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家蝇lysozyme和defensin基因的鉴定及功能分析

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第1章 文献综述第13-25页
    1.1 免疫第13页
    1.2 昆虫的先天免疫系统第13-14页
    1.3 抗菌肽第14-15页
    1.4 抗菌肽的分类第15-18页
        1.4.1 具有螺旋结构的线性多肽第15-16页
        1.4.2 富含某种氨基酸的线性多肽第16页
        1.4.3 含有一个二硫键的多肽第16-17页
        1.4.4 含有两个或两个以上二硫键的多肽第17页
        1.4.5 羊毛硫抗生素第17-18页
    1.5 抗菌肽的作用机理第18-21页
        1.5.1 抗菌肽和质膜相互作用模型第18-19页
        1.5.2 攻击线粒体抑制细胞呼吸第19页
        1.5.3 破坏细胞DNA第19-20页
        1.5.4 诱导细胞凋亡第20页
        1.5.5 抑制膜蛋白质及细胞壁合成第20页
        1.5.6 破坏癌细胞骨架第20-21页
    1.6 昆虫抗菌肽的生物学功能第21-23页
        1.6.1 抗细菌能力第21页
        1.6.2 抗真菌能力第21-22页
        1.6.3 抗肿瘤细胞的能力第22页
        1.6.4 抗原虫和病毒的能力第22-23页
    1.7 家蝇抗菌肽第23-25页
第2章 家蝇溶菌酶lysozyme的克隆及性能研究第25-43页
    2.1 实验材料第26-27页
        2.1.1 菌株与质粒第26页
        2.1.2 主要实验仪器与试剂第26页
        2.1.3 实验用引物第26-27页
        2.1.4 培养基和主要试剂的配置第27页
    2.2 实验方法第27-32页
        2.2.1 数据库搜索与分析第27页
        2.2.2 细菌感染实验第27-28页
        2.2.3 饥饿胁迫实验第28页
        2.2.4 幼虫不同组织的分离第28页
        2.2.5 总RNA提取和反转录第28页
        2.2.6 家蝇lysozyme 3基因的克隆第28页
        2.2.7 生物信息学分析第28-29页
        2.2.8 Digoxigenin(DIG)-RNA探针的合成第29-30页
        2.2.9 Northern blot检测探针特异性第30页
        2.2.10 RNA干扰第30页
        2.2.11 家蝇lysozyme 3基因的表达分析第30-31页
        2.2.12 家蝇lysozyme 3基因的原核表达第31-32页
    2.3 实验结果第32-40页
        2.3.1 家蝇溶菌酶家族序列分析第32-33页
        2.3.2 lysozyme 3的克隆和生物信息学分析第33-36页
        2.3.3 不同组织的Northern blot分析第36-37页
        2.3.4 RNA干扰第37页
        2.3.5 家蝇lysozyme 3基因荧光定量分析第37-39页
        2.3.6 重组蛋白表达及电泳鉴定第39-40页
    2.4 讨论第40-43页
第3章 家蝇防御素defensin的克隆及功能研究第43-62页
    3.1 实验材料第44-45页
        3.1.1 菌株与质粒第44页
        3.1.2 主要实验试剂第44页
        3.1.3 实验用引物第44-45页
    3.2 实验方法第45-49页
        3.2.1 家蝇防御素家族序列分析第45页
        3.2.2 细菌感染实验RNA提取与反转录第45页
        3.2.3 家蝇不同组织总RNA提取和反转录第45页
        3.2.4 热激实验RNA提取与反转录第45页
        3.2.5 家蝇defensin 2基因的克隆第45页
        3.2.6 家蝇defensin 2基因序列的生物信息学分析第45-46页
        3.2.7 家蝇defensin 2基因的荧光定量分析第46页
        3.2.8 RNAi干扰实验第46页
        3.2.9 启动子的克隆第46-49页
        3.2.10 重组表达第49页
    3.3 实验结果第49-58页
        3.3.1 家蝇防御素家族序列分析第49-50页
        3.3.2 家蝇defensin 2的克隆和生物信息学分析第50-53页
        3.3.3 家蝇defensin 2基因的荧光定量分析第53-56页
        3.3.4 RNAi干扰第56页
        3.3.5 启动子的克隆第56-58页
        3.3.6 家蝇defensin 2的原核表达第58页
    3.4 讨论第58-62页
总结第62-63页
参考文献第63-71页
硕士期间发表的论文第71-72页
致谢第72页

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