| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1.1 HCV流行病学 | 第9-11页 |
| 1.1.1 HCV的分布及传播 | 第9-10页 |
| 1.1.2 HCV感染的自然史 | 第10-11页 |
| 1.2 HCV的生物学特征 | 第11-14页 |
| 1.2.1 HCV的形态理化性质 | 第11页 |
| 1.2.2 基因组和蛋白组成 | 第11-13页 |
| 1.2.3 HCV基因的变异性 | 第13-14页 |
| 1.3 HCV的诊断治疗与预防 | 第14-16页 |
| 1.3.1 HCV抗病毒治疗和疫苗研究 | 第14页 |
| 1.3.2 目前HCV的实验室检测技术 | 第14-16页 |
| 1.4 单克隆抗体技术的发展及应用 | 第16-17页 |
| 1.4.1 单克隆抗体技术概述 | 第16-17页 |
| 1.4.2 单克隆抗体在免疫学方面的应用 | 第17页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第17-19页 |
| 第2章 HCV Core 1-120aa基因的克隆及表达 | 第19-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 菌株、载体、酶及试剂 | 第19页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要试剂配制 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-26页 |
| 2.2.1 HCV core蛋白的抗原表位特性分析 | 第21页 |
| 2.2.2 HCV总RNA提取及鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.3 全长HCV cDNA的扩增和克隆 | 第22-23页 |
| 2.2.4 core1-120和core1-60基因的扩增 | 第23页 |
| 2.2.5 构建含目的基因的表达体系 | 第23-24页 |
| 2.2.6 core1-120,core1-60和GST-core1-60蛋白表达及纯化 | 第24-26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-31页 |
| 2.3.1 core蛋白表位特性分析 | 第26页 |
| 2.3.2 5'UTR HCV RNA的可行性鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.3 5'UTR-E1,corel-120和corel-60的基因扩增 | 第27-29页 |
| 2.3.4 表达载体的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.5 corel-120,corel-60和GST-corel-60的表达及分析鉴定 | 第30-31页 |
| 2.4 讨论 | 第31-33页 |
| 第3章 HCV Core 1-120aa单克隆抗体的制备及鉴定 | 第33-50页 |
| 3.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.1.1 实验动物及细胞 | 第33页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第33页 |
| 3.1.3 主要试剂配制 | 第33-34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-41页 |
| 3.2.1 BALB/C小鼠的免疫 | 第34-35页 |
| 3.2.2 包被原最佳包被浓度的判断标准及确定 | 第35页 |
| 3.2.3 ELISA法测定小鼠血清抗体的效价 | 第35页 |
| 3.2.4 细胞融合 | 第35-37页 |
| 3.2.5 筛选及建立mAb细胞株 | 第37-38页 |
| 3.2.6 单克隆抗体腹水的纯化 | 第38-39页 |
| 3.2.7 单克隆抗体活性测定 | 第39-41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-48页 |
| 3.3.1 最佳包被原浓度的确定 | 第41-42页 |
| 3.3.2 小鼠血清效价的测定 | 第42-43页 |
| 3.3.3 细胞融合及亚克隆 | 第43页 |
| 3.3.4 单克隆抗体的特异性鉴定 | 第43页 |
| 3.3.5 单克隆抗体亚型鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.6 单克隆抗体纯度分析 | 第44-45页 |
| 3.3.7 WB鉴定试验 | 第45页 |
| 3.3.8 腹水单克隆抗体效价测定 | 第45-46页 |
| 3.3.9 单克隆抗体抗原结合表位的分析 | 第46-47页 |
| 3.3.10 配对实验结果 | 第47页 |
| 3.3.11 杂交瘤细胞株稳定性鉴定 | 第47-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-50页 |
| 附录 | 第50-55页 |
| 实验步骤 | 第50-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
