中文摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
1 引言 | 第14-30页 |
·猪瘟概况 | 第14页 |
·猪瘟研究进展 | 第14-23页 |
·猪瘟病毒 | 第14-15页 |
·猪瘟病毒基因组结构 | 第15页 |
·猪瘟病毒编码蛋白 | 第15-18页 |
·猪瘟病毒的遗传分型 | 第18-19页 |
·猪瘟的诊断方法 | 第19-21页 |
·猪瘟疫苗 | 第21-22页 |
·强毒与弱毒疫苗的鉴别诊断 | 第22-23页 |
·结语 | 第23页 |
·实时荧光定量PCR 研究进展 | 第23-30页 |
·实时荧光定量PCR 的原理 | 第23-24页 |
·实时荧光定量PCR 的分类 | 第24-25页 |
·实时荧光定量PCR 的定量方法 | 第25-26页 |
·实时荧光定量PCR 的应用 | 第26-30页 |
2 材料与方法 | 第30-46页 |
·反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-NPCR)鉴别猪瘟强毒和疫苗弱毒诊断方法的建立 | 第30-39页 |
·菌株与质粒 | 第30页 |
·试剂 | 第30页 |
·引物设计及合成 | 第30-31页 |
·病毒 | 第31页 |
·待检病料 | 第31页 |
·溶液配制 | 第31-32页 |
·实验仪器 | 第32页 |
·病毒基因组总RNA 的提取 | 第32页 |
·反转录cDNA 的合成 | 第32-33页 |
·套式PCR 扩增反应 | 第33-38页 |
·特异性实验 | 第38页 |
·敏感性实验 | 第38-39页 |
·重复性实验 | 第39页 |
·临床应用 | 第39页 |
·实时荧光定量RT-PCR 反应结合熔解曲线分析鉴别猪瘟强毒与疫苗弱毒的研究 | 第39-43页 |
·菌株与质粒 | 第39页 |
·试剂 | 第39页 |
·引物设计及合成 | 第39-40页 |
·病毒 | 第40页 |
·待检病料 | 第40页 |
·实验仪器 | 第40页 |
·病毒RNA 的提取和反转录cDNA 的合成 | 第40页 |
·常规PCR 扩增反应 | 第40-41页 |
·荧光定量PCR 扩增反应 | 第41页 |
·复合荧光定量PCR 反应 | 第41-42页 |
·特异性实验 | 第42页 |
·敏感性实验 | 第42页 |
·重复性实验 | 第42页 |
·与RT-nPCR 的比较 | 第42-43页 |
·SYBR GREENΙ实时荧光定量 RT-PCR 检测猪瘟疫苗病毒含量的研究 | 第43-46页 |
·菌株与质粒 | 第43页 |
·试剂 | 第43页 |
·引物设计及合成 | 第43页 |
·疫苗 | 第43页 |
·病毒 | 第43页 |
·实验用兔 | 第43页 |
·标准品的制备 | 第43页 |
·实验仪器 | 第43页 |
·病毒RNA 的提取和反转录cDNA 的合成 | 第43-44页 |
·常规PCR 反应 | 第44页 |
·荧光定量PCR | 第44-45页 |
·特异性实验 | 第45页 |
·敏感性实验 | 第45页 |
·重复性实验 | 第45页 |
·标准品的制备 | 第45页 |
·疫苗样品检测 | 第45-46页 |
·荧光定量PCR 检测 | 第46页 |
·兔体定型热反应法检测 | 第46页 |
3 结果与分析 | 第46-57页 |
·反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-NPCR)鉴别猪瘟强毒和疫苗弱毒诊断方法的建立 | 第46-51页 |
·RT-nPCR 检测方法的建立 | 第46-47页 |
·重组质粒的PCR 鉴定及双酶切鉴定 | 第47-48页 |
·复合RT-nPCR 的特异性 | 第48-49页 |
·复合RT-nPCR 的敏感性 | 第49-50页 |
·复合RT-nPCR 的重复性 | 第50页 |
·临床应用 | 第50-51页 |
·实时荧光定量RT-PCR 反应结合熔解曲线分析鉴别猪瘟强毒与疫苗弱毒的研究 | 第51-53页 |
·荧光定量PCR 扩增结果 | 第51页 |
·特异性实验 | 第51页 |
·敏感性实验 | 第51页 |
·重复性实验 | 第51-53页 |
·与RT-nPCR 的比较 | 第53页 |
·SYBR GREEN Ι实时荧光定量RT-PCR 检测猪瘟疫苗病毒含量的研究 | 第53-57页 |
·常规PCR 扩增产物电泳结果 | 第53-54页 |
·荧光定量PCR 扩增结果 | 第54页 |
·特异性实验 | 第54-55页 |
·敏感性实验 | 第55页 |
·重复性实验 | 第55页 |
·标准曲线的建立 | 第55-56页 |
·疫苗样品的检测 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-63页 |
·反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-NPCR)鉴别猪瘟强毒和疫苗弱毒诊断方法的建立 | 第57-59页 |
·实时荧光定量RT-PCR 反应结合熔解曲线分析鉴别猪瘟强毒与疫苗弱毒的研究 | 第59-60页 |
·SYBR GREEN Ι实时荧光定量RT-PCR 检测猪瘟疫苗病毒含量的研究 | 第60-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
6 参考文献 | 第64-74页 |
7 附录 | 第74-75页 |
8 致谢 | 第75-76页 |
9 论文发表情况 | 第76页 |