CONTENTS | 第7-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
缩略词 | 第14-15页 |
第一章 前言 | 第15-31页 |
1.1 离子通道概述 | 第15-17页 |
1.2 钾离子通道概述 | 第17-24页 |
1.2.1 钾离子通道的结构 | 第17-19页 |
1.2.2 钾离子通道的分类 | 第19-24页 |
1.3 钾离子通道与鱼类免疫机制研究 | 第24-27页 |
1.3.1 鱼类的免疫机制概述 | 第24-25页 |
1.3.2 钾离子通道在鱼体免疫中的作用 | 第25-27页 |
1.4 小电导钙激活型钾离子通道研究进展 | 第27-28页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第28-31页 |
第二章 星斑川鲽SKCa2基因的克隆与序列的生物信息学分析 | 第31-53页 |
2.1 材料与方法 | 第31-40页 |
2.1.1 实验材料 | 第31页 |
2.1.2 实验试剂和仪器 | 第31-32页 |
2.1.3 SKCa2基因PCR引物设计 | 第32页 |
2.1.4 星斑川鲽脑总RNA提取 | 第32-33页 |
2.1.5 cDNA第一链的合成 | 第33-34页 |
2.1.6 PCR扩增星斑川鲽SKCa2基因核心片段序列 | 第34页 |
2.1.7 PCR产物纯化 | 第34-35页 |
2.1.8 目的片段与T载体连接并转化感受态细胞 | 第35页 |
2.1.9 挑取单菌落进行阳性检测 | 第35-36页 |
2.1.10 测序结果验证 | 第36页 |
2.1.11 星斑川鲽SKCa2基因的5’RACE | 第36-38页 |
2.1.12 星斑川鲽SKCa2基因的3’RACE | 第38-40页 |
2.1.13 星斑川鲽SKCa2基因的测序结果拼接 | 第40页 |
2.1.14 星斑川鲽SKCa2基因序列的生物信息学分析 | 第40页 |
2.2 实验结果 | 第40-49页 |
2.2.1 总RNA的提取 | 第40页 |
2.2.2 星斑川鲽SKCa2基因核心片段序列扩增 | 第40页 |
2.2.3 星斑川鲽SKCa2基因的5'-RACE和3'-RACE | 第40-41页 |
2.2.4 拼接获取星斑川鲽SKCa2的cDNA全长 | 第41-42页 |
2.2.5 星斑川鲽SKCa2基因的生物信息学分析 | 第42-49页 |
2.3 讨论 | 第49-53页 |
第三章 星斑川鲽SKCa2通道在LPS刺激下的表达模式 | 第53-63页 |
3.1 材料与方法 | 第53-56页 |
3.1.1 实验材料 | 第53页 |
3.1.2 实验试剂和仪器 | 第53-54页 |
3.1.3 RT-PCR引物设计 | 第54页 |
3.1.4 各组织总RNA提取及cDNA合成 | 第54-55页 |
3.1.5 cDNA质量检测 | 第55页 |
3.1.6 星斑川鲽SKCa2在不同组织中的表达 | 第55-56页 |
3.1.7 星斑川鲽SKCa2在LPS刺激不同时间后各组织表达模式的变化 | 第56页 |
3.1.8 实验数据处理 | 第56页 |
3.2 实验结果 | 第56-60页 |
3.2.1 各组织cDNA的质量及RT-PCR引物特异性 | 第56页 |
3.2.2 SKCa2 mRNA在不同组织的相对表达量 | 第56-57页 |
3.2.3 SKCa2 mRNA在LPS刺激不同时间后各组织中的相对表达量变化 | 第57-60页 |
3.3 讨论 | 第60-63页 |
第四章 星斑川鲽SKCa2在淋巴细胞中的免疫应答机制 | 第63-73页 |
4.1 材料与方法 | 第63-67页 |
4.1.1 实验材料 | 第63页 |
4.1.2 实验试剂和仪器 | 第63-64页 |
4.1.3 星斑川鲽外周血淋巴细胞的制备 | 第64-65页 |
4.1.4 淋巴细胞计数 | 第65页 |
4.1.5 Apamin对淋巴细胞增殖的影响 | 第65-66页 |
4.1.6 星斑川鲽淋巴细胞增殖测定 | 第66页 |
4.1.7 星斑川鲽淋巴细胞呼吸爆发活性的测定 | 第66-67页 |
4.2 实验结果 | 第67-70页 |
4.2.1 淋巴细胞的分离与计数 | 第67页 |
4.2.2 Apamin对淋巴细胞增殖的影响 | 第67-68页 |
4.2.3 淋巴细胞增殖测定 | 第68-69页 |
4.2.4 淋巴细胞呼吸爆发活性测定 | 第69-70页 |
4.3 讨论 | 第70-73页 |
第五章 总结与展望 | 第73-77页 |
5.1 实验总结 | 第73-74页 |
5.2 展望 | 第74-77页 |
参考文献 | 第77-87页 |
致谢 | 第87-89页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第89-90页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第90页 |