| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 AHLs 对植物的影响 | 第9-10页 |
| 1.2 拟南芥根系统研究进展 | 第10-13页 |
| 1.2.1 根分生组织维持 | 第11-12页 |
| 1.2.2 导管的发育 | 第12页 |
| 1.2.3 向地性反应 | 第12页 |
| 1.2.4 侧根的发育 | 第12-13页 |
| 1.3 植物的防卫反应 | 第13-15页 |
| 1.3.1 植物防卫信号的识别 | 第13-14页 |
| 1.3.2 参与植物防卫反应的信号分子 | 第14-15页 |
| 1.3.3 植物防御反应信号转导途径拮抗及协同作用 | 第15页 |
| 1.4 课题的意义 | 第15-17页 |
| 第二章 表达菌株的构建以及相关蛋白的研究 | 第17-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-21页 |
| 2.1.1 实验仪器和材料 | 第17-18页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.3 溶液配方 | 第19-21页 |
| 2.1.4 试验所用的引物 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 PCR 反应体系与控制条件 | 第21页 |
| 2.2.2 目的基因的克隆 | 第21-22页 |
| 2.2.3 pMD18-T 与 TK 的链接 | 第22页 |
| 2.2.4 双酶切鉴定 | 第22-23页 |
| 2.2.5 目的基因与载体质粒的连接 | 第23页 |
| 2.2.6 （ Escherichia coli ） DH5α热激转化 | 第23页 |
| 2.2.7 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶 | 第23-24页 |
| 2.2.8 Western Blot 检测 | 第24-25页 |
| 2.2.9 酶联免疫法（ELISA ） | 第25-26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-29页 |
| 2.3.1 原核表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.3.2 蛋白表达条件优化 | 第27-28页 |
| 2.3.3 蛋白与 AHLs 结合的受体动力学分析 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 拟南芥中TK基因与AHLs作用的研究 | 第31-51页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 3.1.1 试验仪器 | 第31-32页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.3 引物及其序列 | 第33-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-40页 |
| 3.2.1 种子消毒方法及营养液配置 | 第34页 |
| 3.2.2 提取植物 RN A 的方法 | 第34-35页 |
| 3.2.3 RT-PCR 反应体系与条件 | 第35页 |
| 3.2.4 Real Time PCR 检测方法 | 第35-36页 |
| 3.2.5 提取拟南芥全蛋白 | 第36-37页 |
| 3.2.6 考马斯亮蓝 G-250 法测定蛋白浓度 | 第37-38页 |
| 3.2.7 从菌液中提取质粒 DNA | 第38-39页 |
| 3.2.8 从琼脂糖凝胶中回收 DNA 片段 | 第39页 |
| 3.2.9 制备农杆菌 GV3101 感受态 | 第39-40页 |
| 3.2.10 农杆菌 GV3101 的热击转化 | 第40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-49页 |
| 3.3.1 突变体的获得、筛选和鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3.2 AHLs对不同基因型拟南芥主根生长的影响 | 第41-42页 |
| 3.3.3 Real Time PCR 检测 TK 基因的表达量 | 第42-44页 |
| 3.3.4 TK 通路的研究 | 第44-45页 |
| 3.3.5 抗逆性研究 | 第45-47页 |
| 3.3.6 构建过表达和回复株 | 第47-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-53页 |
| 第五章 展望 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
