| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-13页 |
| 1.1 微环境缺氧促进肿瘤增殖、侵袭和转移 | 第10-11页 |
| 1.2 二甲双胍抑制肿瘤的生长、侵袭和转移的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 本课题的意义与设想 | 第12-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-31页 |
| 2.1 材料 | 第13-19页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第13页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第13-15页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.4 主要实验试剂配制方法 | 第16-19页 |
| 2.2 研究方法及内容 | 第19-31页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第19页 |
| 2.2.2 细胞传代培养 | 第19-20页 |
| 2.2.3 细胞冻存 | 第20页 |
| 2.2.4 细胞接种 | 第20-21页 |
| 2.2.5 培养箱低氧环境控制措施 | 第21页 |
| 2.2.6 低氧环境对 SACC-83 细胞增殖能力的影响 | 第21-22页 |
| 2.2.7 低氧环境中二甲双胍对 SACC-83 细胞增殖能力的影响 | 第22页 |
| 2.2.8 细胞划痕实验检测 SACC-83 细胞的迁移能力 | 第22-23页 |
| 2.2.9 Transwell实验检测SACC-83 细胞的侵袭能力 | 第23页 |
| 2.2.10 细胞蛋白提取、浓度测定与保存 | 第23-25页 |
| 2.2.11 Western blot检测SACC-83 细胞株中HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP | 第25-27页 |
| 2.2.12 Real-time PCR检测SACC-83 细胞株中HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP-9的m RNA表达 | 第27-30页 |
| 2.2.13 统计学分析 | 第30-31页 |
| 第3章 实验结果 | 第31-45页 |
| 3.1 不同氧环境对SACC-83 细胞增殖能力的影响 | 第31-32页 |
| 3.2 低氧环境中二甲双胍对SACC-83 细胞增殖能力的影响 | 第32-33页 |
| 3.3 低氧环境中二甲双胍对SACC-83 细胞迁移能力的影响 | 第33-34页 |
| 3.4 低氧环境中二甲双胍对SACC-83 细胞侵袭能力的影响 | 第34-35页 |
| 3.5 低氧环境中二甲双胍对SACC-83 细胞HIF-1α、VEGF、MMP-2 和MMP-9蛋白表达水平的影响 | 第35-39页 |
| 3.6 低氧环境中二甲双胍对SACC-83 细胞HIF-1α、VEGF、MMP-2 和MMP-9m RNA表达水平的影响 | 第39-45页 |
| 3.6.1 RNA纯度鉴定 | 第39页 |
| 3.6.2 RNA完整性鉴定 | 第39-40页 |
| 3.6.3 Real-time PCR测定GAPDH、HIF-1α、VEGF、MMP-2、MMP-9m RNA的溶解曲线 | 第40-41页 |
| 3.6.4 Real-time PCR测定GAPDH、HIF-1α、VEGF、MMP-2 和MMP-9m RNA的扩增曲线 | 第41页 |
| 3.6.5 Real-time PCR测定HIF-1α、VEGF、MMP-2 和MMP-9 m RNA的表达水平 | 第41-45页 |
| 第4章 讨论 | 第45-49页 |
| 4.1 低氧与二甲双胍对SACC-83 细胞增殖的影响 | 第45页 |
| 4.2 低氧与二甲双胍对SACC-83 细胞迁移、侵袭能力的影响 | 第45-46页 |
| 4.3 低氧与二甲双胍对肿瘤细胞生物学行为影响的可能机制 | 第46-49页 |
| 第5章 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第55-56页 |
| 综述 | 第56-67页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
