| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-23页 |
| ·烟草黑胫病研究进展 | 第13-17页 |
| ·烟草黑胫病简介 | 第13页 |
| ·烟草黑胫病菌研究概况 | 第13-16页 |
| ·烟草感黑胫病的症状 | 第16页 |
| ·植物对黑胫病抗性的研究 | 第16-17页 |
| ·差减杂交技术（SSH）和反向 Northern 技术简介 | 第17-21页 |
| ·SSH 技术的基本原理 | 第17页 |
| ·SSH 的主要技术流程 | 第17-18页 |
| ·SSH 技术的优、缺点 | 第18-19页 |
| ·反向Northern 杂交技术概述 | 第19-20页 |
| ·SSH 与反向Northern 杂交技术结合的特点 | 第20页 |
| ·SSH 与反向Northern 杂交技术在植物抗逆性研究中的应用 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的、意义、主要内容和技术路线 | 第21-23页 |
| ·研究目的 | 第21页 |
| ·研究意义 | 第21-22页 |
| ·主要内容 | 第22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第23-36页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·供试材料 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23-24页 |
| ·实验仪器 | 第24-25页 |
| ·实验设计与方法 | 第25-26页 |
| ·培养基和光照对菌丝生长影响的试验 | 第25页 |
| ·培养基和菌龄对孢子囊数量的影响试验 | 第25页 |
| ·显微镜观察病原菌的组织结构 | 第25页 |
| ·诱导剂和诱导时间对孢子囊和游动孢子数量的影响试验 | 第25页 |
| ·烟苗处理 | 第25-26页 |
| ·总RNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·操作步骤 | 第26页 |
| ·RNA 检测 | 第26-27页 |
| ·mRNA 分离纯化 | 第27-28页 |
| ·操作步骤 | 第27-28页 |
| ·cDNA 合成 | 第28-29页 |
| ·The 1st strand cDNA 合成反应 | 第28页 |
| ·The 2nd strand cDNA 合成反应 | 第28-29页 |
| ·差减杂交 | 第29-32页 |
| ·cDNA 双链Rsa I 酶切 | 第29页 |
| ·Adaptor 1、Adaptor 2R 接头连接 | 第29-30页 |
| ·接头连接效率检测 | 第30-31页 |
| ·一次差减杂交 | 第31页 |
| ·二次差减杂交 | 第31页 |
| ·差减后PCR 扩增 | 第31-32页 |
| ·二次PCR 产物的纯化 | 第32页 |
| ·构建消减文库 | 第32-33页 |
| ·插入片段的检测 | 第33页 |
| ·反向 Northern 斑点杂交 | 第33-36页 |
| ·DIG 探针的制备 | 第33页 |
| ·探针标记效率检测及探针浓度的估计 | 第33-34页 |
| ·显影定影 | 第34页 |
| ·斑点杂交 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-45页 |
| ·黑胫病病菌0 号生理小种在不同条件下的培养特性 | 第36-38页 |
| ·菌丝菌落及形态特征 | 第36页 |
| ·菌丝生长与培养基和光照的关系 | 第36-37页 |
| ·各培养基上不同光照处理病菌的产孢量 | 第37页 |
| ·菌龄和产孢量的关系 | 第37页 |
| ·不同菌龄的菌丝产孢量和游动孢子释放量与诱导剂和诱导时间的关系 | 第37-38页 |
| ·总 RNA 与 mRNA 的分析 | 第38-39页 |
| ·差减杂交结果分析 | 第39-41页 |
| ·双链cDNA 及酶切效果检测 | 第39页 |
| ·接头效率分析 | 第39页 |
| ·两次PCR 扩增分析 | 第39-40页 |
| ·二次PCR 回收 | 第40-41页 |
| ·cDNA 文库检测 | 第41页 |
| ·探针浓度的计算 | 第41页 |
| ·反向 Northern 斑点杂交筛选 | 第41-42页 |
| ·差异基因测序及分析 | 第42-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-48页 |
| ·材料体系的选择 | 第45页 |
| ·黑胫病病菌0 号生理小种培养特性的研究 | 第45-46页 |
| ·SSH 文库在抗病差异表达基因研究的优势和不足 | 第46页 |
| ·黑胫病菌诱导的抗性分析 | 第46-48页 |
| 第五章 结论与展望 | 第48-49页 |
| ·结论 | 第48页 |
| ·主要创新点 | 第48页 |
| ·工作展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55页 |
