| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 miRNA概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 miRNA概述 | 第13-14页 |
| 1.1.2 研究miRNA功能及其靶标预测的软件和数据库 | 第14页 |
| 1.2 非编码RNA对miRNA的表达调控 | 第14-16页 |
| 1.2.1 lncRNA | 第14-15页 |
| 1.2.2 circRNA | 第15-16页 |
| 1.3 miRNA在睾丸组织发育/精子生成中的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 miR-362 研究进展 | 第17-20页 |
| 1.4.1 miR-362 在肿瘤疾病中的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4.2 miR-362 在生殖系统发育中的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第20-21页 |
| 第二章 沙子岭猪睾丸组织不同发育阶段MIR-362 表达量 | 第21-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 实验样本 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 主要试剂制备 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测miR362表达量 | 第22-25页 |
| 2.3 数据分析 | 第25页 |
| 2.4 结果 | 第25-26页 |
| 2.4.1 总RNA质检结果 | 第25页 |
| 2.4.2 睾丸组织不同发育时期表达量 | 第25-26页 |
| 2.4.3 D30时期不同组织中miR-362 表达量 | 第26页 |
| 2.5 讨论 | 第26-27页 |
| 2.6 小结 | 第27-28页 |
| 第三章 MIR-362 生物信息学分析 | 第28-35页 |
| 3.1 miR-362 靶基因预测 | 第28-31页 |
| 3.2 靶基因功能注释 | 第31-32页 |
| 3.3 miR-362 与预测靶基因结合位点保守性分析 | 第32-34页 |
| 3.4 讨论 | 第34页 |
| 3.5 小结 | 第34-35页 |
| 第四章 MIR-362 对预测靶基因表达量的影响研究 | 第35-44页 |
| 4.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 4.1.1 实验样本 | 第35页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第35页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第35-36页 |
| 4.1.4 主要试剂配制 | 第36页 |
| 4.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 4.2.1 细胞复苏及传代培养 | 第36-37页 |
| 4.2.2 细胞转染 | 第37页 |
| 4.2.3 qRT-PCR检测过表达/抑制表达细胞中miR-362 和预测靶基因表达 | 第37-39页 |
| 4.3 数据统计 | 第39页 |
| 4.4 结果 | 第39-43页 |
| 4.4.1 过表达及抑制表达细胞中miR-326 表达量 | 第39-40页 |
| 4.4.2 过表达miR-362 细胞中预测靶基因的表达量 | 第40-42页 |
| 4.4.3 抑制表达miR-362 细胞中预测靶基因的表达量 | 第42-43页 |
| 4.5 讨论 | 第43页 |
| 4.6 小结 | 第43-44页 |
| 第五章 睾丸组织不同发育阶段PIK3CA、STRN3、RMI1及ZNF644表 | 第44-48页 |
| 5.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 5.1.1 实验样本 | 第44页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第44页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第44-45页 |
| 5.2 实验方法 | 第45页 |
| 5.2.1 qRT-PCR检测睾丸组织不同发育阶段miR-362 及预测靶基因PIK3CA、STRN3、RMI1、ZNF644表达量 | 第45页 |
| 5.2.2 实验数据分析 | 第45页 |
| 5.3 结果 | 第45-47页 |
| 5.3.1 睾丸组织不同发育阶段miR-362 及PIK3CA、STRN3、RMI1、ZNF644表达量 | 第45-47页 |
| 5.4 讨论 | 第47页 |
| 5.5 小结 | 第47-48页 |
| 第六章 MIR-362 与预测靶基因ZNF644靶标关系验证 | 第48-58页 |
| 6.1 实验材料 | 第48-49页 |
| 6.1.1 实验样品 | 第48页 |
| 6.1.2 主要试剂 | 第48-49页 |
| 6.1.3 实验仪器 | 第49页 |
| 6.1.4 主要试剂制备 | 第49页 |
| 6.2 实验方法 | 第49-53页 |
| 6.2.1 ZNF644基因 3′UTR双荧光素酶靶标载体构建 | 第49-52页 |
| 6.2.2 ST细胞复苏及培养 | 第52页 |
| 6.2.3 细胞转染 | 第52-53页 |
| 6.2.4 双荧光素酶报告基因检测 | 第53页 |
| 6.2.5 实验数据分析 | 第53页 |
| 6.3 结果与分析 | 第53-55页 |
| 6.3.1 psi-CHECK2-ZNF644-3′UTR-WT/MUT荧光素酶报告基因载体 | 第53-54页 |
| 6.3.2 ZNF644基因双荧光素酶检测结果 | 第54-55页 |
| 6.4 讨论 | 第55-57页 |
| 6.5 小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68-69页 |
