摘要 | 第14-16页 |
Abstract | 第16-17页 |
缩略词语表 | 第18-20页 |
第一章 文献综述 | 第20-37页 |
1.1 植物中的ARF基因家族 | 第20-24页 |
1.1.1 生长素响应因子概述 | 第20-23页 |
1.1.2 番茄中的ARF基因研究进展 | 第23-24页 |
1.1.2.1 SIARFs基因家族成员的鉴定和序列分析 | 第23页 |
1.1.2.2 ARFs的系统发育分析 | 第23-24页 |
1.1.2.3 SIARFs基因染色体定位 | 第24页 |
1.2 植物中miRNA生物合成及功能 | 第24-27页 |
1.2.1 miRNA简介 | 第24-25页 |
1.2.2 成熟miRNA的形成及作用机制 | 第25页 |
1.2.3 植物microRNA对生长发育的作用 | 第25-27页 |
1.2.3.1 生长素信号 | 第25-26页 |
1.2.3.2 miRNAs影响花器官与叶器官发育 | 第26页 |
1.2.3.3 miRNAs与逆境 | 第26-27页 |
1.3 生长素与赤霉素对番茄坐果的影响 | 第27-29页 |
1.3.1 番茄坐果过程 | 第27-28页 |
1.3.2 生长素和赤霉素的转录水平上调控 | 第28页 |
1.3.3 生长素与赤霉素相关突变体 | 第28-29页 |
1.4 生长素与脱落酸对植物生长发育的影响 | 第29-31页 |
1.4.1 ABA生物合成调控 | 第29-30页 |
1.4.1.1 生物合成途径和相关酶 | 第29-30页 |
1.4.2 ABA信号转导途径分析 | 第30-31页 |
1.4.3 生长素与ABA之间的相互作用对植物生长的影响 | 第31页 |
1.5 生长素与水通道蛋白(AQPs) | 第31-35页 |
1.5.1 植物中的水通道蛋白(AQPs) | 第31-32页 |
1.5.2 叶片中的水通道蛋白(AQPs) | 第32-33页 |
1.5.3 水通道蛋白(AQPs)与水分胁迫的关系 | 第33-34页 |
1.5.4 水通道蛋白(AQPs)与植物激素的关系 | 第34-35页 |
1.6 本研究目的及意义 | 第35-36页 |
1.7 本研究的技术路线 | 第36-37页 |
第二章 miR160对SIARF10调控番茄叶片失水的生理机能 | 第37-48页 |
2.1 材料与方法 | 第37-39页 |
2.1.1 植物材料 | 第37页 |
2.1.2 实验方法 | 第37-39页 |
2.1.2.1 离体叶片水分缺失试验 | 第37-38页 |
2.1.2.2 叶片水力导度测量 | 第38页 |
2.1.2.3 ABA和HgCl_2施用叶片 | 第38页 |
2.1.2.4 气孔观察与相关参数统计 | 第38页 |
2.1.2.5 ABA含量测定 | 第38-39页 |
2.2 结果与分析 | 第39-46页 |
2.2.1 miR160对SIARF10调控番茄叶片形态及水分缺失的作用 | 第39-40页 |
2.2.2 miR160对SIARF10调控番茄叶片气孔形态和导度的作用 | 第40-41页 |
2.2.3 miR160对SIARF10调控番茄叶片响应ABA的作用 | 第41-42页 |
2.2.4 miR160对SIARF10调控番茄叶片水通道蛋白促进叶片失水的作用 | 第42-43页 |
2.2.5 miR160对SIARF10调控番茄叶片水分缺失有重要作用 | 第43-46页 |
2.3 讨论 | 第46-47页 |
2.4 小结 | 第47-48页 |
第三章 miR160对SIARF10调控番茄叶片失水的分子机制 | 第48-72页 |
3.1 材料与方法 | 第48-52页 |
3.1.1 材料 | 第48页 |
3.1.2 质粒与菌株 | 第48页 |
3.1.3 试验方法 | 第48-52页 |
3.1.3.1 转录组分析 | 第48-49页 |
3.1.3.2 实时荧光定量检测 | 第49页 |
3.1.3.3 ABA含量测定 | 第49页 |
3.1.3.4 启动子分析 | 第49页 |
3.1.3.5 蛋白原核表达及纯化 | 第49-50页 |
3.1.3.6 凝胶迁移试验(EMSA) | 第50页 |
3.1.3.7 番茄启动子瞬时表达及GUS酶含量测定 | 第50-51页 |
3.1.3.8 酵母单杂交 | 第51页 |
3.1.3.9 原位杂交 | 第51-52页 |
3.1.3.10 PEG模拟干旱 | 第52页 |
3.2 结果与分析 | 第52-68页 |
3.2.1 35S:mSIARF10-6的转录组分析 | 第53-57页 |
3.2.2 上调表达AQPs基因的启动子分析 | 第57页 |
3.2.3 35S:mSIARF10-6中启动子GUS活性检测 | 第57页 |
3.2.4 ARF10与ABI5对AQPs基因启动子的结合分析 | 第57-63页 |
3.2.5 SIARF10与SIABI5瞬时表达对叶片水分缺失的影响 | 第63-66页 |
3.2.6 SIPIP2;4原位杂交定位 | 第66-67页 |
3.2.7 SIARF10连接Auxin和ABA信号参与介导叶片失水的调控机制 | 第67页 |
3.2.8 SIARF10和miR160表达水平随叶龄增长的变化 | 第67-68页 |
3.2.9 SIARF10诱导蛋白的rosstte菌株逆境条件下生长状况调查 | 第68页 |
3.3 讨论 | 第68-71页 |
3.4 小结 | 第71-72页 |
第四章 miR160对SIARF10调控番茄果实发育的作用分析 | 第72-83页 |
4.1 材料与方法 | 第72-73页 |
4.1.1 植物材料和生长条件 | 第72页 |
4.1.2 试验用品 | 第72页 |
4.1.3 试验方法 | 第72-73页 |
4.1.3.1 IAA和GA处理 | 第72-73页 |
4.1.3.2 提取植物总RNA及定量和完整性检测 | 第73页 |
4.1.3.3 实时荧光定量引物设计与检测分析 | 第73页 |
4.1.3.4 石蜡切片 | 第73页 |
4.1.3.5 赤霉素和生长素含量测定 | 第73页 |
4.2 结果与分析 | 第73-80页 |
4.2.1 突变体子房发育随时间变化 | 第73-74页 |
4.2.2 IAA和GA调控坐果期果皮细胞分裂的显微分析 | 第74-76页 |
4.2.3 miRNAs调控的靶基因ARFs的表达模式 | 第76-77页 |
4.2.4 miRNA160与miRNA167的表达模式 | 第77页 |
4.2.5 SIARF10对果皮层数的影响 | 第77-79页 |
4.2.6 SIARF10对GA和IAA含量的影响 | 第79页 |
4.2.7 IAA和GA通过影响miRNAs调控的ARFs影响番茄果皮细胞层数 | 第79-80页 |
4.3 讨论 | 第80-81页 |
4.4 小结 | 第81-83页 |
第五章 超表达miRNA160转基因番茄植物叶片发育异常 | 第83-93页 |
5.1 材料与方法 | 第83-85页 |
5.1.1 材料 | 第83页 |
5.1.2 方法 | 第83-85页 |
5.1.2.1 SImiRNA160前体的克隆 | 第83-84页 |
5.1.2.2 超表达miRNA160载体构建 | 第84页 |
5.1.2.3 番茄遗传转化 | 第84页 |
5.1.2.4 T_0代转基因植株的筛选与鉴定 | 第84-85页 |
5.1.2.5 Real time-PCR检测miRNA160在转基因植株中的表达 | 第85页 |
5.1.2.6 T_1代番茄转基因表型鉴定 | 第85页 |
5.2 结果与分析 | 第85-90页 |
5.2.1 Gateway技术构建超表达载体pB7WG2D.1-35S::SImiR160 | 第85-86页 |
5.2.2 转基因番茄植株的获得 | 第86-87页 |
5.2.3 转基因番茄植株的鉴定 | 第87-88页 |
5.2.4 SImiRNA160的表达分析 | 第88-89页 |
5.2.5 35S::SImiR160植株的叶片发育分析 | 第89-90页 |
5.3 讨论 | 第90-91页 |
5.4 小结 | 第91-93页 |
全文总结与展望 | 第93-96页 |
本论文特色与创新之处 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-110页 |
附录 | 第110-118页 |
致谢 | 第118-119页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第119页 |