| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-40页 |
| 1.1 前言 | 第12页 |
| 1.2 植物细胞质雄性不育研究进展 | 第12-21页 |
| 1.2.1 植物细胞质雄性不育的遗传特征和形态学特征 | 第13-16页 |
| 1.2.2 植物细胞质雄性不育基因的克隆和功能分析 | 第16-18页 |
| 1.2.3 植物细胞质雄性不育的不育机制 | 第18-21页 |
| 1.3 植物细胞质雄性不育育性恢复研究进展 | 第21-25页 |
| 1.3.1 植物细胞质雄性不育育性恢复基因的遗传特征 | 第21-22页 |
| 1.3.2 植物细胞质雄性不育恢复基因的克隆和功能分析 | 第22-23页 |
| 1.3.3 植物细胞质雄性不育的恢复机制 | 第23-25页 |
| 1.4 植物PPR家族基因研究进展 | 第25-39页 |
| 1.4.1 植物中PPR基因家族的进化 | 第26-30页 |
| 1.4.2 PPR基因家族的功能 | 第30-36页 |
| 1.4.3 RNA的识别和结合机制 | 第36-39页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第39-40页 |
| 2 材料和方法 | 第40-68页 |
| 2.1 试验材料 | 第40页 |
| 2.2 花药表型观察 | 第40-43页 |
| 2.2.1 半薄切片 | 第40-42页 |
| 2.2.2 透射电镜 | 第42页 |
| 2.2.3 扫描电镜 | 第42-43页 |
| 2.3 图位克隆 | 第43-45页 |
| 2.3.1 分子标记的开发 | 第43页 |
| 2.3.2 油菜DNA的提取 | 第43页 |
| 2.3.3 标记分析 | 第43-44页 |
| 2.3.4 群体扫描与图谱构建 | 第44-45页 |
| 2.3.5 预测候选基因 | 第45页 |
| 2.3.6 候选基因的比较测序 | 第45页 |
| 2.4 载体的构建 | 第45-48页 |
| 2.4.1 互补测验载体构建 | 第45-46页 |
| 2.4.2 超表达载体构建 | 第46页 |
| 2.4.3 干涉载体构建 | 第46页 |
| 2.4.4 启动子分析载体构建 | 第46-47页 |
| 2.4.5 亚细胞定位载体构建 | 第47页 |
| 2.4.6 荧光双分子互补载体构建 | 第47-48页 |
| 2.4.7 酵母双杂交载体构建 | 第48页 |
| 2.5 遗传转化 | 第48-50页 |
| 2.5.1 拟南芥的遗传转化 | 第48-49页 |
| 2.5.2 甘蓝型油菜的遗传转化 | 第49-50页 |
| 2.6 RT-PCR与qPCR分析 | 第50-51页 |
| 2.7 GUS染色 | 第51-52页 |
| 2.8 亚细胞定位 | 第52-56页 |
| 2.9 序列分析与功能预测 | 第56-57页 |
| 2.10 Northern blot | 第57-61页 |
| 2.11 酵母双杂交 | 第61-66页 |
| 2.12 荧光双分子互补（BiFC） | 第66-67页 |
| 2.13 超表达与干涉 | 第67-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-94页 |
| 3.1 Pol CMS花药败育的细胞学观察 | 第68-72页 |
| 3.1.1 Pol CMS花药半薄切片分析 | 第68-69页 |
| 3.1.2 Pol CMS花药透射电镜分析 | 第69-72页 |
| 3.1.3 Pol CMS扫描电镜分析 | 第72页 |
| 3.2 Rfp基因的精细定位 | 第72-76页 |
| 3.2.1 与Rfp基因紧密连锁分子标记的开发和筛选 | 第73-75页 |
| 3.2.2 Rfp基因的图谱定位及定位区间的共线性分析 | 第75-76页 |
| 3.3 Rfp基因的克隆 | 第76-81页 |
| 3.3.1 候选基因的预测 | 第76-77页 |
| 3.3.2 候选基因的比较测序 | 第77-79页 |
| 3.3.3 候选基因遗传转化 | 第79-80页 |
| 3.3.4 共分离检测 | 第80-81页 |
| 3.4 Rfp基因的表达模式 | 第81-84页 |
| 3.4.1 RT-PCR分析 | 第81-82页 |
| 3.4.2 qPCR分析 | 第82页 |
| 3.4.3 GUS染色分析 | 第82-84页 |
| 3.5 Rfp基因的亚细胞定位 | 第84-85页 |
| 3.6 Rfp基因序列分析与功能初探 | 第85-89页 |
| 3.6.1 序列分析 | 第85-88页 |
| 3.6.2 Northern blot | 第88-89页 |
| 3.7 Rfp功能复合体的探究 | 第89-94页 |
| 3.7.1 酵母双杂交筛选互作基因 | 第89-90页 |
| 3.7.2 筛选基因的亚细胞定位 | 第90-91页 |
| 3.7.3 荧光双分子互补（BiFC）验证互作关系 | 第91-92页 |
| 3.7.4 干涉验证复合体功能 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-107页 |
| 4.1 甘蓝型油菜的图位克隆 | 第94-97页 |
| 4.1.1 定位群体的构建 | 第95-96页 |
| 4.1.2 比较基因组以及参考基因组序列的利用 | 第96-97页 |
| 4.1.3 二代测序技术的应用 | 第97页 |
| 4.2 细胞质雄性不育恢复基因研究在育种中的应用 | 第97-99页 |
| 4.2.1 分子标记的利用可以提高育种效率 | 第98-99页 |
| 4.2.2 恢复基因的克隆为人工创制恢复系奠定基础 | 第99页 |
| 4.3 波里马细胞质雄性不育败育败育的表型及机制 | 第99-104页 |
| 4.4 Rfp基因的功能 | 第104-105页 |
| 4.5 Rfp基因的进化 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-131页 |
| 致谢 | 第131-134页 |
| 附录 | 第134-135页 |
| 作者简介 | 第134页 |
| 文章发表 | 第134-135页 |
