| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写词及其中文对照 | 第9-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-29页 |
| 1.1 食用菌菌种的概况 | 第17-19页 |
| 1.1.1 食用菌菌种概述 | 第17页 |
| 1.1.2 食用菌菌种的保藏 | 第17-18页 |
| 1.1.2.1 继代培养保藏法 | 第17页 |
| 1.1.2.2 液体石蜡保藏法 | 第17-18页 |
| 1.1.2.3 食用菌菌种的其他保藏方法 | 第18页 |
| 1.1.3 食用菌菌种的退化现象 | 第18-19页 |
| 1.1.3.1 食用菌菌种退化的表现 | 第18页 |
| 1.1.3.2 食用菌菌种退化的原因 | 第18-19页 |
| 1.2 草菇的概况 | 第19-22页 |
| 1.2.1 草菇的地位 | 第19页 |
| 1.2.2 草菇的营养价值 | 第19-20页 |
| 1.2.3 草菇的药用保健价值 | 第20页 |
| 1.2.4 草菇生长条件 | 第20-21页 |
| 1.2.4.1 温度条件 | 第20页 |
| 1.2.4.2 酸碱度条件 | 第20页 |
| 1.2.4.3 湿度条件 | 第20-21页 |
| 1.2.4.4 培养基质 | 第21页 |
| 1.2.5 草菇在生产时存在的问题 | 第21-22页 |
| 1.2.5.1 草菇的生物学效率 | 第21页 |
| 1.2.5.2 草菇的自溶现象 | 第21-22页 |
| 1.2.5.3 草菇菌种的退化现象 | 第22页 |
| 1.3 相关酶差异表达与草菇菌种的退化 | 第22-23页 |
| 1.3.1 生物活性酶与草菇菌种的退化的关系 | 第22页 |
| 1.3.2 纤维素酶 | 第22-23页 |
| 1.3.3 多酚氧化酶 | 第23页 |
| 1.4 草菇相关酶差异表达检测方法 | 第23-26页 |
| 1.4.1 mRNA差异显示技术(DDRT-PCR) | 第23-24页 |
| 1.4.2 数字基因表达图谱(DGE) | 第24页 |
| 1.4.3 cDNA微阵列技术 | 第24页 |
| 1.4.4 实时荧光定量PCR(RT-PCR) | 第24-26页 |
| 1.4.4.1 RT-PCR技术的基本原理 | 第24-25页 |
| 1.4.4.2 RT-PCR的技术特点 | 第25页 |
| 1.4.4.3 RT-PCR的定量方法 | 第25-26页 |
| 1.4.4.4 RT-PCR在差异表达基因克隆上的应用 | 第26页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 1.6 本研究的内容 | 第27页 |
| 1.7 本研究的技术路线 | 第27-29页 |
| 第二章 草菇退化菌种的获得及性状的研究 | 第29-37页 |
| 2.1 实验材料、试剂与仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第29页 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 | 第29-30页 |
| 2.2 培养基的配制 | 第30页 |
| 2.2.1 PDA固体培养基的制备 | 第30页 |
| 2.2.2 PDA液体发酵培养基的制备 | 第30页 |
| 2.3 实验内容与方法 | 第30-31页 |
| 2.3.1 菌种的继代与保藏 | 第30-31页 |
| 2.3.2 菌丝生长速度的测定 | 第31页 |
| 2.3.3 气生菌丝密度及厚垣孢子数量的测定 | 第31页 |
| 2.3.4 生物量的测定 | 第31页 |
| 2.4 结果与分析 | 第31-34页 |
| 2.4.1 继代培养草菇菌丝体生长速度的变化 | 第31-32页 |
| 2.4.2 草菇菌种退化过程中气生菌丝密度和厚垣孢子数量测定 | 第32-33页 |
| 2.4.3 草菇菌株退化过程中生物量的测定 | 第33-34页 |
| 2.5 讨论 | 第34-35页 |
| 2.6 本章小结 | 第35-37页 |
| 第三章 草菇退化过程中菌丝体营养成分的变化 | 第37-53页 |
| 3.1 实验材料、试剂与仪器设备 | 第37-38页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第37页 |
| 3.1.3 主要实验仪器及设备 | 第37-38页 |
| 3.2 培养基与主要试剂配制 | 第38-39页 |
| 3.2.1 PDA液体发酵培养基的制备 | 第38页 |
| 3.2.2 主要试剂的配制 | 第38-39页 |
| 3.3 实验内容与方法 | 第39-44页 |
| 3.3.1 菌种活化 | 第39页 |
| 3.3.2 发酵培养 | 第39页 |
| 3.3.3 草菇菌丝体中营养粗提液的制备 | 第39-40页 |
| 3.3.4 主要营养成分的测定 | 第40-44页 |
| 3.3.4.1 多糖含量的测定 | 第40-41页 |
| 3.3.4.2 总黄酮含量的测定 | 第41-42页 |
| 3.3.4.3 粗蛋白含量的测定 | 第42-43页 |
| 3.3.4.4 粗多酚含量的测定 | 第43页 |
| 3.3.4.5 氨基酸的测定 | 第43-44页 |
| 3.3.4.6 矿质元素含量的测定 | 第44页 |
| 3.4 结果与分析 | 第44-51页 |
| 3.4.1 草菇退化过程中多糖含量的变化 | 第44-45页 |
| 3.4.2 草菇退化过程中总黄酮含量的变化 | 第45-46页 |
| 3.4.3 草菇退化过程中蛋白质含量的变化 | 第46页 |
| 3.4.4 草菇退化过程中总酚含量的变化 | 第46-47页 |
| 3.4.5 草菇退化过程中氨基酸含量的变化 | 第47-50页 |
| 3.4.6 草菇退化过程中矿质元素含量的变化 | 第50-51页 |
| 3.5 讨论 | 第51-52页 |
| 3.6 本章小结 | 第52-53页 |
| 第四章 草菇退化过程中酶活的变化 | 第53-65页 |
| 4.1 实验材料、试剂与仪器设备 | 第53-54页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第53页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第53页 |
| 4.1.3 主要实验仪器与设备 | 第53-54页 |
| 4.2 主要试剂的配制 | 第54-56页 |
| 4.3 实验内容与方法 | 第56-59页 |
| 4.3.1 发酵培养基的制备 | 第56页 |
| 4.3.2 粗酶液的提取 | 第56页 |
| 4.3.3 葡萄糖标准曲线的制作 | 第56-57页 |
| 4.3.4 纤维素总酶活(滤纸酶)的测定 | 第57页 |
| 4.3.5 内切葡聚糖酶活(CMCase活力)的测定 | 第57-58页 |
| 4.3.6 纤维二糖酶(β-葡萄糖苷酶)的测定 | 第58-59页 |
| 4.3.7 纤维素酶活(纤维素总酶活、CMC酶活和纤维二糖酶活)计算 | 第59页 |
| 4.3.8 漆酶活力的测定 | 第59页 |
| 4.3.9 多酚氧化酶(PPO)活力的测定 | 第59页 |
| 4.4 结果与分析 | 第59-63页 |
| 4.4.1 草菇退化期间滤纸酶活力的变化 | 第59-60页 |
| 4.4.2 草菇退化期间CMCase活力的变化 | 第60-61页 |
| 4.4.3 草菇退化期间漆酶活力的变化 | 第61页 |
| 4.4.4 草菇退化期间PPO活力的变化 | 第61-62页 |
| 4.4.5 草菇退化期间纤维二糖酶活力的变化 | 第62-63页 |
| 4.5 讨论 | 第63-64页 |
| 4.6 本章小结 | 第64-65页 |
| 第五章 草菇退化过程中相关酶的差异表达研究 | 第65-77页 |
| 5.1 实验材料、试剂与仪器设备 | 第65-66页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第65页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第65页 |
| 5.1.3 主要的实验仪器与设备 | 第65-66页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第66-70页 |
| 5.2.1 菌种活化 | 第67页 |
| 5.2.2 发酵培养 | 第67页 |
| 5.2.3 草菇菌丝体RNA的提取步骤 | 第67-68页 |
| 5.2.4 cDNA的合成 | 第68页 |
| 5.2.5 草菇β-葡萄糖苷酶和漆酶-1的基因的引物设计 | 第68-69页 |
| 5.2.6 标准曲线的制作 | 第69-70页 |
| 5.2.7 荧光定量PCR方法选择 | 第70页 |
| 5.2.8 退化草菇之间β-葡萄糖苷酶和漆酶-1表达的差异性分析 | 第70页 |
| 5.2.9 琼脂糖凝胶电泳 | 第70页 |
| 5.3 结果与分析 | 第70-74页 |
| 5.3.1 草菇总RNA的浓度与纯度检测 | 第70-72页 |
| 5.3.2 RT-PCR检测 | 第72-74页 |
| 5.3.2.1 基因引物溶解曲线与扩增效果分析 | 第72-73页 |
| 5.3.2.2 基因的扩增曲线分析 | 第73页 |
| 5.3.2.3 退化草菇β-葡萄糖苷酶表达量的差异性分析 | 第73-74页 |
| 5.3.2.4 退化草菇漆酶-1表达量的差异性分析 | 第74页 |
| 5.4 讨论 | 第74-75页 |
| 5.5 本章小结 | 第75-77页 |
| 第六章 总结与展望 | 第77-79页 |
| 6.1 全文总结 | 第77-78页 |
| 6.2 本研究的特色和创新点 | 第78页 |
| 6.3 展望 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-91页 |
| 附录 | 第91页 |
