摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
英文缩略词 | 第10-14页 |
第一章 前言 | 第14-18页 |
第二章 RASGRP3在食管癌细胞、组织中的分布及与组织血管的关系 | 第18-34页 |
2.1 主要实验材料 | 第18-21页 |
2.1.1 组织和细胞 | 第18页 |
2.1.2 主要试剂和材料 | 第18-20页 |
2.1.3 主要仪器和设备 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-27页 |
2.2.1 食管癌细胞的培养 | 第21-22页 |
2.2.2 免疫组织化学染色 | 第22-23页 |
2.2.3 Western blot | 第23-24页 |
2.2.4 CCK8实验 | 第24-25页 |
2.2.5 细胞凋亡实验 | 第25页 |
2.2.6 转染实验 | 第25-26页 |
2.2.7 免疫组化与免疫荧光共定位 | 第26页 |
2.2.8 统计分析 | 第26-27页 |
2.3 结果 | 第27-31页 |
2.3.1 RasGRP3与TE-1 细胞营养状况的关系及对细胞功能的影响 | 第27-29页 |
2.3.2 RasGRP3在食管癌患者组织中的表达及与肿瘤微血管密度的关系 | 第29-31页 |
2.4 讨论 | 第31-34页 |
第三章 RASGRP3与食管癌细胞血管生成的关系 | 第34-42页 |
3.1 主要实验材料 | 第34页 |
3.1.1 细胞 | 第34页 |
3.1.2 主要试剂和材料 | 第34页 |
3.2 实验方法 | 第34-38页 |
3.2.1 人脐静脉内皮细胞的培养 | 第34-35页 |
3.2.2 总RNA的提取 | 第35页 |
3.2.3 逆转录cDNA | 第35-36页 |
3.2.4 荧光定量PCR | 第36-37页 |
3.2.5 ELISA实验 | 第37页 |
3.2.6 Transwell共培养实验 | 第37页 |
3.2.7 统计学分析 | 第37-38页 |
3.3 结果 | 第38-39页 |
3.3.1 营养缺乏调节RasGRP3参与VEGF-A的表达 | 第38页 |
3.3.2 营养缺乏条件下RasGRP3表达促进HUVEC-C细胞管腔形成 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-42页 |
第四章 RASGRP3促进EMT及转移的相关分子机制 | 第42-51页 |
4.1 材料 | 第42页 |
4.1.1 主要试剂 | 第42页 |
4.1.2 主要仪器设备与耗材 | 第42页 |
4.2 实验方法 | 第42-45页 |
4.2.1 划痕实验 | 第42-43页 |
4.2.2 Transwell迁移实验 | 第43页 |
4.2.3 Transwell浸润实验 | 第43页 |
4.2.4 荧光定量PCR | 第43-44页 |
4.2.5 免疫荧光 | 第44页 |
4.2.6 统计学分析 | 第44-45页 |
4.3 结果 | 第45-48页 |
4.3.1 RasGRP3促进EMT发生 | 第45-47页 |
4.3.2 RasGRP3促进肿瘤细胞转移 | 第47-48页 |
4.4 讨论 | 第48-51页 |
第五章 RASGRP3与食管鳞癌病人临床病理及预后的联系 | 第51-56页 |
5.1 主要实验材料 | 第51页 |
5.1.1 组织 | 第51页 |
5.1.2 主要试剂 | 第51页 |
5.1.3 主要仪器与设备 | 第51页 |
5.2 实验方法 | 第51-52页 |
5.2.1 随访 | 第51-52页 |
5.2.2 统计学分析 | 第52页 |
5.3 结果 | 第52-54页 |
5.3.1 RasGRP3与食管癌组织临床病理特征的联系 | 第52-53页 |
5.3.2 RasGRP3与食管癌病人术后转移及预后的联系 | 第53-54页 |
5.4 讨论 | 第54-56页 |
第六章 结论与展望 | 第56-57页 |
6.1 主要结论 | 第56页 |
6.2 展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |