| 缩略词表 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 前言 | 第14-21页 |
| 1. TLR5的蛋白结构及分布 | 第15-16页 |
| 2. TLR5的信号通路 | 第16-17页 |
| 3. TLR5生理功能的研究 | 第17-18页 |
| 4. TLR5激动剂 | 第18页 |
| 5. 鞭毛蛋白衍生物CBLB502 | 第18-21页 |
| 第一部分 CBLB502-Fc 真核表达载体的构建、表达与纯化 | 第21-36页 |
| 1. 实验材料、试剂和仪器设备 | 第21-24页 |
| 1.1 质粒、感受态和细胞株 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第21-22页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第22-23页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2. 方法 | 第24-29页 |
| 2.1 CBLB502目的基因的获得 | 第24页 |
| 2.2 pcDNA3.1-CBLB502-Fc真核表达载体的构建 | 第24-26页 |
| 2.3 重组质粒转染CHO-S细胞 | 第26页 |
| 2.4 表达CBLB502-Fc的CHO-S细胞的单克隆筛选及WB验证 | 第26-27页 |
| 2.5 CBLB502-Fc融合蛋白的表达纯化 | 第27-28页 |
| 2.6 SDS-PAGE检测目的蛋白及考马斯亮蓝快速染色 | 第28-29页 |
| 3. 结果 | 第29-33页 |
| 3.1 CBLB502目的基因的优化合成 | 第29-30页 |
| 3.2 pcDNA3.1-CBLB502-Fc质粒的构建 | 第30-31页 |
| 3.3 pcDNA3.1-CBLB502-Fc质粒转染CHO-S细胞 | 第31页 |
| 3.4 阳性细胞克隆的筛选和WB验证 | 第31-32页 |
| 3.5 Protein A亲和柱纯化目的蛋白 | 第32-33页 |
| 3.6 目的蛋白的SDS-PAGE鉴定及考马斯亮蓝染色结果 | 第33页 |
| 4 讨论与分析 | 第33-35页 |
| 5. 小结 | 第35-36页 |
| 第二部分 CBLB502-Fc融合蛋白体内外活性的初步鉴定 | 第36-45页 |
| 1. 实验动物、材料与试剂 | 第36-37页 |
| 1.1 细胞株和动物 | 第36页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第36-37页 |
| 2. 方法 | 第37-39页 |
| 2.1 CBLB502-Fc激活TLR5-NF-κB信号通路的研究 | 第37-38页 |
| 2.2 检测CBLB502-Fc对JNK激活情况 | 第38页 |
| 2.3 CBLB502-Fc对小鼠辐射防护作用的研究 | 第38-39页 |
| 2.4 CBLB502-Fc对注射高剂量DAC的小鼠存活率的影响 | 第39页 |
| 2.5 统计学分析 | 第39页 |
| 3. 结果 | 第39-42页 |
| 3.1 CBLB502-Fc不激活NF-κB信号通路 | 第39-41页 |
| 3.2 CBLB502-Fc提高JNK的磷酸化水平 | 第41页 |
| 3.3 CBLB502-Fc显著提高 γ 射线照射后小鼠的生存率 | 第41-42页 |
| 3.4 CBLB502-Fc延长注射高剂量DAC的小鼠存活时间 | 第42页 |
| 4. 讨论与分析 | 第42-44页 |
| 5. 小结 | 第44-45页 |
| 第三部分 CBLB502-Fc缓解骨髓抑制的初步研究 | 第45-56页 |
| 1. 实验动物、材料和试剂 | 第45页 |
| 1.1 动物 | 第45页 |
| 1.2 主要试剂及耗材 | 第45页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第45页 |
| 2. 方法 | 第45-46页 |
| 2.1 CBLB502-Fc影响小鼠骨髓抑制的初步动物实验及外周血象检测 | 第45-46页 |
| 2.2 小鼠外周血与骨髓进行流式细胞分析 | 第46页 |
| 2.3 统计与分析 | 第46页 |
| 3. 结果 | 第46-52页 |
| 3.1 CBLB502-Fc对于普通和骨髓抑制小鼠外周血象的影响 | 第46-47页 |
| 3.2 小鼠外周血与骨髓的流式细胞分析的结果 | 第47-52页 |
| 4. 讨论与分析 | 第52-55页 |
| 5. 小结 | 第55-56页 |
| 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 附录 | 第61-62页 |
| 个人简历 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
