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靶向survivin的siRNA及其改性穿膜肽纳米给药系统的研究

中文摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
缩略词索引表第15-17页
第1章 绪论第17-39页
    1.1 RNAI的研究现状第17-20页
        1.1.1 RNAi的发现第17页
        1.1.2 RNAi作用机制第17-19页
        1.1.3 siRNA存在的问题及序列设计第19-20页
    1.2 穿膜肽的研究现状第20-28页
        1.2.1 穿膜肽的发现第20-23页
        1.2.2 穿膜肽的入胞机制第23-25页
        1.2.3 穿膜肽的应用第25-28页
    1.3 纳米载体递送SIRNA的研究现状第28-35页
        1.3.0 大小和形状对纳米载体递送siRNA的影响第29-30页
        1.3.1 表面电荷对纳米载体递送siRNA的影响第30-32页
        1.3.2 PEG化对纳米载体递送siRNA的影响第32-34页
        1.3.3 靶向配体修饰对纳米载体递送siRNA的影响第34-35页
    1.4 立题依据及研究思路第35-39页
第2章 SIRNA在肿瘤细胞中RNAI效果评价第39-61页
    2.1 仪器与材料第39-41页
        2.1.1 主要仪器第39-40页
        2.1.2 siRNA序列第40页
        2.1.3 材料与试剂第40页
        2.1.4 细胞株第40-41页
    2.2 实验方法第41-45页
        2.2.1 细胞培养及转染第41页
        2.2.2 实时荧光定量PCR检测mRNA的水平第41-42页
        2.2.3 Western blot检测蛋白的表达第42-43页
        2.2.4 MTT检测抗肿瘤效果第43-44页
        2.2.5 流式细胞术检测细胞周期第44页
        2.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡第44页
        2.2.7 肿瘤细胞凋亡信号通路的初步探索第44-45页
        2.2.8 统计性分析第45页
    2.3 结果与讨论第45-59页
        2.3.1 实时荧光定量PCR检测m RNA的水平第45-49页
        2.3.2 Western blot检测蛋白的表达第49-52页
        2.3.3 siRNA对肿瘤细胞增殖的影响第52-53页
        2.3.4 siRNA对细胞周期的影响第53-56页
        2.3.5 siRNA对细胞凋亡的影响第56-57页
        2.3.6 siRNA相关的肿瘤细胞凋亡信号通路第57-59页
    2.4 本章小结第59-61页
第3章 改性穿膜肽的合成、鉴定及细胞毒性评价第61-75页
    3.1 仪器与材料第61-62页
        3.1.1 主要仪器第61-62页
        3.1.2 材料与试剂第62页
        3.1.3 细胞株第62页
    3.2 实验方法第62-67页
        3.2.1 辛酸修饰八聚精氨酸(CA-R8)的合成第62-64页
        3.2.2 硬脂酸修饰八聚精氨酸(St A-R8)的合成第64-65页
        3.2.3 油酸修饰八聚精氨酸(OA-R8)的合成第65页
        3.2.4 亚油酸修饰八聚精氨酸(LA-R8)的合成第65页
        3.2.5 改性穿膜肽的分离纯化第65页
        3.2.6 MALDI-TOF-MS检测改性穿膜肽的分子量第65-66页
        3.2.7 MTT检测改性穿膜肽的细胞毒性第66页
        3.2.8 统计性分析第66-67页
    3.3 结果与讨论第67-72页
        3.3.1 改性穿膜肽分子量的检测第67页
        3.3.2 改性穿膜肽细胞毒性的考察第67-72页
    3.4 本章小结第72-75页
第4章 改性穿膜肽纳米粒的制备及递送SIRNA的研究第75-101页
    4.1 仪器与材料第75-76页
        4.1.1 主要仪器第75-76页
        4.1.2 材料与试剂第76页
        4.1.3 细胞株第76页
    4.2 实验方法第76-81页
        4.2.1 载siRNA的改性穿膜肽纳米粒的制备第76-77页
        4.2.2 载siRNA纳米粒的性质表征第77-78页
        4.2.3 载siRNA纳米粒细胞摄取的研究第78-79页
        4.2.4 载siRNA纳米粒沉默靶基因能力的研究第79页
        4.2.5 载siRNA纳米粒入胞机制的研究第79-80页
        4.2.6 统计性分析第80-81页
    4.3 结果与讨论第81-98页
        4.3.1 载siRNA纳米粒的性质表征第81-85页
        4.3.2 载siRNA纳米粒细胞摄取的研究第85-91页
        4.3.3 载siRNA纳米粒沉默靶基因能力的研究第91-93页
        4.3.4 载siRNA纳米粒入胞机制的研究第93-98页
    4.4 本章小结第98-101页
第5章 基于改性穿膜肽的多功能脂质体的制备及体内外抗肿瘤研究第101-117页
    5.1 仪器与材料第101-102页
        5.1.1 主要仪器第101-102页
        5.1.2 材料与试剂第102页
        5.1.3 实验动物第102页
    5.2 实验方法第102-106页
        5.2.1 多功能脂质体的制备第102-103页
        5.2.2 多功能脂质体的性质表征第103页
        5.2.3 多功能脂质体的体外评价试验第103-104页
        5.2.4 多功能脂质体的体内评价试验第104-106页
    5.3 结果与讨论第106-115页
        5.3.1 多功能脂质体的性质表征第106-108页
        5.3.2 多功能脂质体的体外评价试验第108-110页
        5.3.3 多功能脂质体的体内评价试验第110-115页
    5.4 本章小结第115-117页
第6章 结论与展望第117-119页
参考文献第119-139页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第139-141页
致谢第141-142页

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