| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-22页 |
| 2.1 材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1. 细胞 | 第15页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第15页 |
| 2.1.3 主要试剂及抗体 | 第15页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第15-16页 |
| 2.1.5 引物序列 | 第16-17页 |
| 2.2 方法 | 第17-22页 |
| 2.2.1 脐静脉内皮细胞的培养 | 第17页 |
| 2.2.2 细胞总RNA提取 | 第17页 |
| 2.2.3 RT-PCR | 第17-18页 |
| 2.2.4 细胞总蛋白样品的制备 | 第18页 |
| 2.2.5 免疫印记分析(Western blot) | 第18页 |
| 2.2.6 脂质体介导的瞬时转染 | 第18页 |
| 2.2.7 划痕实验 | 第18-19页 |
| 2.2.8 Matrigel实验 | 第19页 |
| 2.2.9 ROS定量分析 | 第19页 |
| 2.2.10 实验动物饲养与分组 | 第19-20页 |
| 2.2.11 小鼠心肌缺血模型制备 | 第20页 |
| 2.2.12 心肌组织蛋白提取 | 第20页 |
| 2.2.13 切片制备及免疫组织化学 | 第20-21页 |
| 2.2.14 统计分析 | 第21-22页 |
| 3 实验结果 | 第22-39页 |
| 3.1 VEGF诱导内皮细胞自噬 | 第22-25页 |
| 3.1.1 Western blot检测不同时间VEGF诱导的自噬标志蛋白表达 | 第22-23页 |
| 3.1.2 Western blot检测不同浓度VEGF诱导的自噬标志蛋白表达 | 第23-24页 |
| 3.1.3 RT-PCR检测不同时间VEGF诱导的自噬相关基因mRNA表达 | 第24页 |
| 3.1.4 RT-PCR检测不同浓度VEGF诱导的自噬相关基因mRNA表达情况 | 第24-25页 |
| 3.2 VEGF诱导的内皮细胞活性氧生成 | 第25-27页 |
| 3.2.1 不同时间VEGF诱导的ROS产生 | 第25-26页 |
| 3.2.2 不同浓度VEGF诱导的活性氧ROS产生 | 第26-27页 |
| 3.3 VEGF激发内皮细胞内质网应激 | 第27-30页 |
| 3.3.1 Western blot检测不同浓度VEGF诱导的内质网应激标志蛋白表达 | 第27-28页 |
| 3.3.2 Western blot检测不同时间VEGF诱导的内质网应激标志蛋白表达 | 第28-29页 |
| 3.3.3 RT-PCR检测不同浓度VEGF诱导的内质网应激相关基因mRNA表达 | 第29页 |
| 3.3.4 RT-PCR检测不同时间VEGF诱导的内质网应激相关基因mRNA表达 | 第29-30页 |
| 3.4 自噬阻断对HUVEC管型形成能力的影响 | 第30-33页 |
| 3.4.1 Western blot检测自噬阻断对VEGF诱导的自噬及内质网应激的影响 | 第30-31页 |
| 3.4.2 划痕实验检测抑制自噬对VEGF诱导的HUVEC迁移的影响 | 第31-32页 |
| 3.4.3 基质胶实验检测抑制自噬对VEGF诱导的HUVEC管型形成的影响 | 第32-33页 |
| 3.5 内质网应激在VEGF诱导的管型形成中的作用 | 第33-36页 |
| 3.5.1 Western blot检测抑制内质网应激对VEGF诱导的自噬及内质网应激的影响 | 第33-34页 |
| 3.5.2 划痕实验检测抑制内质网应激对VEGF诱导的HUVEC迁移力的影响 | 第34-35页 |
| 3.5.3 基质胶实验检测抑制内质网应激对VEGF诱导的HUVEC管型形成能力的影响 | 第35-36页 |
| 3.6 小鼠心肌缺血对血管生成与自噬的影响 | 第36-39页 |
| 3.6.1 Western blot检测小鼠心肌缺血对血管生成及自噬的影响 | 第36-37页 |
| 3.6.2 免疫组织化学检测小鼠心肌缺血对血管形成的影响 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 综述 | 第45-56页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 攻读学位期间主要研究成果 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
