| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 引言 | 第6-9页 |
| 第一章 荧光假单胞菌1-Cys-Prx基因的克隆表达和纯化以及活性分析 | 第9-26页 |
| 1 材料和方法 | 第9-16页 |
| 1.1 材料 | 第9-10页 |
| 1.1.1 菌株 | 第9页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第9页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第9-10页 |
| 1.2 方法 | 第10-16页 |
| 1.2.1 荧光假单胞菌中1-半胱氨酸过氧化物酶(1-Cys-Prx)基因的获取 | 第10-11页 |
| 1.2.2 目的基因的克隆 | 第11-13页 |
| 1.2.3 目的蛋白的诱导表达与纯化 | 第13-15页 |
| 1.2.4 目的蛋白含量测定和活性分析 | 第15-16页 |
| 1.2.5 E.coli BL21(DE3)中目的蛋白的表达对双氧水耐受性的影响 | 第16页 |
| 2 结果与分析 | 第16-24页 |
| 2.1 1-半胱氨酸过氧化物酶(1-Cys-Prx)基因的获取与序列分析 | 第16-18页 |
| 2.2 目的基因的克隆表达与纯化 | 第18-20页 |
| 2.3 重组蛋白活性分析 | 第20-22页 |
| 2.3.1 重组蛋白浓度的测定 | 第20页 |
| 2.3.2 重组蛋白活性的测定 | 第20-21页 |
| 2.3.3 温度对重组蛋白活性的影响 | 第21-22页 |
| 2.3.4 pH对重组蛋白活性的影响 | 第22页 |
| 2.4 E.coli BL21(DE3)中重组蛋白的表达对双氧水耐受性的影响 | 第22-24页 |
| 3 讨论 | 第24-26页 |
| 第二章 黑松过氧化物酶cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达 | 第26-35页 |
| 1 实验方法 | 第26-29页 |
| 1.1 鞭毛蛋白处理的黑松愈伤组织的RNA组学差异性分析及目的基因的筛选 | 第26-27页 |
| 1.1.1 黑松愈伤组织的培养和愈伤组织悬浮细胞的制备 | 第26页 |
| 1.1.2 荧光假单胞菌鞭毛蛋白处理黑松愈伤组织悬浮细胞 | 第26页 |
| 1.1.3 筛选目的基因-过氧化物酶(POD) | 第26-27页 |
| 1.2 cDNA的克隆与生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 1.2.1 过氧化物酶POD的克隆 | 第27-28页 |
| 1.2.2 对POD基因进行生物信息学分析 | 第28页 |
| 1.3 工程菌构建及重组蛋白的表达与纯化 | 第28页 |
| 1.4 目的蛋白的活性分析 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-33页 |
| 2.1 过氧化物酶基因的克隆与生物信息学分析 | 第29-31页 |
| 2.2 目的蛋白的表达与纯化 | 第31-32页 |
| 2.3 目的蛋白的活性分析 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-40页 |
| 综述 | 第40-58页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
