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山东省设施蔬菜根结线虫调查及生防菌AMCC1001028的生防试验和发酵优化

符号说明第4-8页
中文摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 前言第11-25页
    1.1 根结线虫的简介第11-12页
        1.1.1 根结线虫的分类第11页
        1.1.2 根结线虫的危害第11-12页
        1.1.3 根结线虫的侵染第12页
    1.2 根结线虫的鉴定第12-15页
        1.2.1 形态学特征第13-14页
        1.2.2 利用鉴别宿主反应鉴定根结线虫第14页
        1.2.3 同工酶表型分析鉴定第14-15页
        1.2.4 分子生物学鉴定第15页
    1.3 根结线虫的生物防治第15-19页
        1.3.1 细菌第16-17页
        1.3.2 放线菌第17页
        1.3.3 真菌第17-19页
    1.4 芽孢杆菌的发酵第19-23页
        1.4.1 影响芽孢杆菌发酵的因素第19-20页
            1.4.1.1 培养基对芽孢杆菌发酵的影响第19-20页
            1.4.1.2 培养条件对芽孢杆菌发酵的影响第20页
        1.4.2 发酵优化的方法第20-23页
    1.5 研究目的及意义第23-24页
    1.6 技术路线第24-25页
2 材料与方法第25-35页
    2.1 试验材料第25-27页
        2.1.1 生防菌株第25页
        2.1.2 试验线虫第25页
        2.1.3 种子活化培养基第25页
        2.1.4 发酵基础培养基第25-26页
        2.1.5 主要试剂第26-27页
        2.1.6 主要仪器第27页
    2.2 试验方法第27-35页
        2.2.1 山东省设施蔬菜根结线虫的调查第27-28页
            2.2.1.1 样本的采集第27页
            2.2.1.2 根结线虫虫口密度统计第27-28页
        2.2.2 根结线虫的鉴定第28-29页
            2.2.2.1 四种常见根结线虫的特异性引物第28页
            2.2.2.2 PCR扩增用20μL反应体系第28-29页
        2.2.3 生防菌AMCC1001028的生防试验第29-30页
            2.2.3.1 根结线虫虫卵及二龄幼虫的获取第29页
            2.2.3.2 发酵上清液的制备第29页
            2.2.3.3 发酵上清液对南方根结线虫二龄幼虫的影响第29页
            2.2.3.4 活性物质稳定性试验第29-30页
            2.2.3.5 盆栽验证试验第30页
            2.2.3.6 盆栽试验设计第30页
            2.2.3.7 根结数和卵囊数的测定第30页
        2.2.4 生防菌株AMCC1001028的发酵优化第30-35页
            2.2.4.1 生防菌株的培养方法第30-31页
            2.2.4.2 生防菌株的检测第31页
            2.2.4.3 基础培养基的筛选第31页
            2.2.4.4 培养条件的单因素优化第31-32页
            2.2.4.5 发酵培养基的单因素试验第32页
            2.2.4.6 Plackett-Burman(PB)试验设计第32-33页
            2.2.4.7 最陡爬坡试验第33页
            2.2.4.8 响应面(RSM)优化第33-34页
            2.2.4.9 模型验证第34-35页
3 结果与分析第35-52页
    3.1 山东省设施蔬菜根结线虫的调查第35-36页
        3.1.1 根结线虫SCAR-PCR鉴定第35-36页
    3.2 生防菌AMCC1001028生防试验第36-39页
        3.2.1 南方根结线虫的获取第36-37页
        3.2.2 生防菌AMCC1001028发酵上清液对二龄幼虫的影响第37页
        3.2.3 生防菌AMCC1001028发酵上清液活性物质的稳定性第37-38页
        3.2.4 生防菌AMCC1001028对南方根结线虫影响的盆栽试验第38-39页
    3.3 生防菌AMCC1001028发酵优化第39-52页
        3.3.1 生防菌的生长曲线(OD600)及产芽孢率随时间变化情况第39页
        3.3.2 生防菌AMCC1001028发酵基础培养基的筛选第39-41页
        3.3.3 生防菌AMCC1001028培养条件的单因素试验第41-44页
            3.3.3.1 接种量对生防菌株AMCC1001028发酵的影响第41页
            3.3.3.2 装液量对生防菌株AMCC1001028发酵的影响第41-42页
            3.3.3.3 初始pH对生防菌株AMCC1001028发酵的影响第42-43页
            3.3.3.4 培养温度对生防菌株AMCC1001028发酵的影响第43-44页
        3.3.4 生防菌AMCC1001028培养基成分的单因素试验第44-46页
            3.3.4.1 验证最佳碳源物质第44页
            3.3.4.2 验证最佳氮源物质第44-45页
            3.3.4.3 碳氮比范围的确定第45-46页
        3.3.5 生防菌AMCC1001028响应面法优化第46-52页
            3.3.5.1 P-B试验设计及结果第46-48页
            3.3.5.2 最陡爬坡路径试验第48页
            3.3.5.3 Box-Behnken中心组和设计第48-51页
            3.3.5.4 验证试验第51-52页
4 讨论第52-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-62页
致谢第62页

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