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转酮醇酶基因在植物感应AHLs中的功能研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
符号说明第8-9页
第一章 绪论第9-17页
    1.1 AHLs 对植物的影响第9-10页
    1.2 拟南芥根系统研究进展第10-13页
        1.2.1 根分生组织维持第11-12页
        1.2.2 导管的发育第12页
        1.2.3 向地性反应第12页
        1.2.4 侧根的发育第12-13页
    1.3 植物的防卫反应第13-15页
        1.3.1 植物防卫信号的识别第13-14页
        1.3.2 参与植物防卫反应的信号分子第14-15页
        1.3.3 植物防御反应信号转导途径拮抗及协同作用第15页
    1.4 课题的意义第15-17页
第二章 表达菌株的构建以及相关蛋白的研究第17-31页
    2.1 实验材料第17-21页
        2.1.1 实验仪器和材料第17-18页
        2.1.2 实验试剂第18-19页
        2.1.3 溶液配方第19-21页
        2.1.4 试验所用的引物第21页
    2.2 实验方法第21-26页
        2.2.1 PCR 反应体系与控制条件第21页
        2.2.2 目的基因的克隆第21-22页
        2.2.3 pMD18-T 与 TK 的链接第22页
        2.2.4 双酶切鉴定第22-23页
        2.2.5 目的基因与载体质粒的连接第23页
        2.2.6 ( Escherichia coli ) DH5α热激转化第23页
        2.2.7 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶第23-24页
        2.2.8 Western Blot 检测第24-25页
        2.2.9 酶联免疫法(ELISA )第25-26页
    2.3 实验结果第26-29页
        2.3.1 原核表达载体的构建第26-27页
        2.3.2 蛋白表达条件优化第27-28页
        2.3.3 蛋白与 AHLs 结合的受体动力学分析第28-29页
    2.4 讨论第29-31页
第三章 拟南芥中TK基因与AHLs作用的研究第31-51页
    3.1 实验材料第31-34页
        3.1.1 试验仪器第31-32页
        3.1.2 主要试剂第32-33页
        3.1.3 引物及其序列第33-34页
    3.2 实验方法第34-40页
        3.2.1 种子消毒方法及营养液配置第34页
        3.2.2 提取植物 RN A 的方法第34-35页
        3.2.3 RT-PCR 反应体系与条件第35页
        3.2.4 Real Time PCR 检测方法第35-36页
        3.2.5 提取拟南芥全蛋白第36-37页
        3.2.6 考马斯亮蓝 G-250 法测定蛋白浓度第37-38页
        3.2.7 从菌液中提取质粒 DNA第38-39页
        3.2.8 从琼脂糖凝胶中回收 DNA 片段第39页
        3.2.9 制备农杆菌 GV3101 感受态第39-40页
        3.2.10 农杆菌 GV3101 的热击转化第40页
    3.3 实验结果第40-49页
        3.3.1 突变体的获得、筛选和鉴定第40-41页
        3.3.2 AHLs对不同基因型拟南芥主根生长的影响第41-42页
        3.3.3 Real Time PCR 检测 TK 基因的表达量第42-44页
        3.3.4 TK 通路的研究第44-45页
        3.3.5 抗逆性研究第45-47页
        3.3.6 构建过表达和回复株第47-49页
    3.4 讨论第49-51页
第四章 结论第51-53页
第五章 展望第53-55页
参考文献第55-59页
附录第59-61页
致谢第61页

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