| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 猪乙型脑炎病毒 | 第11-16页 |
| 1.1 猪乙型脑炎研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 猪乙型脑炎病毒分子生物学 | 第12-14页 |
| 1.3 猪流行性乙型脑炎病毒的复制 | 第14-15页 |
| 1.4 猪乙型脑炎诊断 | 第15-16页 |
| 2 乙脑的疫苗研究进展 | 第16-17页 |
| 3 亲环素A研究进展 | 第17-21页 |
| 3.1 亲环素A的结构与生物学功能 | 第17-19页 |
| 3.2 亲环素A在病毒感染中的作用 | 第19-21页 |
| 目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二部分 实验部分 | 第23-53页 |
| 第一章 猪亲环素A真核表达载体的构建和猪流行性乙型脑炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第23-37页 |
| 1 材料与试剂 | 第23-24页 |
| 1.1 实验试剂 | 第23-24页 |
| 1.2 菌株与细胞 | 第24页 |
| 1.3 实验仪器 | 第24页 |
| 2 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.1 引物设计 | 第25页 |
| 2.2 pET30-CypA重组质粒的提取 | 第25-26页 |
| 2.3 猪CypA基因的扩增 | 第26页 |
| 2.4 CypA基因PCR产物的TA克隆 | 第26-28页 |
| 2.5 重组质粒的初步鉴定 | 第28-29页 |
| 2.6 猪CypA真核表达载体pcDNA3.1-CypA的构建 | 第29-30页 |
| 2.7 猪乙型脑炎病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第30-32页 |
| 3 实验结果 | 第32-35页 |
| 3.1 猪CypA基因PCR扩增 | 第32-33页 |
| 3.2 猪CypA真核表达载体构建结果 | 第33页 |
| 3.3 JEV荧光定量检测方法 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 4.1 猪亲环素A真核表达载体的构建 | 第35页 |
| 4.2 猪流行性乙型脑炎病毒RT-PCR检测方法的建立 | 第35-37页 |
| 第二章 亲环素A对猪乙型脑炎病毒复制的影响 | 第37-53页 |
| 1 实验材料 | 第37-39页 |
| 1.1 实验试剂 | 第37-38页 |
| 1.2 菌株与细胞 | 第38-39页 |
| 1.3 实验仪器 | 第39页 |
| 2 实验方法 | 第39-45页 |
| 2.1 pET30-CypA原核表达菌的鉴定 | 第39页 |
| 2.2 pET30-CypA原核表达菌的大量表达与纯化 | 第39-41页 |
| 2.3 猪CypA蛋白的透析和浓缩 | 第41页 |
| 2.4 猪CypA蛋白浓度与纯度检测 | 第41页 |
| 2.5 猪CypA蛋白对JEV复制的影响 | 第41-42页 |
| 2.6 pcDNA3.1-CypA转染BHK-21细胞 | 第42-43页 |
| 2.7 表达产物的Western-blot法鉴定 | 第43-44页 |
| 2.8 真核表达CypA蛋白对JEV病毒复制的影响 | 第44页 |
| 2.9 荧光定量RT-PCR检测不同样品中JEV含量 | 第44-45页 |
| 3 实验结果 | 第45-50页 |
| 3.1 猪CypA蛋白纯化与透析 | 第45页 |
| 3.2 猪CypA蛋白浓度与纯度检测 | 第45-46页 |
| 3.3 pcDNA3.1-CypA转染BHK-21细胞 | 第46页 |
| 3.4 不同样品中病毒总RNA的提取 | 第46-47页 |
| 3.5 猪CypA蛋白原核表达对JEV复制的影响 | 第47-49页 |
| 3.6 猪CypA蛋白真核表达表达对JEV一步生长曲线的影响 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 4.1 关于JEV一步生长曲线的测定 | 第50-51页 |
| 4.2 关于猪CypA对JEV体外复制影响的研究 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第73页 |
