| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词 | 第12-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-22页 |
| 1.1 里氏木霉及其纤维素降解酶系 | 第14-15页 |
| 1.1.1 里氏木霉简介 | 第14页 |
| 1.1.2 里氏木霉的纤维素酶系及其作用机制 | 第14-15页 |
| 1.2 纤维二糖水解酶的研究 | 第15-17页 |
| 1.2.1 纤维二糖水解酶及其结构特点 | 第15-16页 |
| 1.2.2 纤维二糖水解酶的克隆与表达 | 第16页 |
| 1.2.3 热稳定纤维二糖水解酶的研究 | 第16-17页 |
| 1.3 丝氨酸蛋白酶及其功能研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 丝氨酸蛋白酶家族 | 第17-18页 |
| 1.3.2 类枯草杆菌蛋白酶功能研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4 里氏木霉蛋白表达系统 | 第19-21页 |
| 1.4.1 里氏木霉作为蛋白表达宿主 | 第19页 |
| 1.4.2 里氏木霉菌株表达蛋白研究现状 | 第19-21页 |
| 1.5 本论文研究的意义及主要内容 | 第21-22页 |
| 第二章 里氏木霉异源表达热稳定性纤维二糖水解酶Te-Cel7A的研究 | 第22-35页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-27页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第22页 |
| 2.1.2 培养基及培养条件 | 第22-23页 |
| 2.1.3 常用实验仪器及PCR引物 | 第23-24页 |
| 2.1.4 分子生物学常用方法 | 第24-25页 |
| 2.1.5 纤维素酶活力的测定 | 第25页 |
| 2.1.6 构建里氏木霉Te-Cel7A表达盒 | 第25页 |
| 2.1.7 构建里氏木霉Te-Cel7A表达菌株 | 第25-26页 |
| 2.1.8 Te-Cel7A的表达及酶学性质分析 | 第26页 |
| 2.1.9 里氏木霉Te-Cel7A转化子纤维素酶活力及热稳定性分析 | 第26-27页 |
| 2.1.10 里氏木霉Te-Cel7A转化子酶液的糖化实验 | 第27页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第27-33页 |
| 2.2.1 里氏木霉Te-Cel7A转化子的构建 | 第27-28页 |
| 2.2.2 Te-Cel7A的表达及酶学性质分析 | 第28-31页 |
| 2.2.3 纤维素诱导条件下里氏木霉QTC14纤维素酶活力及热稳定性分析 | 第31-32页 |
| 2.2.4 里氏木霉QTC14的糖化应用分析 | 第32-33页 |
| 2.3 本章小结 | 第33-35页 |
| 第三章 里氏木霉中丝氨酸蛋白酶Spt1的功能研究 | 第35-55页 |
| 3.1 材料与方法 | 第35-40页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第35页 |
| 3.1.2 PCR引物 | 第35-37页 |
| 3.1.3 培养基和培养条件 | 第37页 |
| 3.1.4 常用仪器和试剂 | 第37-38页 |
| 3.1.5 分子生物学操作方法 | 第38页 |
| 3.1.6 里氏木霉丝氨酸蛋白酶Spt1的基因序列分析 | 第38页 |
| 3.1.7 里氏木霉Spt1缺失菌株的构建 | 第38页 |
| 3.1.8 里氏木霉Spt1回补菌株的构建 | 第38-39页 |
| 3.1.9 里氏木霉Spt1过表达菌株的构建 | 第39页 |
| 3.1.10 里氏木霉Spt1定位表达菌株的构建 | 第39-40页 |
| 3.1.11 菌丝形态观察及碳源利用情况分析 | 第40页 |
| 3.1.12 荧光观察 | 第40页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第40-54页 |
| 3.2.1 里氏木霉Spt1基因序列分析 | 第40-41页 |
| 3.2.2 里氏木霉Spt1缺失菌株与回补菌株的构建 | 第41-42页 |
| 3.2.3 里氏木霉Δspt1菌丝形态分析及生长速率分析 | 第42-43页 |
| 3.2.4 里氏木霉Δspt1的产酶分析 | 第43-45页 |
| 3.2.5 里氏木霉Rspt1菌丝形态及产酶分析 | 第45-47页 |
| 3.2.6 里氏木霉Spt1定位表达菌株的构建及荧光观察 | 第47-49页 |
| 3.2.7 里氏木霉Spt1过表达菌株的构建及产酶分析 | 第49-54页 |
| 3.3 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 里氏木霉QTC14中过表达Spt1的研究 | 第55-59页 |
| 4.1 材料和方法 | 第55-56页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第55页 |
| 4.1.2 PCR引物 | 第55页 |
| 4.1.3 培养基和培养条件 | 第55-56页 |
| 4.1.4 主要实验仪器、试剂及分子生物学操作方法 | 第56页 |
| 4.1.5 里氏木霉QTC14中Spt1过表达菌株的构建 | 第56页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第56-58页 |
| 4.2.1 里氏木霉QTC14中Spt1过表达菌株的构建 | 第56-57页 |
| 4.2.2 里氏木霉STC的产酶分析 | 第57-58页 |
| 4.3 本章小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读硕士期间已(待)发表的学术论文 | 第68页 |
