| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 细胞的内膜系统 | 第11-13页 |
| 1.1.1 内膜系统总述 | 第11页 |
| 1.1.2 质膜 | 第11页 |
| 1.1.3 内质网 | 第11-12页 |
| 1.1.4 液泡 | 第12页 |
| 1.1.5 高尔基复合体 | 第12页 |
| 1.1.6 内体 | 第12-13页 |
| 1.2 荧光蛋白 | 第13-16页 |
| 1.2.1 绿色荧光的发现和发展 | 第13页 |
| 1.2.2 红色荧光蛋白的发现与发展 | 第13-15页 |
| 1.2.3 荧光蛋白的应用 | 第15页 |
| 1.2.4 mScarlet的理化性质以及合成路线 | 第15-16页 |
| 1.3 选题意义及主要研究内容 | 第16-18页 |
| 1.3.1 选题目的及意义 | 第16页 |
| 1.3.2 主要研究内容 | 第16-18页 |
| 1.3.2.1 荧光蛋白融合表达载体的构建思路 | 第16-17页 |
| 1.3.2.2 荧光蛋白融合表达载体构建及瞬时表达 | 第17页 |
| 1.3.2.3 黑暗碳饥饿体系中拟南芥abs3-1D逆转突变体的筛选 | 第17-18页 |
| 第二章 荧光蛋白融合表达载体的构建思路 | 第18-25页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 材料及方法 | 第18-21页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.2.1.1 实验中用到的载体 | 第18页 |
| 2.2.1.2 实验中用到的试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.1.3 实验中用到的溶液 | 第19页 |
| 2.2.1.4 实验中用到的仪器 | 第19页 |
| 2.2.1.5 实验中用到的数据库和软件 | 第19页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.2.1 mScarlet与mRFP、mCherry序列的获取 | 第19-20页 |
| 2.2.2.2 mScarlet与mRFP、mCherry的蛋白序列比对 | 第20页 |
| 2.2.2.3 不同荧光蛋白理化参数的比较及荧光蛋白的选择 | 第20页 |
| 2.2.2.4 定位基因的选择 | 第20-21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.3.1 mScarlet与mRFP、mCherry的蛋白序列比对 | 第21-22页 |
| 2.3.2 不同荧光蛋白理化参数的比较及荧光蛋白的选择 | 第22页 |
| 2.3.3 定位基因的选择 | 第22-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 荧光蛋白融合表达载体的构建及瞬时转化 | 第25-39页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 材料及方法 | 第25-34页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第25-31页 |
| 3.2.1.1 本实验中用到的植物材料 | 第25页 |
| 3.2.1.2 本实验中用到的载体 | 第25-26页 |
| 3.2.1.3 本实验中用到的引物 | 第26-27页 |
| 3.2.1.4 本实验中用到的菌株 | 第27页 |
| 3.2.1.5 本实验中用到的试剂 | 第27页 |
| 3.2.1.6 本实验中用到的溶液 | 第27-30页 |
| 3.2.1.7 本实验中用到的仪器 | 第30页 |
| 3.2.1.8 本实验中用到的数据库和软件 | 第30-31页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第31-34页 |
| 3.2.2.1 拟南芥植物培养 | 第31页 |
| 3.2.2.2 制备拟南芥cDNA | 第31页 |
| 3.2.2.3 定位基因的克隆及融合表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.2.2.4 高浓度质粒的制备及质粒浓度的测量与调整 | 第32-33页 |
| 3.2.2.5 拟南芥叶肉细胞原生质体制备和瞬时转化 | 第33-34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-38页 |
| 3.3.1 绿色荧光蛋白融合表达载体的构建及其亚细胞定位 | 第34-35页 |
| 3.3.1.1 N端融合GFP表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 3.3.1.2 N端融合GFP表达载体在原生质体中瞬时表达的结果 | 第35页 |
| 3.3.2 红色荧光蛋白融合表达载体的构建及其亚细胞定位 | 第35-38页 |
| 3.3.2.1 N端融合mCherry表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.3.2.2 N端融合mCherry表达载体在原生质体中瞬时表达的结果 | 第36页 |
| 3.3.2.3 N端融合mScarlet表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 3.3.2.4 N端融合mScarlet表达载体在原生质体中瞬时表达的结果 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-39页 |
| 第四章 黑暗碳饥饿体系中abs3-1D逆转突变体的筛选 | 第39-48页 |
| 4.1 引言 | 第39页 |
| 4.2 材料及方法 | 第39-44页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第39-41页 |
| 4.2.1.1 本实验中用到的植物材料 | 第39页 |
| 4.2.1.2 本实验中用到的试剂 | 第39页 |
| 4.2.1.3 本实验中用到的溶液 | 第39-40页 |
| 4.2.1.4 本实验中用到的仪器 | 第40页 |
| 4.2.1.5 本实验中用到的软件 | 第40-41页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 4.2.2.1 abs3-1D的EMS诱变 | 第41页 |
| 4.2.2.2 种子表面消毒 | 第41页 |
| 4.2.2.3 拟南芥植物培养 | 第41-42页 |
| 4.2.2.4 可能的逆转突变体的筛选 | 第42-43页 |
| 4.2.2.5 筛选得到可能的逆转突变体的遗传背景纯化 | 第43-44页 |
| 4.3 结果与分析 | 第44-47页 |
| 4.3.1 黑暗碳饥饿体系筛选逆转突变体 | 第44-46页 |
| 4.3.2 逆转突变体筛选进程 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 结论与展望 | 第48-49页 |
| 5.1 本研究结果与结论 | 第48页 |
| 5.1.1 荧光蛋白融合表达载体的构建思路 | 第48页 |
| 5.1.2 荧光蛋白融合表达载体的构建以及瞬时转化 | 第48页 |
| 5.1.3 黑暗碳饥饿体系中abs3-1D逆转突变体的筛选 | 第48页 |
| 5.2 下一步研究计划与展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录 | 第54-63页 |
| 缩略词 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
