中文摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略词索引表 | 第15-17页 |
第1章 绪论 | 第17-39页 |
1.1 RNAI的研究现状 | 第17-20页 |
1.1.1 RNAi的发现 | 第17页 |
1.1.2 RNAi作用机制 | 第17-19页 |
1.1.3 siRNA存在的问题及序列设计 | 第19-20页 |
1.2 穿膜肽的研究现状 | 第20-28页 |
1.2.1 穿膜肽的发现 | 第20-23页 |
1.2.2 穿膜肽的入胞机制 | 第23-25页 |
1.2.3 穿膜肽的应用 | 第25-28页 |
1.3 纳米载体递送SIRNA的研究现状 | 第28-35页 |
1.3.0 大小和形状对纳米载体递送siRNA的影响 | 第29-30页 |
1.3.1 表面电荷对纳米载体递送siRNA的影响 | 第30-32页 |
1.3.2 PEG化对纳米载体递送siRNA的影响 | 第32-34页 |
1.3.3 靶向配体修饰对纳米载体递送siRNA的影响 | 第34-35页 |
1.4 立题依据及研究思路 | 第35-39页 |
第2章 SIRNA在肿瘤细胞中RNAI效果评价 | 第39-61页 |
2.1 仪器与材料 | 第39-41页 |
2.1.1 主要仪器 | 第39-40页 |
2.1.2 siRNA序列 | 第40页 |
2.1.3 材料与试剂 | 第40页 |
2.1.4 细胞株 | 第40-41页 |
2.2 实验方法 | 第41-45页 |
2.2.1 细胞培养及转染 | 第41页 |
2.2.2 实时荧光定量PCR检测mRNA的水平 | 第41-42页 |
2.2.3 Western blot检测蛋白的表达 | 第42-43页 |
2.2.4 MTT检测抗肿瘤效果 | 第43-44页 |
2.2.5 流式细胞术检测细胞周期 | 第44页 |
2.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第44页 |
2.2.7 肿瘤细胞凋亡信号通路的初步探索 | 第44-45页 |
2.2.8 统计性分析 | 第45页 |
2.3 结果与讨论 | 第45-59页 |
2.3.1 实时荧光定量PCR检测m RNA的水平 | 第45-49页 |
2.3.2 Western blot检测蛋白的表达 | 第49-52页 |
2.3.3 siRNA对肿瘤细胞增殖的影响 | 第52-53页 |
2.3.4 siRNA对细胞周期的影响 | 第53-56页 |
2.3.5 siRNA对细胞凋亡的影响 | 第56-57页 |
2.3.6 siRNA相关的肿瘤细胞凋亡信号通路 | 第57-59页 |
2.4 本章小结 | 第59-61页 |
第3章 改性穿膜肽的合成、鉴定及细胞毒性评价 | 第61-75页 |
3.1 仪器与材料 | 第61-62页 |
3.1.1 主要仪器 | 第61-62页 |
3.1.2 材料与试剂 | 第62页 |
3.1.3 细胞株 | 第62页 |
3.2 实验方法 | 第62-67页 |
3.2.1 辛酸修饰八聚精氨酸(CA-R8)的合成 | 第62-64页 |
3.2.2 硬脂酸修饰八聚精氨酸(St A-R8)的合成 | 第64-65页 |
3.2.3 油酸修饰八聚精氨酸(OA-R8)的合成 | 第65页 |
3.2.4 亚油酸修饰八聚精氨酸(LA-R8)的合成 | 第65页 |
3.2.5 改性穿膜肽的分离纯化 | 第65页 |
3.2.6 MALDI-TOF-MS检测改性穿膜肽的分子量 | 第65-66页 |
3.2.7 MTT检测改性穿膜肽的细胞毒性 | 第66页 |
3.2.8 统计性分析 | 第66-67页 |
3.3 结果与讨论 | 第67-72页 |
3.3.1 改性穿膜肽分子量的检测 | 第67页 |
3.3.2 改性穿膜肽细胞毒性的考察 | 第67-72页 |
3.4 本章小结 | 第72-75页 |
第4章 改性穿膜肽纳米粒的制备及递送SIRNA的研究 | 第75-101页 |
4.1 仪器与材料 | 第75-76页 |
4.1.1 主要仪器 | 第75-76页 |
4.1.2 材料与试剂 | 第76页 |
4.1.3 细胞株 | 第76页 |
4.2 实验方法 | 第76-81页 |
4.2.1 载siRNA的改性穿膜肽纳米粒的制备 | 第76-77页 |
4.2.2 载siRNA纳米粒的性质表征 | 第77-78页 |
4.2.3 载siRNA纳米粒细胞摄取的研究 | 第78-79页 |
4.2.4 载siRNA纳米粒沉默靶基因能力的研究 | 第79页 |
4.2.5 载siRNA纳米粒入胞机制的研究 | 第79-80页 |
4.2.6 统计性分析 | 第80-81页 |
4.3 结果与讨论 | 第81-98页 |
4.3.1 载siRNA纳米粒的性质表征 | 第81-85页 |
4.3.2 载siRNA纳米粒细胞摄取的研究 | 第85-91页 |
4.3.3 载siRNA纳米粒沉默靶基因能力的研究 | 第91-93页 |
4.3.4 载siRNA纳米粒入胞机制的研究 | 第93-98页 |
4.4 本章小结 | 第98-101页 |
第5章 基于改性穿膜肽的多功能脂质体的制备及体内外抗肿瘤研究 | 第101-117页 |
5.1 仪器与材料 | 第101-102页 |
5.1.1 主要仪器 | 第101-102页 |
5.1.2 材料与试剂 | 第102页 |
5.1.3 实验动物 | 第102页 |
5.2 实验方法 | 第102-106页 |
5.2.1 多功能脂质体的制备 | 第102-103页 |
5.2.2 多功能脂质体的性质表征 | 第103页 |
5.2.3 多功能脂质体的体外评价试验 | 第103-104页 |
5.2.4 多功能脂质体的体内评价试验 | 第104-106页 |
5.3 结果与讨论 | 第106-115页 |
5.3.1 多功能脂质体的性质表征 | 第106-108页 |
5.3.2 多功能脂质体的体外评价试验 | 第108-110页 |
5.3.3 多功能脂质体的体内评价试验 | 第110-115页 |
5.4 本章小结 | 第115-117页 |
第6章 结论与展望 | 第117-119页 |
参考文献 | 第119-139页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第139-141页 |
致谢 | 第141-142页 |