| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 苹果砧木种质资源 | 第11-13页 |
| 1.2 接穗与砧木之间的相互作用 | 第13-14页 |
| 1.2.1 砧木对接穗生长的影响 | 第13页 |
| 1.2.2 砧木对接穗抗逆性的影响 | 第13页 |
| 1.2.3 砧木对接穗生理特性的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.4 砧木对接穗的果实的影响 | 第14页 |
| 1.3 苹果砧木作用机理研究进展 | 第14-16页 |
| 1.4 植物树体生长素合成与代谢 | 第16-17页 |
| 1.5 本论文研究背景及意义 | 第17-19页 |
| 2 砧木嫁接“烟富3”mRNA组分析 | 第19-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19页 |
| 2.2.1 m RNA组测序 | 第19页 |
| 2.2.2 差异表达基因 | 第19页 |
| 2.2.3 GO富集和KEGG途经分析 | 第19页 |
| 2.3 结果与分析 | 第19-29页 |
| 2.3.1 m RNA组测序数据质量分析 | 第19-21页 |
| 2.3.2 烟富3/八棱海棠、烟富3/M9 以及烟富3 接穗的基因表达分析 | 第21页 |
| 2.3.3 烟富3/八棱海棠、烟富3/M9 以及烟富3 接穗的差异表达分析 | 第21-23页 |
| 2.3.4 GO富集分析 | 第23-26页 |
| 2.3.5 KEGG富集分析 | 第26-28页 |
| 2.3.6 聚类分析 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 3 生长素测定及激素信号转导途径基因的表达分析 | 第31-44页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-33页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第31页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第31-32页 |
| 3.1.4 引物序列 | 第32-33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.2.1 嫁接树体生长测量 | 第33页 |
| 3.2.2 生长素的测定 | 第33-34页 |
| 3.2.3 总RNA的提取及反转录 | 第34-35页 |
| 3.2.4 m RNA实时荧光定量PCR | 第35-36页 |
| 3.2.5 实验数据分析 | 第36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-41页 |
| 3.3.1 烟富3/八棱海棠、烟富3/M9 以及烟富3 的枝条生长状况 | 第36-37页 |
| 3.3.2 生长素含量 | 第37页 |
| 3.3.3 苹果生长素合成基因YUCCA10a的表达分析 | 第37-38页 |
| 3.3.4 苹果生长素结合酶基因GH3.5 的表达分析 | 第38-39页 |
| 3.3.5 苹果生长素轭合物水解酶基因ILR1like5 的表达分析 | 第39页 |
| 3.3.6 苹果生长素响应因子ARF8 基因的表达分析 | 第39-40页 |
| 3.3.7 苹果赤霉素合成酶基因GA20-ox2 的表达分析 | 第40-41页 |
| 3.3.8 苹果赤霉素代谢酶基因GA2-ox1 的表达分析 | 第41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-44页 |
| 4 不同砧木YUCCA10a基因CDS序列的克隆与分析 | 第44-56页 |
| 4.1 实验材料 | 第44页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第44页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第44页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第44页 |
| 4.1.4 引物序列 | 第44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-49页 |
| 4.2.1 总RNA的提取及反转录 | 第44-45页 |
| 4.2.2 YUCCA10a基因CDS的克隆 | 第45页 |
| 4.2.3 目的条带的回收 | 第45-46页 |
| 4.2.4 Taq酶加尾 | 第46页 |
| 4.2.5 目的片段连接T-Vector | 第46页 |
| 4.2.6 Inoue法制备大肠杆菌DH5α超级感受态细胞 | 第46-47页 |
| 4.2.7 连接产物转化大肠杆菌 | 第47页 |
| 4.2.8 重组质粒的挑取及扩大培养 | 第47-48页 |
| 4.2.9 提取大肠杆菌质粒 | 第48页 |
| 4.2.10 酶切检测 | 第48-49页 |
| 4.2.11 阳性质粒送测序及生物信息学分析 | 第49页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第49-54页 |
| 4.3.1 M9 矮化砧、八棱海棠砧以及烟富3的RNA的提取 | 第49-50页 |
| 4.3.2 M9 矮化砧、八棱海棠砧以及烟富3的YUCCA10a基因的克隆 | 第50页 |
| 4.3.3 M9 矮化砧、八棱海棠砧以及烟富3的YUCCA10a基因的序列比对 | 第50-52页 |
| 4.3.4 M9 矮化砧、八棱海棠砧以及烟富3的YUCCA10a基因的氨基酸序列同源性及进化性分析 | 第52-53页 |
| 4.3.5 YUCCA10a蛋白质理化性质及结构分析 | 第53-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 5 砧木嫁接“烟富3”miRNA组分析 | 第56-76页 |
| 5.1 实验材料 | 第56-58页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第56页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第56页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第56页 |
| 5.1.4 引物序列 | 第56-58页 |
| 5.2 试验方法 | 第58-61页 |
| 5.2.1 嫁接树体生长测量 | 第58页 |
| 5.2.2 mi RNA组测序 | 第58页 |
| 5.2.3 mi RNA组数据处理分析 | 第58页 |
| 5.2.4 差异表达基因 | 第58页 |
| 5.2.5 GO富集和KEGG途经分析 | 第58-59页 |
| 5.2.6 miRNA的提取及反转录 | 第59-60页 |
| 5.2.7 miRNA和 mRNA实时荧光定量PCR | 第60页 |
| 5.2.8 实验数据分析 | 第60-61页 |
| 5.3 结果与分析 | 第61-73页 |
| 5.3.1 烟富3/八棱海棠、烟富3/M9 以及烟富3 的枝条生长状况 | 第61页 |
| 5.3.2 mi RNA组测序数据质量分析 | 第61-63页 |
| 5.3.3 烟富3/八棱海棠、烟富3/M9 以及烟富3的miRNA表达分析 | 第63-64页 |
| 5.3.4 烟富3/八棱海棠、烟富3/M9 以及烟富3 的差异mi RNA分析 | 第64页 |
| 5.3.5 miRNA靶基因预测 | 第64-65页 |
| 5.3.6 烟富3/八棱海棠、烟富3/M9 以及烟富3 中的miRNA靶基因GO和 KEGG富集分析 | 第65-70页 |
| 5.3.7 烟富3/八棱海棠、烟富3/M9 以及烟富3 中的参与SAM生长发育相关的miRNA及其靶基因实时定量表达分析 | 第70-73页 |
| 5.4 讨论 | 第73-76页 |
| 6 结论与创新点 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 附录一 攻读硕士学位论文期间发表的学术论文目录 | 第88-89页 |
