中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
中英文缩略词表 | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第11-24页 |
1.1 多环芳烃的微生物降解 | 第11-16页 |
1.1.1 降解多环芳烃的微生物 | 第11-13页 |
1.1.2 微生物多环芳烃降解的遗传学基础 | 第13-16页 |
1.2 假单胞菌中多环芳烃降解途径 | 第16-18页 |
1.2.1 假单胞菌萘降解途径 | 第16-17页 |
1.2.2 假单胞菌菲降解途径 | 第17-18页 |
1.3 影响铜绿假单胞菌降解多环芳烃的主要因素 | 第18-19页 |
1.3.1 多环芳烃的生物可利用性 | 第18-19页 |
1.3.2 铜绿假单胞菌分泌的促降解物质 | 第19页 |
1.3.3 铜绿假单胞菌的主动外排机制 | 第19页 |
1.3.4 其他影响因素 | 第19页 |
1.4 铜绿假单胞菌的外排系统 | 第19-21页 |
1.4.1 铜绿假单胞菌的外排系统分类 | 第20页 |
1.4.2 铜绿假单胞菌的外排系统特点 | 第20页 |
1.4.3 铜绿假单胞菌的外排系统与多环芳烃降解 | 第20-21页 |
1.5 主要易化子超家族 | 第21-22页 |
1.5.1 主要易化子超家族蛋白质三维结构 | 第21-22页 |
1.5.2 主要易化子超家族蛋白质转运机制的研究 | 第22页 |
1.5.3 主要易化子超家族蛋白质研究前景展望 | 第22页 |
1.6 研究内容及意义 | 第22-24页 |
第二章 实验材料和方法 | 第24-39页 |
2.1 实验材料 | 第24-30页 |
2.1.1 菌株、质粒和引物 | 第24-26页 |
2.1.2 培养基及溶液 | 第26-27页 |
2.1.3 抗生素 | 第27-29页 |
2.1.4 实验试剂 | 第29-30页 |
2.1.5 实验仪器 | 第30页 |
2.2 实验方法 | 第30-39页 |
2.2.1 质粒DNA小量提取 | 第30页 |
2.2.2 琼脂糖凝胶DNA片段纯化回收 | 第30-31页 |
2.2.3 大肠杆菌(DH10B)感受态细胞的制备 | 第31页 |
2.2.4 铜绿假单胞菌(PAO1)感受态细胞的制备 | 第31页 |
2.2.5 聚合酶链式反应 | 第31-32页 |
2.2.6 酶切及连接反应 | 第32-33页 |
2.2.7 电转化 | 第33页 |
2.2.8 高效液相法测定降解效率 | 第33页 |
2.2.9 细菌菌落计数法 | 第33页 |
2.2.10 转座突变体库筛选 | 第33-34页 |
2.2.11 随机PCR | 第34-35页 |
2.2.12 确定转座子插入位点 | 第35页 |
2.2.13 基因互补 | 第35页 |
2.2.14 基因敲除 | 第35-36页 |
2.2.15 抗生素敏感性测定 | 第36页 |
2.2.16 最小抑制浓度测定 | 第36页 |
2.2.17 细菌运动性测定 | 第36-37页 |
2.2.18 生物被膜产量测定 | 第37页 |
2.2.19 不同碳源上生长情况测定 | 第37页 |
2.2.20 压力耐受性实验 | 第37页 |
2.2.21 外膜稳定性测定 | 第37-39页 |
第三章 实验结果 | 第39-56页 |
3.1 高效液相分析铜绿假单胞菌PAO1对于菲萘的降解效率 | 第39-40页 |
3.1.1 高效液相分析铜绿假单胞菌PAO1对于萘的降解效率 | 第39页 |
3.1.2 高效液相分析铜绿假单胞菌PAO1对于菲的降解效率 | 第39-40页 |
3.2 转座突变体库的筛选 | 第40-42页 |
3.2.1 转座突变体库的筛选结果 | 第40-41页 |
3.2.2 转座突变体中转座子的插入位置的确定 | 第41-42页 |
3.2.3 转座子插入区域的基本信息 | 第42页 |
3.3 操纵子PA 0334-0335的相关研究 | 第42-47页 |
3.3.1 PA0334基因以及PA0334-0335操纵子的互补 | 第42-44页 |
3.3.2 PA0335基因过表达 | 第44-45页 |
3.3.3 PA0334-0335基因敲除 | 第45-47页 |
3.4 PA0334-0335功能研究 | 第47-56页 |
3.4.1 生物信息学分析 | 第47-48页 |
3.4.2 正常条件下的生长分析 | 第48-49页 |
3.4.3 碳源限制环境下的生长分析 | 第49-50页 |
3.4.4 抗生素的敏感性分析 | 第50-51页 |
3.4.5 外膜的完整性和稳定性分析 | 第51-52页 |
3.4.6 压力耐受性分析 | 第52页 |
3.4.7 菌落形态和细菌形态 | 第52-53页 |
3.4.8 生物被膜产量 | 第53-54页 |
3.4.9 运动性分析 | 第54-56页 |
第四章 讨论与结论 | 第56-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
硕士期间科研成果 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |