| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第12-21页 |
| 1.1 概述 | 第12页 |
| 1.2 植物开花相关基因的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3 植物开花抑制基因SVP的研究进展 | 第14-19页 |
| 1.3.1 植物SVP基因的结构 | 第15-16页 |
| 1.3.2 植物SVP同源基因的功能及表达 | 第16-18页 |
| 1.3.3 SVP基因与其他基因的互作 | 第18-19页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 1.5 技术路线 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-25页 |
| 2.1.1 样品材料 | 第21-22页 |
| 2.1.2 试剂药品及配置 | 第22-23页 |
| 2.1.2.1 试剂药品 | 第22-23页 |
| 2.1.2.2 试剂药品配置 | 第23页 |
| 2.1.3 载体与菌株 | 第23页 |
| 2.1.4 引物 | 第23-25页 |
| 2.2 实验仪器与器材 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-37页 |
| 2.3.1 RNA提取与cDNA合成 | 第26-27页 |
| 2.3.2 DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.3.3 MiSVP基因cDNA全长克隆 | 第28页 |
| 2.3.4 MiSVP基因胶回收 | 第28-29页 |
| 2.3.5 胶回收产物与载体连接转化 | 第29-30页 |
| 2.3.6 基因的生物信息学分析 | 第30-31页 |
| 2.3.7 实时荧光定量表达分析 | 第31-32页 |
| 2.3.8 表达载体的构建 | 第32-35页 |
| 2.3.8.1 大肠杆菌与农杆菌感受态的制备 | 第32-33页 |
| 2.3.8.2 双酶切及目的基因与载体连接 | 第33页 |
| 2.3.8.3 转化 | 第33-34页 |
| 2.3.8.4 质粒提取 | 第34-35页 |
| 2.3.9 转化农杆菌 | 第35页 |
| 2.3.10 拟南芥的种植与根癌农杆菌介导转化拟南芥 | 第35-37页 |
| 2.3.10.1 播种拟南芥 | 第35-36页 |
| 2.3.10.2 农杆菌介导转化拟南芥 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-63页 |
| 3.1 芒果总RNA提取与cDNA合成 | 第37-38页 |
| 3.2 MiSVPs同源基因克降 | 第38-40页 |
| 3.3 生物信息学分析 | 第40-51页 |
| 3.3.1 氨基酸序列分析和蛋白质理化性质分折 | 第40-48页 |
| 3.3.2 蛋白质二级结构和三级结构 | 第48-49页 |
| 3.3.3 氨基酸序列同源性比对和进化分析 | 第49-51页 |
| 3.4 MiSVP基因表达模式分析 | 第51-59页 |
| 3.4.1 组织器官中的表达分析 | 第51-54页 |
| 3.4.2 时间表达分析 | 第54-56页 |
| 3.4.3 多效唑处理表达分析 | 第56页 |
| 3.4.4 逆境处理表达分析 | 第56-59页 |
| 3.5 真核表达载体构建 | 第59-63页 |
| 3.5.1 构建表达载体 | 第59-61页 |
| 3.5.2 农杆菌转化 | 第61-63页 |
| 4 讨论与结论 | 第63-69页 |
| 4.1 讨论 | 第63-66页 |
| 4.1.1 基因克隆与生物信息学分析 | 第63页 |
| 4.1.2 基因表达模式分析 | 第63-65页 |
| 4.1.3 基因表达载体构建 | 第65-66页 |
| 4.2 结论 | 第66-69页 |
| 4.2.1 基因克隆与生物信息学分析 | 第66-67页 |
| 4.2.2 荧光定量 | 第67-68页 |
| 4.2.3 基因表达载体构建 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第80页 |