摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-21页 |
1.1 概述 | 第12页 |
1.2 苹果斑点落叶病 | 第12-15页 |
1.2.1 发病特点 | 第12页 |
1.2.2 致病机理 | 第12-13页 |
1.2.3 侵染条件 | 第13-14页 |
1.2.4 苹果斑点落叶病的抗性研究 | 第14-15页 |
1.3 MAL D 1 基因的研究进展 | 第15-16页 |
1.4 果树抗病相关研究进展 | 第16-18页 |
1.4.1 果树抗病反应 | 第16-17页 |
1.4.2 果树抗病基因 | 第17-18页 |
1.5 苹果转基因技术的研究进展 | 第18-20页 |
1.6 研究目的和意义 | 第20-21页 |
第二章 抗苹果斑点落叶病基因MAL D 1 的克隆及表达分析 | 第21-31页 |
2.1 材料与方法 | 第21-23页 |
2.1.1 供试材料 | 第21页 |
2.1.2 生物信息学分析 | 第21页 |
2.1.3 叶片侵染 | 第21-22页 |
2.1.4 RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第22页 |
2.1.5 基因克隆 | 第22页 |
2.1.6 表达分析 | 第22-23页 |
2.1.7 过表达载体的构建 | 第23页 |
2.1.8 转基因愈伤组织的获得和抗病性鉴定 | 第23页 |
2.2 结果与分析 | 第23-29页 |
2.2.1 苹果Mal d 1 基因克隆与序列分析 | 第23-24页 |
2.2.2 Mal d 1 蛋白系统进化树分析 | 第24页 |
2.2.3 苹果叶片经病原菌侵染后Mal d 1 表达分析 | 第24-25页 |
2.2.4 不同品种苹果叶片中Mal d 1 的表达分析 | 第25页 |
2.2.5 Mal d 1 基因时空表达分析 | 第25-26页 |
2.2.6 转基因愈伤组织抗病性鉴定 | 第26-29页 |
2.3 讨论 | 第29-31页 |
第三章 苹果MAL D 1 基因的原核表达及纯化 | 第31-38页 |
3.1 材料与方法 | 第31-32页 |
3.1.1 供试材料 | 第31页 |
3.1.2 生物信息学分析 | 第31页 |
3.1.3 苹果Mal d 1 基因的扩增 | 第31页 |
3.1.4 原核表达载体的构建 | 第31页 |
3.1.5 融合蛋白的诱导表达 | 第31-32页 |
3.1.6 融合蛋白的可溶性分析 | 第32页 |
3.1.7 融合蛋白的纯化 | 第32页 |
3.2 结果与分析 | 第32-36页 |
3.2.1 Mal d 1 基因片段的扩增 | 第32-33页 |
3.2.2 Mal d 1 蛋白序列分析及三维结构预测 | 第33-34页 |
3.2.3 原核表达载体的构建与鉴定 | 第34页 |
3.2.4 融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第34-36页 |
3.3 讨论 | 第36-38页 |
第四章 全文结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
作者简历 | 第47页 |