中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第10-16页 |
1.1 土壤盐渍化 | 第10-11页 |
1.2 盐生植物 | 第11-12页 |
1.3 离子平衡对植物的影响 | 第12-13页 |
1.4 盐胁迫对植物生长的影响 | 第13页 |
1.5 钾和钠对植物生长的重要性 | 第13-15页 |
1.6 HKT转运蛋白 | 第15页 |
1.7 研究意义 | 第15-16页 |
第二章 材料和方法 | 第16-33页 |
2.1 实验材料 | 第16页 |
2.1.1 植物材料 | 第16页 |
2.1.2 菌株材料 | 第16页 |
2.2 实验试剂 | 第16-20页 |
2.2.1 基因克隆所需的酶 | 第16页 |
2.2.2 实验试剂盒 | 第16页 |
2.2.3 培养基的配置 | 第16-19页 |
2.2.4 溶液的配置 | 第19-20页 |
2.2.5 实验仪器 | 第20页 |
2.3 实验方法 | 第20-33页 |
2.3.1 拟南芥总RNA的提取 | 第20-21页 |
2.3.2 RNA的逆转录 | 第21页 |
2.3.3 拟南芥基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
2.3.4 PCR扩增体系及反应条件 | 第22-24页 |
2.3.5 植物叶片DNA粗提取 | 第24页 |
2.3.6 Gateway系统表达载体的构建 | 第24-25页 |
2.3.7 核酸电泳凝胶回收 | 第25页 |
2.3.8 PCR产物纯化 | 第25-26页 |
2.3.9 菌种保存及质粒提取 | 第26页 |
2.3.10 限制性内切酶酶切体系 | 第26页 |
2.3.11 大肠杆菌DH5α 感受态制备 | 第26-27页 |
2.3.12 质粒或连接产物转化大肠杆菌DH5α 及菌落PCR鉴定 | 第27页 |
2.3.13 阳性菌落的扩大培养 | 第27页 |
2.3.14 农杆菌GV3101感受态制备 | 第27-28页 |
2.3.15 农杆菌转化及菌落鉴定 | 第28页 |
2.3.16 农杆菌浸染拟南芥花絮及转基因植株鉴定筛选 | 第28-29页 |
2.3.17 杂交实验 | 第29页 |
2.3.18 酵母转化(醋酸锂法)及阳性菌落鉴定 | 第29-30页 |
2.3.19 酵母DNA的提取 | 第30-31页 |
2.3.20 酵母生长实验 | 第31-32页 |
2.3.21 共聚焦显微镜下观察TpHKT1;1 在拟南芥中的亚细胞定位 | 第32页 |
2.3.22 GUS染色法 | 第32页 |
2.3.23 TpHKT1;1 和TpHKT1;2 转化纯合植株表型实验 | 第32页 |
2.3.24 盐水浇灌实验 | 第32-33页 |
第三章 结果 | 第33-43页 |
3.1 AtHKT1;1 基因克隆 | 第33页 |
3.2 将AtHKT1;1基因连接到表达载体 | 第33-34页 |
3.3 将含有AtHKT1;1基因的表达载体转化拟南芥 | 第34-35页 |
3.3.1 AtHKT1;1 转化植株T1代鉴定 | 第34页 |
3.3.2 AtHKT1;1 转化植株T2代鉴定 | 第34页 |
3.3.3 TpHKT1;1 转化植株T2代鉴定 | 第34-35页 |
3.3.4 AtHKT1;1 和TpHKT1;1 转化植株T3代鉴定 | 第35页 |
3.4 TpHKT1;1 和TpHKT1;2 的组织定位 | 第35-36页 |
3.5 TpHKT1;1 在拟南芥中的亚细胞定位 | 第36-37页 |
3.6 酵母生长实验 | 第37-39页 |
3.7 TpHKT1;1和TpHKT1;2基因转拟南芥植株表型分析 | 第39-41页 |
3.7.1 NaCl处理下种子萌发表型观察 | 第39页 |
3.7.2 NaCl处理下幼苗表型观察 | 第39-40页 |
3.7.3 LiCl处理下幼苗表型观察 | 第40-41页 |
3.8 盐水浇灌实验 | 第41-43页 |
第四章 讨论 | 第43-46页 |
4.1 TpHKT1;1 的组织和亚细胞定位具有多样性 | 第43-44页 |
4.2 TpHKT1;1 和TpHKT1;2 具有转运Na+和Li+的活力 | 第44页 |
4.3 本研究取得的主要实验结果 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
在学期间的研究成果 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |