检测GP5蛋白与MARC-145细胞相互作用 | 第42-43页 |
·ELISA 检测GP5 蛋白与PRRSV 受体蛋白相互作用 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-58页 |
·阳性重组质粒鉴定 | 第44-46页 |
·蛋白诱导表达 | 第46-48页 |
·包涵体纯化复性蛋白SDS-PAGE | 第48-49页 |
·WESTERN-BLOT 鉴定鉴定结果 | 第49-50页 |
·小鼠血清I-ELISA检测 | 第50-51页 |
·IFA 检测GP5 蛋白与MARC-145 细胞相互作用结果 | 第51-53页 |
·ELISA 检测GP5 蛋白与PRRSV 受体蛋白相互作用结果 | 第53-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
·GP5 分段蛋白基因克隆及表达 | 第58-59页 |
·IFA 检测GP5 蛋白与MARC-145 细胞相互作用 | 第59页 |
·ELISA 检测GP5 蛋白与PRRSV 受体蛋白相互作用 | 第59-61页 |
5 结论 | 第61-62页 |
·GP5 分段蛋白基因克隆及表达 | 第61页 |
·IFA 检测GP5 蛋白与MARC-145 细胞相互作用 | 第61页 |
·ELISA 检测GP5 蛋白与受体蛋白相互作用 | 第61-62页 |
6 参考文献 | 第62-74页 |
7 个人简介 | 第74-75页 |
8 致谢 | 第75页 |