| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 KNOX基因概述 | 第11-12页 |
| 1.2 KNOX基因功能研究 | 第12-15页 |
| 1.2.1 KNOXⅠ基因功能研究 | 第12-13页 |
| 1.2.2 KNOXⅡ基因功能研究 | 第13-14页 |
| 1.2.3 KNOXⅠ和KNOXⅡ基因功能区别与联系 | 第14-15页 |
| 1.3 KNOX调控的下游路径 | 第15-16页 |
| 1.4 拟南芥开花时间调控的分子基础 | 第16-21页 |
| 1.4.1 光周期途径 | 第16-17页 |
| 1.4.2 春化途径 | 第17-18页 |
| 1.4.3 温度途径 | 第18页 |
| 1.4.4 自主途径 | 第18-19页 |
| 1.4.5 赤霉素途径 | 第19页 |
| 1.4.6 年龄途径 | 第19-20页 |
| 1.4.7 开花调控途径的整合 | 第20-21页 |
| 1.5 荷叶铁线蕨研究进展 | 第21-22页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第23-36页 |
| 2.1 实验材料、试剂和引物 | 第23-26页 |
| 2.1.1 植物材料、菌株及载体 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第25页 |
| 2.1.4 所用PCR引物 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-36页 |
| 2.2.1 根癌农杆菌GV3101、EHA105感受态的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.2 ArsKN2重组表达载体转化农杆菌、阳性克隆的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.3 植物材料的培养 | 第28页 |
| 2.2.4 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第28-33页 |
| 2.2.4.1 Floral Dip法转化拟南芥 | 第28-29页 |
| 2.2.4.2 拟南芥种子的抗生素筛选 | 第29页 |
| 2.2.4.3 拟南芥植株的PCR检测及表型观察 | 第29-30页 |
| 2.2.4.4 荷叶铁线蕨ArsKN2及相关基因在拟南芥内的表达分析 | 第30-33页 |
| 2.2.5 农杆菌介导的烟草转化 | 第33-34页 |
| 2.2.5.1 叶盘法法转化烟草 | 第33页 |
| 2.2.5.2 烟草植株的PCR检测及表型观察 | 第33-34页 |
| 2.2.6 农杆菌介导的水蕨转化 | 第34-36页 |
| 2.2.6.1 农杆菌侵染法转化水蕨 | 第34页 |
| 2.2.6.2 水蕨侵染条件的设置 | 第34-35页 |
| 2.2.6.3 水蕨的PCR检测 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-49页 |
| 3.1 ArsKN2重组质粒转化农杆菌的阳性克隆筛选 | 第36页 |
| 3.2 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第36-45页 |
| 3.2.1 转基因拟南芥PCR鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2.2 转基因和对照组拟南芥植株的表型观察 | 第37-40页 |
| 3.2.2.1 转基因和对照组拟南芥第1朵花可见时的莲座叶数目和开花时间比较 | 第37-39页 |
| 3.2.2.2 转基因和对照组拟南芥开花表型观察 | 第39-40页 |
| 3.2.3 ArsKN2及相关基因在拟南芥中的表达分析 | 第40-45页 |
| 3.2.3.1 转基因和对照组拟南芥RNA的提取及cDNA合成 | 第40-41页 |
| 3.2.3.2 转基因和对照组拟南芥半定量RT-PCR分析 | 第41-42页 |
| 3.2.3.3 转基因和对照组拟南芥实时荧光定量qRT-PCR分析 | 第42-45页 |
| 3.3 农杆菌介导的烟草转化 | 第45-46页 |
| 3.4 农杆菌介导的水蕨转化 | 第46-49页 |
| 3.4.1 不同菌液浓度和侵染时间对转化的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.2 不同共培养时间对转化的影响 | 第47页 |
| 3.4.3 水蕨PCR检测 | 第47-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
