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苹果斑点落叶病抗病基因Mal d 1的克隆及功能分析

摘要第6-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-21页
    1.1 概述第12页
    1.2 苹果斑点落叶病第12-15页
        1.2.1 发病特点第12页
        1.2.2 致病机理第12-13页
        1.2.3 侵染条件第13-14页
        1.2.4 苹果斑点落叶病的抗性研究第14-15页
    1.3 MAL D 1 基因的研究进展第15-16页
    1.4 果树抗病相关研究进展第16-18页
        1.4.1 果树抗病反应第16-17页
        1.4.2 果树抗病基因第17-18页
    1.5 苹果转基因技术的研究进展第18-20页
    1.6 研究目的和意义第20-21页
第二章 抗苹果斑点落叶病基因MAL D 1 的克隆及表达分析第21-31页
    2.1 材料与方法第21-23页
        2.1.1 供试材料第21页
        2.1.2 生物信息学分析第21页
        2.1.3 叶片侵染第21-22页
        2.1.4 RNA的提取及cDNA第一链的合成第22页
        2.1.5 基因克隆第22页
        2.1.6 表达分析第22-23页
        2.1.7 过表达载体的构建第23页
        2.1.8 转基因愈伤组织的获得和抗病性鉴定第23页
    2.2 结果与分析第23-29页
        2.2.1 苹果Mal d 1 基因克隆与序列分析第23-24页
        2.2.2 Mal d 1 蛋白系统进化树分析第24页
        2.2.3 苹果叶片经病原菌侵染后Mal d 1 表达分析第24-25页
        2.2.4 不同品种苹果叶片中Mal d 1 的表达分析第25页
        2.2.5 Mal d 1 基因时空表达分析第25-26页
        2.2.6 转基因愈伤组织抗病性鉴定第26-29页
    2.3 讨论第29-31页
第三章 苹果MAL D 1 基因的原核表达及纯化第31-38页
    3.1 材料与方法第31-32页
        3.1.1 供试材料第31页
        3.1.2 生物信息学分析第31页
        3.1.3 苹果Mal d 1 基因的扩增第31页
        3.1.4 原核表达载体的构建第31页
        3.1.5 融合蛋白的诱导表达第31-32页
        3.1.6 融合蛋白的可溶性分析第32页
        3.1.7 融合蛋白的纯化第32页
    3.2 结果与分析第32-36页
        3.2.1 Mal d 1 基因片段的扩增第32-33页
        3.2.2 Mal d 1 蛋白序列分析及三维结构预测第33-34页
        3.2.3 原核表达载体的构建与鉴定第34页
        3.2.4 融合蛋白的诱导表达及纯化第34-36页
    3.3 讨论第36-38页
第四章 全文结论第38-39页
参考文献第39-46页
致谢第46-47页
作者简历第47页

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