| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-16页 |
| 1 前言 | 第16-35页 |
| ·植物MAPK级联途经 | 第16-19页 |
| ·植物中的MAPKKKs | 第17页 |
| ·植物中的MAPKKs | 第17-18页 |
| ·植物中的MAPKs | 第18-19页 |
| ·MAPK级联途径参与植物生理响应的研究 | 第19-30页 |
| ·MAPK级联途径参与调控生物胁迫 | 第19-25页 |
| ·AtMPK3、AtMPK6 和AtMPK4 参与抗病反应 | 第19-21页 |
| ·SA诱导蛋白激酶与伤诱导蛋白激酶参与调控植物的抗病反应 | 第21-22页 |
| ·AtMPK3 参与调控农杆菌侵染 | 第22页 |
| ·ROS与MAPKs在植物病原信号传递中的关系 | 第22-25页 |
| ·MAPK级联途径参与调控非生物胁迫 | 第25-26页 |
| ·MAPK级联途径参与植物激素信号转导 | 第26-29页 |
| ·MAPK级联途径参与调控乙烯信号转导 | 第26-27页 |
| ·MAPK级联途径参与调控ABA信号转导 | 第27-28页 |
| ·MAPK级联途径参与调控生长素信号转导 | 第28-29页 |
| ·MAPK级联途径参与生长发育调控 | 第29-30页 |
| ·MAPK级联途径参与调控气孔发育 | 第29页 |
| ·MAPK级联途径参与调控胞质分裂 | 第29-30页 |
| ·MAPK级联途径参与调控植物衰老 | 第30页 |
| ·MAPK信号的特异性 | 第30-33页 |
| ·支架蛋白 | 第31页 |
| ·MAPK组分的亚细胞定位 | 第31-33页 |
| ·蛋白磷酸酶的调控作用 | 第33页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第33-35页 |
| 2 材料和方法 | 第35-57页 |
| ·实验材料 | 第35-37页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第35页 |
| ·菌株与质粒 | 第35页 |
| ·PCR引物 | 第35-37页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-57页 |
| ·植物基因组DNA提取 | 第37-38页 |
| ·CTAB法 | 第37-38页 |
| ·SDS法 | 第38页 |
| ·植物材料总RNA的提取 | 第38-39页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第39页 |
| ·PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·连接反应 | 第40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第40-41页 |
| ·碱法小量质粒 DNA 的提取 | 第41页 |
| ·DNA序列测定 | 第41-42页 |
| ·Northern杂交分析 | 第42-45页 |
| ·总RNA的提取 | 第42页 |
| ·甲醛变性胶电泳 | 第42-43页 |
| ·转膜 | 第43-44页 |
| ·预杂交 | 第44页 |
| ·探针的制备 | 第44-45页 |
| ·杂交 | 第45页 |
| ·洗膜 | 第45页 |
| ·放射自显影 | 第45页 |
| ·Western blot检测蛋白表达 | 第45-48页 |
| ·蛋白质提取及含量测定 | 第45页 |
| ·SDS-PAGE | 第45-46页 |
| ·转膜 | 第46-47页 |
| ·Western blot | 第47-48页 |
| ·凝胶内激酶实验 | 第48页 |
| ·蛋白质提取及含量测定 | 第48页 |
| ·凝胶内激酶实验 | 第48页 |
| ·洋葱表皮亚细胞定位 | 第48-49页 |
| ·pBI121- ZmMKK4-GFP表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·pBI121-ZmMKK4-GFP重组蛋白亚细胞定位 | 第49页 |
| ·根癌农杆菌介导的转化 | 第49-52页 |
| ·表达载体的构建 | 第50-52页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第52页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第52页 |
| ·拟南芥的无土栽培、转化及分析 | 第52-54页 |
| ·无土栽培 | 第52-53页 |
| ·从培养皿中移栽拟南芥 | 第53页 |
| ·拟南芥转化 | 第53页 |
| ·转基因拟南芥鉴定 | 第53-54页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第54-55页 |
| ·转基因烟草植株的PCR检测 | 第55页 |
| ·转基因植株生理指标测定 | 第55-57页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第55页 |
| ·抗氧化酶活性测定 | 第55页 |
| ·游离脯氨酸含量测定 | 第55-56页 |
| ·可溶性糖含量测定 | 第56页 |
| ·H_2O_2含量测定 | 第56页 |
| ·DAB和NBT染色 | 第56-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-78页 |
| ·玉米促分裂原活化蛋白激酶激酶ZmMKK4 基因的分离 | 第57-58页 |
| ·ZmMKK4 基因的序列分析 | 第58-61页 |
| ·ZmMKK4 全长cDNA分析 | 第58页 |
| ·ZmMKK4 编码蛋白质序列分析 | 第58-60页 |
| ·ZmMKK4 序列系统发生分析 | 第60-61页 |
| ·ZmMKK4 的亚细胞定位 | 第61页 |
| ·ZmMKK4 在玉米中的表达分析 | 第61-63页 |
| ·ZmMKK4 在玉米不同部位的表达分析 | 第61-62页 |
| ·ZmMKK4 在不同信号物质和逆境胁迫下的表达分析 | 第62-63页 |
| ·ZmMKK4 基因在拟南芥中的转化 | 第63-64页 |
| ·转基因表达载体的构建 | 第63页 |
| ·转基因拟南芥的鉴定 | 第63-64页 |
| ·过表达ZmMKK4 增强转基因拟南芥对高盐胁迫的抗性 | 第64-66页 |
| ·过表达ZmMKK4 增强转基因拟南芥在高盐条件下的种子萌发率 | 第64-65页 |
| ·过表达ZmMKK4 增强转基因拟南芥幼苗对高盐胁迫的抗性 | 第65-66页 |
| ·过表达ZmMKK4 提高了转基因拟南芥的抗低温能力 | 第66-68页 |
| ·过表达ZmMKK4 提高了转基因拟南芥幼苗的抗冷能力 | 第66-67页 |
| ·过表达ZmMKK4 提高了转基因拟南芥植株的抗冻能力 | 第67-68页 |
| ·过表达ZmMKK4 提高转基因拟南芥抗盐和抗冷胁迫的分析 | 第68-72页 |
| ·过表达ZmMKK4 提高了高盐和低温胁迫下转基因拟南芥的Pro及可溶性糖含量 | 第68-69页 |
| ·过表达ZmMKK4 提高了高盐和低温胁迫下转基因拟南芥的POD、CAT的活性 | 第69-70页 |
| ·过表达ZmMKK4 增强了高盐和低温胁迫下转基因拟南芥中AtMPK4 的活性 | 第70-71页 |
| ·过表达ZmMKK4 增强了高盐和低温诱导的相关基因的表达 | 第71-72页 |
| ·ZmMKK4 基因在烟草中的转化 | 第72-73页 |
| ·转基因表达载体的构建 | 第72页 |
| ·转基因烟草的鉴定 | 第72-73页 |
| ·过表达ZmMKK4 提高了转基因烟草的抗旱能力 | 第73-74页 |
| ·过表达ZmMKK4 提高转基因烟草抗旱性的分析 | 第74-78页 |
| ·过表达ZmMKK4 增强了干旱胁迫诱导的相关基因的表达 | 第74-75页 |
| ·过表达ZmMKK4 增强了转基因烟草的抗氧化能力 | 第75-76页 |
| ·过表达ZmMKK4 提高转基因烟草脯氨酸含量 | 第76-78页 |
| 4 讨论 | 第78-83页 |
| 5 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第105页 |
