| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 中英文缩略词表 | 第10-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-17页 |
| 1.1 柯萨奇病毒 B 组 3型（Coxsackievirus group B type 3,CVB3） | 第12-14页 |
| 1.2 VP3 蛋白 | 第14页 |
| 1.3 酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system,YTS) | 第14-16页 |
| 1.4 本论文研究基础和研究意义 | 第16-17页 |
| 第2章 材料与方法 | 第17-41页 |
| 2.1 材料 | 第17-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-41页 |
| 2.2.1 pGBKT7-VP3 重组质粒的构建（如图 2.1） | 第25-31页 |
| 2.2.2 pGBKT7-VP3 重组质粒在酵母菌 AH109 中的表达 | 第31-33页 |
| 2.2.3 检测 DNA-BD-c-Myc-VP3 融合蛋白对报告基因的转录自激活 | 第33-34页 |
| 2.2.4 检测 DNA-BD-c-Myc-VP3 融合蛋白对酵母菌配合的影响 | 第34页 |
| 2.2.5 大规模酵母配合实验 | 第34-36页 |
| 2.2.6 阳性候选克隆的初步分析 | 第36-38页 |
| 2.2.7 α-半乳糖苷酶定量分析蛋白质-蛋白质相互作用的强弱 | 第38-40页 |
| 2.2.8 检测筛选出的 10种阳性蛋白对报告基因的转录自激活作用 | 第40页 |
| 2.2.9 回返配合实验 | 第40-41页 |
| 第3章 结果 | 第41-53页 |
| 3.1 VP3 基因的扩增 | 第41页 |
| 3.2 重组质粒 pGBKT7-VP3 的酶切分析 | 第41-42页 |
| 3.3 重组质粒 pGBKT7-VP3 的基因测序 | 第42页 |
| 3.4 AH109 菌株的表型验证 | 第42页 |
| 3.5 阳性酵母菌 AH109[pGBKT7-VP3]的表型验证 | 第42-43页 |
| 3.6 阳性酵母菌 AH109[pGBKT7-VP3]中 VP3 基因的验证 | 第43页 |
| 3.7 VP3 融合蛋白表达的检测 | 第43-44页 |
| 3.8 检测 VP3 融合蛋白对报告基因的转录自激活作用 | 第44-45页 |
| 3.9 DNA-BD-c-Myc-VP3 蛋白对酵母配合功能影响的检测 | 第45页 |
| 3.10 人心脏 cDNA 文库滴定 | 第45页 |
| 3.11 阳性候选克隆酶切归类 | 第45-46页 |
| 3.12 DNA序列测定和同源性分析 | 第46-48页 |
| 3.13 VP3 蛋白与 10种阳性蛋白相互作用强弱的分析 | 第48-50页 |
| 3.14 筛选出的 10种阳性蛋白对报告基因的转录自激活作用 | 第50-52页 |
| 3.15 VP3 蛋白与 10种阳性蛋白相互作用的进一步验证 | 第52-53页 |
| 第4章 讨论 | 第53-60页 |
| 4.1 质粒构建载体的选择 | 第53-54页 |
| 4.2 VP3 蛋白作为诱饵蛋白的可行性 | 第54页 |
| 4.3 研究与 VP3 蛋白相互作用蛋白的方法选择 | 第54-55页 |
| 4.4 与 VP3相互作用的 10 种人细胞蛋白 | 第55-60页 |
| 4.4.1 TNNI3 | 第55-56页 |
| 4.4.2 ALDH2 | 第56-57页 |
| 4.4.3 ERGIC1 | 第57页 |
| 4.4.4 CKM | 第57-58页 |
| 4.4.5 EIF4A2 | 第58页 |
| 4.4.6 ACTA1 | 第58页 |
| 4.4.7 LMOD3 | 第58-59页 |
| 4.4.8 HADHB | 第59页 |
| 4.4.9 GAPDH | 第59页 |
| 4.4.10 ASPG | 第59-60页 |
| 第5章 结论与展望 | 第60-61页 |
| 5.1 结论 | 第60页 |
| 5.2 展望 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附图 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第70-71页 |
| 综述 | 第71-78页 |
| 参考文献 | 第76-78页 |
