| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-27页 |
| 1.1 金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌简介 | 第12-14页 |
| 1.1.1 金黄色葡萄球菌简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物学特征及流行特点 | 第13-14页 |
| 1.2 抗生素种类及应用分析 | 第14-17页 |
| 1.2.1 抗生素种类 | 第14-16页 |
| 1.2.1.1 β-内酰胺类抗生素 | 第14-15页 |
| 1.2.1.2 氨基糖苷类抗生素 | 第15页 |
| 1.2.1.3 大环内酯类抗生素 | 第15页 |
| 1.2.1.4 四环素类抗生素 | 第15-16页 |
| 1.2.1.5 林可霉素类抗生素 | 第16页 |
| 1.2.1.6 多肽类抗生素 | 第16页 |
| 1.2.1.7 喹诺酮类抗生素 | 第16页 |
| 1.2.1.8 磺胺类抗生素 | 第16页 |
| 1.2.1.9 抗结核药 | 第16页 |
| 1.2.2 抗生素杀菌作用机制 | 第16-17页 |
| 1.2.3 抗生素应用分析 | 第17页 |
| 1.3 金黄色葡萄球菌耐药性进展 | 第17-21页 |
| 1.3.1 金黄色葡萄球菌耐药性研究方法 | 第18-19页 |
| 1.3.1.1 表型检测 | 第18页 |
| 1.3.1.2 基因检测 | 第18-19页 |
| 1.3.2 金黄色葡萄球菌耐药现状 | 第19页 |
| 1.3.3 金黄色葡萄球菌耐药机制 | 第19-21页 |
| 1.4 金黄色葡萄球菌分型研究进展 | 第21-23页 |
| 1.4.1 表型分型 | 第21页 |
| 1.4.2 基因分型 | 第21-23页 |
| 1.4.2.1 PFGE(脉冲场凝胶电泳)分型 | 第21-22页 |
| 1.4.2.2 MLST(多位点序列)分型 | 第22页 |
| 1.4.2.3 Spa(金黄色葡萄球菌表面蛋白A)基因多态性分型 | 第22页 |
| 1.4.2.4 SCCmec(葡萄球菌基因盒)分型 | 第22-23页 |
| 1.5 金黄色葡萄球菌检测方法 | 第23-25页 |
| 1.5.1 国家标准检测方法 | 第23页 |
| 1.5.2 酶联免疫吸附分析(ELISA)法 | 第23-24页 |
| 1.5.3 分子生物学检测法 | 第24-25页 |
| 1.5.3.1 核酸探针技术 | 第24页 |
| 1.5.3.2 聚合酶链反应技术(PCR) | 第24-25页 |
| 1.5.3.3 环介导等温扩增技术 | 第25页 |
| 1.6 本实验研究目的与意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-39页 |
| 2.1 材料 | 第27-31页 |
| 2.1.1 菌株来源 | 第27页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.4 主要试剂配置 | 第29-30页 |
| 2.1.5 实验所用引物 | 第30-31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-39页 |
| 2.2.1 金黄色葡萄球菌的分离与鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.1.1 样品采集与处理 | 第31-32页 |
| 2.2.1.2 分离培养 | 第32页 |
| 2.2.1.3 革兰氏染色镜检 | 第32页 |
| 2.2.2 PCR鉴定金黄色葡萄球菌 | 第32-34页 |
| 2.2.2.1 金黄色葡萄球菌DNA提取 | 第32-33页 |
| 2.2.2.2 检测金黄色葡萄球菌PCR反应体系 | 第33页 |
| 2.2.2.3 热循环参数 | 第33页 |
| 2.2.2.4 扩增产物的检测 | 第33-34页 |
| 2.2.2.5 菌株保存 | 第34页 |
| 2.2.3 药敏纸片的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.3.1 抗菌药物配制溶剂和保存期限 | 第34页 |
| 2.2.3.2 药敏纸片的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.4 试验方法 | 第35-39页 |
| 2.2.4.1 药敏试验步骤 | 第35-36页 |
| 2.2.4.2 mecA基因检测方法 | 第36页 |
| 2.2.4.3 耐药基因检测方法 | 第36-37页 |
| 2.2.4.4 PCR反应程序 | 第37-38页 |
| 2.2.4.5 琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-49页 |
| 3.1 金黄色葡萄球菌鉴定结果 | 第39-40页 |
| 3.1.1 染色镜检 | 第39页 |
| 3.1.2 金黄色葡萄球菌PCR鉴定结果 | 第39-40页 |
| 3.2 金黄色葡萄球菌检出情况 | 第40页 |
| 3.3 不同来源猪肉中金黄色葡萄球菌的检出率 | 第40-41页 |
| 3.4 21株金黄色葡萄球菌对13种抗生素耐药情况 | 第41-42页 |
| 3.5 金黄色葡萄球菌耐药图谱 | 第42页 |
| 3.6 PCR检测mecA基因结果 | 第42-43页 |
| 3.7 10 株MRSA多重耐药图谱 | 第43页 |
| 3.8 不同来源的金黄色葡萄球菌耐药结果分析 | 第43-44页 |
| 3.9 tetK、tetM基因与四环素耐药相关性 | 第44-45页 |
| 3.10 aac(6')/aph(2'')、aph(3')-III基因与氨基糖苷类耐药相关性 | 第45-46页 |
| 3.11 ermC、ermA基因与克林霉素耐药相关性 | 第46-47页 |
| 3.12 mecA基因与β-内酰胺类抗生素耐药相关性 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-54页 |
| 4.1 生鲜肉中金黄色葡萄球菌分布 | 第49页 |
| 4.2 金黄色葡萄球菌耐药表型分布 | 第49-50页 |
| 4.3 金黄色葡萄球菌耐药基因分布并且和抗生素耐药的相关性 | 第50-54页 |
| 4.3.1 tetK、tetM基因与四环素耐药 | 第50-51页 |
| 4.3.2 aac(6')/aph(2'')、aph(3')-III基因与氨基糖苷类抗生素耐药 | 第51-52页 |
| 4.3.3 ermC、ermA基因与克林霉素耐药 | 第52页 |
| 4.3.4 mecA基因与β-内酰胺类抗生素耐药 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
