摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-25页 |
1.1 表观遗传调控概述 | 第13-16页 |
1.1.1 DNA甲基化和去甲基化 | 第13-14页 |
1.1.2 组蛋白乙酰化 | 第14-15页 |
1.1.3 X染色体失活 | 第15-16页 |
1.2 小鼠卵母细胞减数分裂概述 | 第16-20页 |
1.2.1 小鼠卵母细胞减数分裂 | 第16-17页 |
1.2.2 调控卵母细胞减数分裂的蛋白因子 | 第17-20页 |
1.3 维生素C的研究概况 | 第20-24页 |
1.3.1 维生素C的简介 | 第20-21页 |
1.3.2 维生素C的生理功能 | 第21页 |
1.3.3 维生素C与表观遗传调控的研究进展 | 第21-23页 |
1.3.4 维生素C应用前景与展望 | 第23-24页 |
1.4 研究的目的与意义 | 第24-25页 |
2 材料和方法 | 第25-39页 |
2.1 实验技术路线图 | 第25页 |
2.2 实验材料 | 第25-30页 |
2.2.1 实验动物 | 第25-26页 |
2.2.2 主要仪器设备 | 第26-27页 |
2.2.3 实验试剂药品 | 第27页 |
2.2.4 主要试剂配制 | 第27-29页 |
2.2.5 RT-PCR引物 | 第29-30页 |
2.3 试验方法 | 第30-38页 |
2.3.1 小鼠卵母细胞收集及培养 | 第30-31页 |
2.3.2 小鼠胚胎获取与培养 | 第31-32页 |
2.3.3 小鼠卵母细胞和胚胎5-mc、5-hmc免疫荧光 | 第32-34页 |
2.3.4 卵母细胞总cDNA的获取 | 第34-35页 |
2.3.5 RT-PCR检测 | 第35-37页 |
2.3.6 WB检测卵母细胞相关蛋白表达 | 第37-38页 |
2.4 数据统计 | 第38-39页 |
3 结果与分析 | 第39-52页 |
3.1 L-Ascorbic acid对小鼠卵母细胞体外发育的影响 | 第39-40页 |
3.2 L-Ascorbic acid对小鼠卵母细胞染色体动态和微管蛋白的影响 | 第40-41页 |
3.3 L-Ascorbic acid对小鼠卵母细胞DNA甲基化水平的影响 | 第41-43页 |
3.3.1 L-Ascorbic acid对小鼠卵母细胞DNA甲基化相关蛋白的影响 | 第41-42页 |
3.3.2 L-Ascorbic acid对小鼠卵母细胞5-me免疫荧光检测 | 第42-43页 |
3.4 L-Ascorbic acid对小鼠卵母细胞纺锤体检验点相关蛋白的影响 | 第43-44页 |
3.5 L-Ascorbic acid对小鼠卵母细胞信号通路相关蛋白P-ERK的影响 | 第44-45页 |
3.6 RT-PCR检测L-Ascorbic acid处理小鼠卵母细胞相关基因mRNA水平表达 | 第45-46页 |
3.6.1 去甲基化相关基因TET家族和DNMT1mRNA水平表达 | 第45-46页 |
3.6.2 L-Ascorbic acid处理小鼠卵母细全能性基因mRNA水平表达 | 第46页 |
3.7 体内胚胎和体外胚胎5-me和5-hmc差异性比较 | 第46-49页 |
3.7.1 体外培养胚胎和体内胚胎5-mc差异性比较 | 第47-48页 |
3.7.2 体外培养胚胎和体内胚胎5-hmc差异性比较 | 第48-49页 |
3.8 RT-PCR检测胚胎去甲基化基因mRNA的表达 | 第49页 |
3.9 L-Ascorbic acid对小鼠胚胎发育率的影响 | 第49-52页 |
4 讨论 | 第52-59页 |
4.1 L-Ascorbic Acid影响小鼠卵母细胞体外发育相关机理的探讨 | 第52-58页 |
4.1.1 体外培养条件对卵母细胞发育成熟的影响 | 第52-54页 |
4.1.2 L-Ascorbic Acid对小鼠卵母细胞发育率、染色体及纺锤体动态的影响 | 第54-55页 |
4.1.3 L-Ascorbic Acid对小鼠卵母细胞DNA甲基化影响机理的探讨 | 第55-56页 |
4.1.4 L-Ascorbic Acid对小鼠卵母细胞纺锤体检验点和信号通路机理影响的探讨 | 第56-57页 |
4.1.5 小结 | 第57-58页 |
4.2 L-Ascorbic Acid影响小鼠胚胎体外发育相关机理的探讨 | 第58-59页 |
5 小结 | 第59-61页 |
5.1 主要结论 | 第59-60页 |
5.2 本研究的创新点 | 第60页 |
5.3 需要进一步研究的相关问题 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-72页 |
致谢 | 第72页 |