| 致谢 | 第6-10页 |
| 摘要 | 第10-14页 |
| 1 害虫虫生真菌侵染力、基因操作与遗传改良的研究现状 | 第14-32页 |
| 1.1 虫生真菌的杀虫机理 | 第14-18页 |
| 1.1.1 分生孢子的附着与萌发 | 第15-16页 |
| 1.1.2 附着孢的形成 | 第16-17页 |
| 1.1.3 昆虫体壁的穿透 | 第17页 |
| 1.1.4 真菌侵入昆虫血腔后的攻防反应 | 第17-18页 |
| 1.2 虫生真菌的遗传改良 | 第18-25页 |
| 1.2.1 虫生真菌的遗传转化 | 第19-20页 |
| 1.2.2 根癌农杆菌介导真菌的遗传转化 | 第20-23页 |
| 1.2.3 虫生真菌的基因工程与遗传改良 | 第23-25页 |
| 1.3 细胞自噬的发生及意义 | 第25-30页 |
| 1.3.1 细胞自噬的途径 | 第26页 |
| 1.3.2 细胞自噬的分子机制 | 第26-29页 |
| 1.3.3 常用的细胞自噬检测手段 | 第29-30页 |
| 1.4 展望、选题目标及意义 | 第30-32页 |
| 2 表达昆虫肠毒蛋白Vip3Aa1的金龟子绿僵菌工程菌构建及其口服毒力测定 | 第32-50页 |
| 2.1 材料 | 第33-34页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第33-34页 |
| 2.1.2 试剂与材料 | 第34页 |
| 2.1.3 供试虫源 | 第34页 |
| 2.2 方法 | 第34-40页 |
| 2.2.1 转化用双元载体的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.2 绿僵菌转化 | 第35页 |
| 2.2.3 PCR鉴定阳性转化子 | 第35页 |
| 2.2.4 转化子中Vip3Aa1基因的转录表达水平测定 | 第35-36页 |
| 2.2.5 转化子的Western杂交鉴定 | 第36-37页 |
| 2.2.6 生物测定 | 第37-38页 |
| 2.2.7 数据处理 | 第38-40页 |
| 2.3 结果与分析 | 第40-46页 |
| 2.3.1 转化子的鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3.2 转基因菌株对斜纹夜蛾幼虫的口服毒性 | 第41-43页 |
| 2.3.3 转基因菌株对斜纹夜蛾幼虫的口服毒力分析 | 第43-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-50页 |
| 3 球孢白僵菌生自噬基因Atg5的功能及对生防潜能的影响 | 第50-62页 |
| 3.1 材料和方法 | 第51-55页 |
| 3.1.1 菌株和培养基 | 第51页 |
| 3.1.2 BbATG5的克隆 | 第51-52页 |
| 3.1.3 BbATG5的敲除和回补 | 第52-53页 |
| 3.1.4 荧光显微检测和细胞学分析 | 第53-54页 |
| 3.1.5 营养生长、产孢能力、孢子活力及毒力的评估 | 第54-55页 |
| 3.1.6 数据分析 | 第55页 |
| 3.2 结果 | 第55-60页 |
| 3.2.1 BbATG5的特征及其敲除株、回补株的构建 | 第55-57页 |
| 3.2.2 BbATG5的破坏阻碍正常细胞自噬 | 第57-58页 |
| 3.2.3 BbATG5敲除导致孢子萌发、营养生长和产孢缺陷 | 第58-59页 |
| 3.2.4 BbATGS对毒力的影响 | 第59-60页 |
| 3.3 讨论 | 第60-62页 |
| 4 结语 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-78页 |
| Summary | 第78-81页 |
| 附录：攻读博士学位期间主要成果 | 第82页 |
