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条叶蓝芥HKT基因的生物功能研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 前言第10-16页
    1.1 土壤盐渍化第10-11页
    1.2 盐生植物第11-12页
    1.3 离子平衡对植物的影响第12-13页
    1.4 盐胁迫对植物生长的影响第13页
    1.5 钾和钠对植物生长的重要性第13-15页
    1.6 HKT转运蛋白第15页
    1.7 研究意义第15-16页
第二章 材料和方法第16-33页
    2.1 实验材料第16页
        2.1.1 植物材料第16页
        2.1.2 菌株材料第16页
    2.2 实验试剂第16-20页
        2.2.1 基因克隆所需的酶第16页
        2.2.2 实验试剂盒第16页
        2.2.3 培养基的配置第16-19页
        2.2.4 溶液的配置第19-20页
        2.2.5 实验仪器第20页
    2.3 实验方法第20-33页
        2.3.1 拟南芥总RNA的提取第20-21页
        2.3.2 RNA的逆转录第21页
        2.3.3 拟南芥基因组DNA的提取第21-22页
        2.3.4 PCR扩增体系及反应条件第22-24页
        2.3.5 植物叶片DNA粗提取第24页
        2.3.6 Gateway系统表达载体的构建第24-25页
        2.3.7 核酸电泳凝胶回收第25页
        2.3.8 PCR产物纯化第25-26页
        2.3.9 菌种保存及质粒提取第26页
        2.3.10 限制性内切酶酶切体系第26页
        2.3.11 大肠杆菌DH5α 感受态制备第26-27页
        2.3.12 质粒或连接产物转化大肠杆菌DH5α 及菌落PCR鉴定第27页
        2.3.13 阳性菌落的扩大培养第27页
        2.3.14 农杆菌GV3101感受态制备第27-28页
        2.3.15 农杆菌转化及菌落鉴定第28页
        2.3.16 农杆菌浸染拟南芥花絮及转基因植株鉴定筛选第28-29页
        2.3.17 杂交实验第29页
        2.3.18 酵母转化(醋酸锂法)及阳性菌落鉴定第29-30页
        2.3.19 酵母DNA的提取第30-31页
        2.3.20 酵母生长实验第31-32页
        2.3.21 共聚焦显微镜下观察TpHKT1;1 在拟南芥中的亚细胞定位第32页
        2.3.22 GUS染色法第32页
        2.3.23 TpHKT1;1 和TpHKT1;2 转化纯合植株表型实验第32页
        2.3.24 盐水浇灌实验第32-33页
第三章 结果第33-43页
    3.1 AtHKT1;1 基因克隆第33页
    3.2 将AtHKT1;1基因连接到表达载体第33-34页
    3.3 将含有AtHKT1;1基因的表达载体转化拟南芥第34-35页
        3.3.1 AtHKT1;1 转化植株T1代鉴定第34页
        3.3.2 AtHKT1;1 转化植株T2代鉴定第34页
        3.3.3 TpHKT1;1 转化植株T2代鉴定第34-35页
        3.3.4 AtHKT1;1 和TpHKT1;1 转化植株T3代鉴定第35页
    3.4 TpHKT1;1 和TpHKT1;2 的组织定位第35-36页
    3.5 TpHKT1;1 在拟南芥中的亚细胞定位第36-37页
    3.6 酵母生长实验第37-39页
    3.7 TpHKT1;1和TpHKT1;2基因转拟南芥植株表型分析第39-41页
        3.7.1 NaCl处理下种子萌发表型观察第39页
        3.7.2 NaCl处理下幼苗表型观察第39-40页
        3.7.3 LiCl处理下幼苗表型观察第40-41页
    3.8 盐水浇灌实验第41-43页
第四章 讨论第43-46页
    4.1 TpHKT1;1 的组织和亚细胞定位具有多样性第43-44页
    4.2 TpHKT1;1 和TpHKT1;2 具有转运Na+和Li+的活力第44页
    4.3 本研究取得的主要实验结果第44-46页
参考文献第46-49页
在学期间的研究成果第49-50页
致谢第50页

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