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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白分段表达及鉴定

中文摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
1 引言第11-35页
   ·PRRSV 的病原学特征第12-13页
   ·PRRSV 分子生物学特征第13-17页
     ·5’端非编码区(5’-UTR)第17页
     ·3’端非编码区(3’-UTR)第17页
   ·PRRSV 蛋白组学特征第17-22页
     ·非结构蛋白第17-18页
     ·结构蛋白第18-22页
       ·GP5第18-20页
       ·M 蛋白第20页
       ·N 蛋白第20-21页
       ·其他次要结构蛋白(GP2,GP3 和GP4)第21-22页
   ·病毒基因组及蛋白的变异第22-24页
     ·5’UTR 的变异第23页
     ·非结构蛋白编码区的变异第23页
     ·结构蛋白编码区的变异第23-24页
   ·PRRSV 的致病及免疫第24-29页
     ·PRRSV 的致病特点第24-28页
       ·细胞免疫第27-28页
       ·体液免疫第28页
     ·抗体依赖性增强作用第28-29页
   ·PRRS 的预防及控制第29-30页
   ·PRRSV GP5 蛋白抗原表位研究进展第30-32页
   ·PRRSV 的宿主细胞受体研究进展第32-35页
2 材料与方法第35-44页
   ·材料第35-36页
   ·试验所用溶液及配制第36-38页
     ·原核表达用溶液及配制第36页
     ·细胞培养用溶液及配制第36-37页
     ·I-ELISA 用溶液及配制第37页
     ·IFA 用溶液及配制第37-38页
     ·ELISA 用溶液及配制第38页
   ·试验所用仪器第38页
   ·表达载体的构建第38-40页
     ·PRRSV-SD-TA TORF5 基因片段的分段扩增第38-39页
     ·目的基因的原核重组表达载体的构建和鉴定第39-40页
   ·基因工程重组表达菌的诱导表达第40页
   ·纯化重组蛋白第40-41页
     ·包涵体的分离与纯化(谷红,2004)第40-41页
     ·切胶纯化蛋白第41页
   ·WESTERN-BLOT 免疫印迹第41页
   ·制备小鼠抗GP5 分段蛋白抗血清第41-42页
   ·I-ELISA检测抗GP5分段蛋白小鼠血清抗体效价第42页
   ·MARC-145 细胞培养第42页
   ·IFA检测GP5蛋白与MARC-145细胞相互作用第42-43页
   ·ELISA 检测GP5 蛋白与PRRSV 受体蛋白相互作用第43-44页
3 结果与分析第44-58页
   ·阳性重组质粒鉴定第44-46页
   ·蛋白诱导表达第46-48页
   ·包涵体纯化复性蛋白SDS-PAGE第48-49页
   ·WESTERN-BLOT 鉴定鉴定结果第49-50页
   ·小鼠血清I-ELISA检测第50-51页
   ·IFA 检测GP5 蛋白与MARC-145 细胞相互作用结果第51-53页
   ·ELISA 检测GP5 蛋白与PRRSV 受体蛋白相互作用结果第53-58页
4 讨论第58-61页
   ·GP5 分段蛋白基因克隆及表达第58-59页
   ·IFA 检测GP5 蛋白与MARC-145 细胞相互作用第59页
   ·ELISA 检测GP5 蛋白与PRRSV 受体蛋白相互作用第59-61页
5 结论第61-62页
   ·GP5 分段蛋白基因克隆及表达第61页
   ·IFA 检测GP5 蛋白与MARC-145 细胞相互作用第61页
   ·ELISA 检测GP5 蛋白与受体蛋白相互作用第61-62页
6 参考文献第62-74页
7 个人简介第74-75页
8 致谢第75页

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