| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 磁性纳米材料 | 第11-15页 |
| 1.1.1 磁性材料概述 | 第11页 |
| 1.1.2 磁性纳米材料的合成方法 | 第11-13页 |
| 1.1.3 磁性纳米材料的性质 | 第13-14页 |
| 1.1.4 磁性纳米材料的应用 | 第14-15页 |
| 1.2 蛋白质的分离纯化 | 第15-17页 |
| 1.2.1 依靠蛋白质自身性质分离纯化蛋白 | 第16页 |
| 1.2.2 重组蛋白质的纯化 | 第16-17页 |
| 1.3 固定化酶 | 第17-20页 |
| 1.3.1 固定化酶概述 | 第17页 |
| 1.3.2 固定化酶的方法 | 第17-18页 |
| 1.3.3 固定化酶载体 | 第18-20页 |
| 1.4 选题理由与意义 | 第20页 |
| 1.5 研究内容和技术路线 | 第20-23页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第20-22页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 单分散的功能化磁性纳米颗粒的合成 | 第23-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 相关试剂 | 第23页 |
| 2.1.2 相关仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 磁性纳米颗粒的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.1 Fe_3O_4纳米微球的合成 | 第24页 |
| 2.2.2 MPS修饰Fe_3O_4纳米微球 | 第24页 |
| 2.2.3 Fe_3O_4/PMG“核-壳”纳米颗粒的合成 | 第24页 |
| 2.2.4 Fe_3O_4/PMG/IDA-Ni~(2+)纳米颗粒的制备 | 第24-25页 |
| 2.3 表征方法 | 第25页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第25-29页 |
| 2.4.1 Fe_3O_4/PMG/IDA-Ni~(2+)纳米颗粒反应路线 | 第25-26页 |
| 2.4.2 功能化磁性纳米颗粒的表征结果 | 第26-29页 |
| 2.5 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 磁性纳米颗粒分离纯化CfGlu1B酶的研究 | 第30-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-32页 |
| 3.1.1 载体与菌种 | 第30页 |
| 3.1.2 相关试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.3 相关溶液配制 | 第31-32页 |
| 3.1.4 相关仪器 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-37页 |
| 3.2.1 His-CfGlu1B酶的诱导表达 | 第32页 |
| 3.2.2 His-CfGlu1B酶特异性结合Fe_3O_4/PMG/IDA-Ni~(2+)的验证 | 第32-33页 |
| 3.2.3 纯化蛋白 | 第33-34页 |
| 3.2.4 SDS-PAGE电泳检测 | 第34-35页 |
| 3.2.5 蛋白浓度测定 | 第35页 |
| 3.2.6 蛋白免疫印迹检测 | 第35-36页 |
| 3.2.7 酶活测定 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第37-41页 |
| 3.3.1 His-CfGlu1B酶的诱导表达 | 第37-38页 |
| 3.3.2 His-CfGlu1B酶特异性结合Fe_3O_4/PMG/IDA-Ni~(2+) | 第38-39页 |
| 3.3.3 His-CfGlu1B酶的纯化和蛋白免疫印迹检测 | 第39-40页 |
| 3.3.4 比较Fe_3O_4/PMG/IDA-Ni~(2+)与两种商业化纯化材料的纯化效率 | 第40-41页 |
| 3.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 磁性纳米颗粒对His-CfGlu1B酶活性改良的研究 | 第42-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-46页 |
| 4.2.1 磁性纳米颗粒与His-CfGlu1B酶间最佳固载条件的确定 | 第43-44页 |
| 4.2.2 pH和温度对酶活的影响 | 第44页 |
| 4.2.3 固定化对酶动力学参数的影响 | 第44-45页 |
| 4.2.4 载体与酶的结合稳定性 | 第45页 |
| 4.2.5 固定化对酶热稳定性的影响 | 第45-46页 |
| 4.2.6 固定化对酶重复利用的影响 | 第46页 |
| 4.2.7 Fe_3O_4/PMG/IDA?Ni~(2+)与其它类似结构的磁性纳米颗粒的比较 | 第46页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第46-53页 |
| 4.3.1 载体与His-CfGlu1B间最佳固载条件的确定 | 第46-48页 |
| 4.3.2 pH和温度对游离和固定化酶活性的影响 | 第48页 |
| 4.3.3 固定化未影响His-CfGlu1B酶的动力学参数 | 第48-49页 |
| 4.3.4 Fe_3O_4/PMG/IDA-Ni~(2+)与His-CfGlu1B酶结合稳定 | 第49-50页 |
| 4.3.5 固定化提高His-CfGlu1B酶的热稳定性 | 第50-51页 |
| 4.3.6 固定化增加酶的重复利用率 | 第51-52页 |
| 4.3.7 Fe_3O_4/PMG/IDA?Ni~(2+)与其它类似结构的磁性颗粒的比较结果 | 第52-53页 |
| 4.4 本章小结 | 第53-54页 |
| 第五章 结论与展望 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 在学期间的学术成果 | 第63页 |
