| 摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩略语 | 第12-16页 |
| 第一部分 ：探讨miR-21-5p在高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞中存在异常表达 | 第16-31页 |
| 1 前言 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-23页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第19页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第19-20页 |
| 2.2.3 MTT检测细胞增殖 | 第20页 |
| 2.2.4 Real-timePCR检测各组细胞VEGF、VEGF-R2、miR-21-5p的表达 | 第20-21页 |
| 2.2.5 Westernblot检测VEGF、VEGF-R2蛋白的表达 | 第21-23页 |
| 3 结果 | 第23-29页 |
| 3.1 MTT检测对照组,高糖组,甘露醇对照组各组细胞24h、48h和72h增殖情况 | 第23-24页 |
| 3.2 Real-timePCR检测对照组,高糖组,甘露醇对照组各组细胞VEGF、VEGF-R2、miR-21-5p的表达 | 第24-27页 |
| 3.3 Westernblot检测对照组,高糖组,甘露醇对照组各组细胞VEGF、VEGF-R2蛋白的表达 | 第27-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 5 结论 | 第30-31页 |
| 第二部分 ：miR-21-5p沉默对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞增殖、迁移及成管的影响 | 第31-49页 |
| 1 前言 | 第31-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-34页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第32页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第33-34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第34页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第34页 |
| 2.3 MTT检测各组细胞增殖情况 | 第34-35页 |
| 2.4 免疫荧光观察细胞增殖标记物Ki67,并对阳性细胞进行计数 | 第35页 |
| 2.5 划痕实验检测高糖处理12h、24h后上述四组HRMECs的迁移能力 | 第35页 |
| 2.6 成管实验检测四组细胞的管腔形成能力 | 第35-36页 |
| 2.7 Westernblot检测高糖处理24h后四组细胞MMP-2、MMP-9、VEGF、HIF-1α、PDCD4、maspin、p-AKT、AKT、p-ERK、ERK蛋白的表达 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-46页 |
| 3.1 MTT检测各组细胞增殖情况 | 第37-46页 |
| 3.1.1 免疫荧光观察细胞增殖标记物Ki67,并对阳性细胞进行计数 | 第38-39页 |
| 3.1.2 划痕实验检测高糖处理12h和24h后上述四组细胞的迁移能力 | 第39-41页 |
| 3.1.3 成管实验检测四组细胞的管腔形成能力 | 第41-42页 |
| 3.1.4 Westernblot检测高糖处理24h后四组细胞MMP-2、MMP-9、VEGF、HIF-1α、maspin、p-AKT、AKT、p-ERK、ERK蛋白的表达 | 第42-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 第三部分 ：PI3K/AKT和ERK信号通路抑制对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞的调节 | 第49-58页 |
| 1 前言 | 第49-50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第50页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第50页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第50-51页 |
| 2.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第51页 |
| 2.2.2 细胞传代 | 第51-52页 |
| 2.3 划痕实验检测人视网膜内皮细胞迁移能力(时间点：12h、24h) | 第52页 |
| 2.4 成管实验分析细胞管腔形成能力 | 第52-53页 |
| 2.5 Westernblot检测高糖处理24h后VEGF、HIF-1α、MMP-2、MMP-9蛋白的表达 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-56页 |
| 3.1 划痕实验检测细胞迁移能力(时间点：12h、24h) | 第53-54页 |
| 3.2 成管实验分析细胞管腔形成能力 | 第54-55页 |
| 3.3 Westernblot检测高糖处理24h后VEGF、HIF-1α、MMP-2、MMP-9蛋白的表达 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 综述 | 第66-78页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 个人简历 | 第80页 |
