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星斑川鲽(Platichthys stellatus)小电导钙激活型钾通道SKCa2基因的克隆及免疫功能研究

CONTENTS第7-10页
中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-13页
缩略词第14-15页
第一章 前言第15-31页
    1.1 离子通道概述第15-17页
    1.2 钾离子通道概述第17-24页
        1.2.1 钾离子通道的结构第17-19页
        1.2.2 钾离子通道的分类第19-24页
    1.3 钾离子通道与鱼类免疫机制研究第24-27页
        1.3.1 鱼类的免疫机制概述第24-25页
        1.3.2 钾离子通道在鱼体免疫中的作用第25-27页
    1.4 小电导钙激活型钾离子通道研究进展第27-28页
    1.5 本研究的目的及意义第28-31页
第二章 星斑川鲽SKCa2基因的克隆与序列的生物信息学分析第31-53页
    2.1 材料与方法第31-40页
        2.1.1 实验材料第31页
        2.1.2 实验试剂和仪器第31-32页
        2.1.3 SKCa2基因PCR引物设计第32页
        2.1.4 星斑川鲽脑总RNA提取第32-33页
        2.1.5 cDNA第一链的合成第33-34页
        2.1.6 PCR扩增星斑川鲽SKCa2基因核心片段序列第34页
        2.1.7 PCR产物纯化第34-35页
        2.1.8 目的片段与T载体连接并转化感受态细胞第35页
        2.1.9 挑取单菌落进行阳性检测第35-36页
        2.1.10 测序结果验证第36页
        2.1.11 星斑川鲽SKCa2基因的5’RACE第36-38页
        2.1.12 星斑川鲽SKCa2基因的3’RACE第38-40页
        2.1.13 星斑川鲽SKCa2基因的测序结果拼接第40页
        2.1.14 星斑川鲽SKCa2基因序列的生物信息学分析第40页
    2.2 实验结果第40-49页
        2.2.1 总RNA的提取第40页
        2.2.2 星斑川鲽SKCa2基因核心片段序列扩增第40页
        2.2.3 星斑川鲽SKCa2基因的5'-RACE和3'-RACE第40-41页
        2.2.4 拼接获取星斑川鲽SKCa2的cDNA全长第41-42页
        2.2.5 星斑川鲽SKCa2基因的生物信息学分析第42-49页
    2.3 讨论第49-53页
第三章 星斑川鲽SKCa2通道在LPS刺激下的表达模式第53-63页
    3.1 材料与方法第53-56页
        3.1.1 实验材料第53页
        3.1.2 实验试剂和仪器第53-54页
        3.1.3 RT-PCR引物设计第54页
        3.1.4 各组织总RNA提取及cDNA合成第54-55页
        3.1.5 cDNA质量检测第55页
        3.1.6 星斑川鲽SKCa2在不同组织中的表达第55-56页
        3.1.7 星斑川鲽SKCa2在LPS刺激不同时间后各组织表达模式的变化第56页
        3.1.8 实验数据处理第56页
    3.2 实验结果第56-60页
        3.2.1 各组织cDNA的质量及RT-PCR引物特异性第56页
        3.2.2 SKCa2 mRNA在不同组织的相对表达量第56-57页
        3.2.3 SKCa2 mRNA在LPS刺激不同时间后各组织中的相对表达量变化第57-60页
    3.3 讨论第60-63页
第四章 星斑川鲽SKCa2在淋巴细胞中的免疫应答机制第63-73页
    4.1 材料与方法第63-67页
        4.1.1 实验材料第63页
        4.1.2 实验试剂和仪器第63-64页
        4.1.3 星斑川鲽外周血淋巴细胞的制备第64-65页
        4.1.4 淋巴细胞计数第65页
        4.1.5 Apamin对淋巴细胞增殖的影响第65-66页
        4.1.6 星斑川鲽淋巴细胞增殖测定第66页
        4.1.7 星斑川鲽淋巴细胞呼吸爆发活性的测定第66-67页
    4.2 实验结果第67-70页
        4.2.1 淋巴细胞的分离与计数第67页
        4.2.2 Apamin对淋巴细胞增殖的影响第67-68页
        4.2.3 淋巴细胞增殖测定第68-69页
        4.2.4 淋巴细胞呼吸爆发活性测定第69-70页
    4.3 讨论第70-73页
第五章 总结与展望第73-77页
    5.1 实验总结第73-74页
    5.2 展望第74-77页
参考文献第77-87页
致谢第87-89页
攻读学位期间发表的学术论文第89-90页
学位论文评阅及答辩情况表第90页

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