| 本论文创新点 | 第5-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 本论文缩略词表 | 第13-15页 |
| 1 引言 | 第15-37页 |
| 1.1 JA信号途径 | 第15-26页 |
| 1.1.1 JA的合成途径 | 第15页 |
| 1.1.2 JA的信号转导途径 | 第15-26页 |
| 1.2 CK2介导的磷酸化信号 | 第26-35页 |
| 1.2.1 CK2的结构与特性 | 第27-28页 |
| 1.2.2 植物CK2研究概述 | 第28-35页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第35-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-64页 |
| 2.1 植物材料和培养条件 | 第37页 |
| 2.2 基因组DNA提取 | 第37-38页 |
| 2.3 拟南芥总RNA的提取和反转录PCR | 第38-40页 |
| 2.3.1 RNA的提取 | 第38-39页 |
| 2.3.2 反转录PCR | 第39-40页 |
| 2.3.3 半定量PCR检测 | 第40页 |
| 2.4 载体构建及相关分子生物学方法 | 第40-45页 |
| 2.4.1 载体构建过程概述 | 第40-41页 |
| 2.4.2 质粒小量提取 | 第41页 |
| 2.4.3 DNA片段(凝胶)纯化回收 | 第41-42页 |
| 2.4.4 大肠杆菌的感受态细胞的制备及热激转化 | 第42页 |
| 2.4.5 农杆菌感受态细胞的制备及热激转化 | 第42-43页 |
| 2.4.6 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第43-44页 |
| 2.4.7 pBI-EGFP转基因载体构建策略 | 第44页 |
| 2.4.8 点突变MYC2转基因载体构建策略 | 第44-45页 |
| 2.5 荧光定量PCR | 第45-46页 |
| 2.6 GUS染色 | 第46-47页 |
| 2.7 酵母双杂交实验 | 第47-49页 |
| 2.7.1 研究中使用的酵母表达载体和酵母菌株 | 第47页 |
| 2.7.2 酵母融合表达质粒的构建 | 第47-48页 |
| 2.7.3 酵母转化 | 第48页 |
| 2.7.4 酵母融合 | 第48-49页 |
| 2.8 双分子荧光互补(BiFC) | 第49-51页 |
| 2.8.1 BiFC实验相关质粒构建 | 第49页 |
| 2.8.2 基因枪介导的洋葱表皮转化 | 第49-50页 |
| 2.8.3 农杆菌介导的烟草叶片转化 | 第50-51页 |
| 2.9 激光扫描共聚焦显微镜观察GFP融合蛋白亚细胞定位 | 第51页 |
| 2.10 蛋白的表达和纯化 | 第51-54页 |
| 2.10.1 蛋白的诱导表达及纯化 | 第51-52页 |
| 2.10.2 SDS-PAGE胶制备及电泳 | 第52-53页 |
| 2.10.3 CK2激酶——底物实验 | 第53-54页 |
| 2.11 植物内源蛋白表达水平的检测 | 第54-55页 |
| 2.11.1 植物总蛋白的提取 | 第54页 |
| 2.11.2 Western B1ot | 第54-55页 |
| 2.12 染色质免疫沉淀(ChIP) | 第55-59页 |
| 2.13 表型分析以及数据统计 | 第59页 |
| 2.14 花青素的测定 | 第59页 |
| 2.15 根尖的显微观察 | 第59-60页 |
| 2.16 本研究中使用的引物 | 第60-64页 |
| 2.16.1 基因特异引物 | 第60-62页 |
| 2.16.2 MYC2点突变引物 | 第62页 |
| 2.16.3 载体构建和材料株系鉴定引物 | 第62-64页 |
| 3 结果与分析 | 第64-96页 |
| 3.1 CK2调节亚基与MYC2的相互作用 | 第64-67页 |
| 3.2 MYC2是CK2的底物 | 第67-68页 |
| 3.3 TBB抑制JA信号应答反应 | 第68-70页 |
| 3.4 CK2mut中JA信号应答反应减弱 | 第70-74页 |
| 3.5 CKB4过量表达增强JA信号应答反应 | 第74-76页 |
| 3.6 CK2间接调控MYC2蛋白的积累 | 第76-79页 |
| 3.7 CK2促进MYC2对靶基因启动子的结合 | 第79-83页 |
| 3.8 Ser417、Ser420点突变对MYC2功能没有显著影响 | 第83-84页 |
| 3.9 CK2α亚基T-DNA突变体的鉴定 | 第84-87页 |
| 3.10 CKA4调控拟南芥幼苗的发育 | 第87-91页 |
| 3.11 CKA4调控拟南芥的开花时间 | 第91-93页 |
| 3.12 CKA4回复实验和亚细胞定位分析 | 第93-95页 |
| 3.13 CK2α亚基-DNA突变体对JA的敏感性 | 第95-96页 |
| 4 讨论 | 第96-104页 |
| 4.1 CK2对JA信号的应答的调节作用 | 第96-100页 |
| 4.1.1 MYC2是CK2的底物 | 第96-97页 |
| 4.1.2 CK2促进JA信号的应答反应 | 第97页 |
| 4.1.3 CK2不影响MYC2的蛋白稳定性 | 第97-98页 |
| 4.1.4 CK2促进MYC2对其靶基因启动子的结合 | 第98-99页 |
| 4.1.5 MYC2蛋白内CK2特异的磷酸化位点 | 第99页 |
| 4.1.6 CK2活性的调控机制 | 第99-100页 |
| 4.2 CKA4的生物学功能 | 第100-102页 |
| 4.2.1 CKA4对拟南芥幼苗发育的调控 | 第100-101页 |
| 4.2.2 CKA4对开花时间的调控 | 第101页 |
| 4.2.3 CKA4与JA信号 | 第101页 |
| 4.2.4 CKA4的亚细胞定位 | 第101-102页 |
| 4.3 结论 | 第102-104页 |
| 附章：低温下生长素和细胞分裂素信号途径对拟南芥根生长发育的调控 | 第104-117页 |
| 1 引言 | 第104-105页 |
| 2 材料与方法 | 第105-107页 |
| 3 结果 | 第107-115页 |
| 4 讨论 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-128页 |
| 在读期间发表及投稿论文 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129页 |
