致谢 | 第4-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-17页 |
1 引言 | 第10页 |
2 展青霉素的特性、危害及污染现状 | 第10-12页 |
2.1 展青霉素的理化特性 | 第10-11页 |
2.2 展青霉素的危害 | 第11页 |
2.3 展青霉素的污染现状 | 第11-12页 |
3 展青霉素治理措施 | 第12页 |
3.1 物理脱除 | 第12页 |
3.2 化学脱除 | 第12页 |
3.3 生物脱除 | 第12页 |
4 展青霉素残留的检测方法概况 | 第12-15页 |
4.1 高效液相色谱技术 | 第13页 |
4.2 高效液相色谱—质谱联用技术 | 第13-14页 |
4.3 气相色谱—质谱联用技术 | 第14页 |
4.4 免疫分析技术 | 第14-15页 |
5 本研究的目的及意义 | 第15页 |
6 本研究的主要内容及技术路线 | 第15-17页 |
6.1 主要内容 | 第15页 |
6.2 技术路线 | 第15-17页 |
第二章 展青霉素人工抗原的合成与鉴定 | 第17-26页 |
1 实验材料 | 第17-18页 |
1.1 试剂 | 第17页 |
1.2 主要仪器 | 第17-18页 |
1.3 实验动物 | 第18页 |
2 实验方法 | 第18-21页 |
2.1 主要溶液配制 | 第18-19页 |
2.2 人工抗原的合成 | 第19-20页 |
2.3 人工抗原的鉴定 | 第20-21页 |
3 结果与分析 | 第21-24页 |
3.1 紫外扫描鉴定结果 | 第21-22页 |
3.2 SDS-PAGE凝胶电泳鉴定结果 | 第22页 |
3.3 动物免疫试验结果 | 第22-24页 |
4 讨论 | 第24-25页 |
4.1 人工抗原合成方法的选择 | 第24页 |
4.2 偶联蛋白的选择 | 第24页 |
4.3 关于最佳偶联率 | 第24页 |
4.4 人工抗原鉴定方法的选择 | 第24-25页 |
5 本章小结 | 第25-26页 |
第三章 展青霉素单克隆抗体的制备与鉴定 | 第26-35页 |
1 实验材料 | 第26-27页 |
1.1 试剂 | 第26页 |
1.2 实验仪器 | 第26页 |
1.3 实验动物及细胞 | 第26-27页 |
2 实验方法 | 第27-30页 |
2.1 主要试剂配制 | 第27页 |
2.2 杂交瘤细胞株的建立 | 第27-29页 |
2.3 展青霉素单克隆抗体的生产 | 第29-30页 |
2.4 展青霉素单克隆抗体的免疫学特性鉴定 | 第30页 |
3 结果与分析 | 第30-32页 |
3.1 杂交瘤细胞株的建立 | 第30-31页 |
3.2 展青霉素单克隆抗体免疫学特性鉴定结果 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
4.1 关于实验动物的选择 | 第32页 |
4.2 关于脾细胞和饲养细胞的制备 | 第32-33页 |
4.3 关于杂交瘤细胞的建立 | 第33页 |
4.4 关于杂交瘤细胞的筛选 | 第33页 |
4.5 关于杂交瘤细胞的克隆化 | 第33-34页 |
4.6 关于单克隆抗体的纯化 | 第34页 |
5 本章小结 | 第34-35页 |
第四章 展青霉素快速检测试剂盒的研制 | 第35-42页 |
1 仪器和试剂 | 第35页 |
2 实验方法 | 第35-37页 |
2.1 展青霉素间接竞争ELISA检测试剂盒的建立 | 第35-36页 |
2.2 展青霉素快速检测试剂盒性能测定 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-40页 |
3.1 PAT-OVA最佳包被浓度和anti-PAT最佳工作浓度的确定 | 第37-38页 |
3.2 间接竞争ELISA方法反应体系的确定及标准曲线的绘制 | 第38页 |
3.3 敏感性、灵敏度及检测限确定 | 第38页 |
3.4 准确度测定 | 第38-39页 |
3.5 精密度鉴定 | 第39页 |
3.6 稳定性鉴定 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40页 |
4.1 展青霉素间接竞争ELISA试剂盒的制备 | 第40页 |
4.2 关于样品的前处理 | 第40页 |
4.3 关于试剂盒质量特性 | 第40页 |
5 本章小结 | 第40-42页 |
第五章 展青霉素快速检测免疫胶体金试纸条的研制 | 第42-48页 |
1 实验材料 | 第42-43页 |
1.1 试剂 | 第42页 |
1.2 仪器 | 第42-43页 |
2 实验方法 | 第43-45页 |
2.1 胶体金的制备 | 第43页 |
2.2 金标抗体的制备 | 第43页 |
2.3 展青霉素快速检测胶体金试纸条的制备 | 第43-44页 |
2.4 展青霉素残留快速检测胶体金试纸条的使用方法及原理 | 第44页 |
2.5 样品的前处理 | 第44页 |
2.6 试纸条性能的测定 | 第44-45页 |
3 结果与分析 | 第45-46页 |
3.1 最适抗体标记量的确定 | 第45页 |
3.2 敏感性鉴定及检测结果判读 | 第45页 |
3.3 重复性鉴定 | 第45-46页 |
3.4 准确性鉴定 | 第46页 |
3.5 稳定性鉴定 | 第46页 |
4 讨论 | 第46-47页 |
4.1 关于胶体金溶液pH的调整 | 第46-47页 |
4.2 关于NC膜、样品垫和结合垫的选择 | 第47页 |
4.3 关于样品垫和结合垫的处理 | 第47页 |
5 本章小结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
ABSTRACT | 第53-54页 |