摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第11-18页 |
1.1 引言 | 第11-12页 |
1.2 HMGB1在免疫疾病中的功能作用 | 第12-14页 |
1.2.1 HMGB1结构功能 | 第12页 |
1.2.2 HMGB1在脓毒症中的作用 | 第12-13页 |
1.2.3 HMGB1在T淋巴细胞免疫反应中的作用 | 第13-14页 |
1.3 p53与HMGB1的相互作用及临床应用价值 | 第14-17页 |
1.3.1 p53结构与功能 | 第14-15页 |
1.3.2 核内HMGB1与p53的相互作用 | 第15页 |
1.3.3 胞内HMGB1与p53相互作用机制 | 第15页 |
1.3.4 胞外分泌型HMGB1对p53的影响 | 第15-17页 |
1.4 小结 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-28页 |
2.1 实验器材 | 第18-20页 |
2.2 主要试剂配制 | 第20页 |
2.3 细胞培养及分组 | 第20-21页 |
2.4 CCK8法检测Jurkat细胞增殖能力 | 第21页 |
2.5 慢病毒转染及p53shRNA、p53mRNA稳定表达细胞株的建立 | 第21页 |
2.6 ELISA法检测细胞培养上清中IL-2、IL-4、IFN-γ浓度 | 第21-22页 |
2.7 SYBR Green Real-Time PCR(实时荧光定量PCR)反应检测各组Jurkat细胞p53、mdm2、p21基因表达 | 第22-24页 |
2.8 Western blot法检测P53、p-p53、bcl-2、bax、caspase-3、P38、ERK1/2、JNK蛋白水平 | 第24-26页 |
2.9 Annexin V-FITC法检测细胞凋亡 | 第26页 |
2.10 淋巴细胞核因子NFAT活性检测 | 第26-27页 |
2.11 统计学分析 | 第27-28页 |
第三章 实验结果 | 第28-46页 |
3.1 HMGB1对Jurkat细胞增殖的影响 | 第28-29页 |
3.2 HMGB1对p53表达的影响 | 第29-35页 |
3.2.1 HMGB1上调p53mRNA表达水平 | 第29-30页 |
3.2.2 HMGB1上调p53蛋白表达水平 | 第30-32页 |
3.2.3 p53下游因子表达的变化 | 第32-35页 |
3.3 p53介导HMGB1对细胞增殖的抑制作用 | 第35-37页 |
3.3.1 慢病毒转染干扰p53表达 | 第35-37页 |
3.3.2 干扰p53表达逆转HMGB1对细胞增殖的抑制作用 | 第37页 |
3.4 p53介导HMGB1诱导的T淋巴细胞凋亡 | 第37-40页 |
3.4.1 干扰p53表达抑制HMGB1引起的细胞凋亡 | 第37-38页 |
3.4.2 干扰p53表达影响凋亡相关因子表达水平 | 第38-40页 |
3.5 p53介导HMGB1对T细胞功能的影响 | 第40-41页 |
3.6 HMGB1诱导p53活化的可能机制 | 第41-46页 |
3.6.1 HMGB1对丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)通路的活化作用 | 第41-43页 |
3.6.2 p38介导HMGB1诱导的p53活化 | 第43-46页 |
第四章 实验讨论 | 第46-49页 |
第五章 实验结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
附录 | 第59-60页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |