摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第13-24页 |
第一章 精脒对SW620细胞增殖的影响 | 第24-29页 |
1.1 实验材料 | 第24-25页 |
1.1.1 细胞株 | 第24页 |
1.1.2 试剂 | 第24页 |
1.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
1.1.4 试剂配制 | 第25页 |
1.2 实验方法 | 第25-27页 |
1.2.1 细胞培养 | 第25-26页 |
1.2.2 MTT法测精脒对SW620细胞生长的影响 | 第26-27页 |
1.2.3 统计方法处理 | 第27页 |
1.3 实验结果 | 第27-28页 |
1.4 讨论 | 第28-29页 |
第二章 精脒对SW620细胞糖酵解的影响 | 第29-48页 |
2.1 实验材料 | 第29-32页 |
2.1.1 试剂 | 第29-30页 |
2.1.2 主要仪器 | 第30-31页 |
2.1.3 试剂配制 | 第31-32页 |
2.2 实验方法 | 第32-38页 |
2.2.1 检测SW620细胞葡萄糖消耗量 | 第32-33页 |
2.2.2 检测SW620胞内乳酸脱氢酶的活性和胞外乳酸的生成量 | 第33-34页 |
2.2.3 ATP测定试剂盒检测SW620细胞内ATP含量 | 第34-35页 |
2.2.4 Western Blot法检测HIF-1a、Glut1、LDHA蛋白表达 | 第35-38页 |
2.2.5 统计方法处理 | 第38页 |
2.3 结果 | 第38-46页 |
2.3.1 精脒对SW620细胞葡萄糖消耗量的影响 | 第38-40页 |
2.3.2 精脒对SW620乳酸脱氢酶活性以及乳酸生成量的影响 | 第40-42页 |
2.3.3 精脒对SW620内ATP水平的影响 | 第42-44页 |
2.3.4 精脒对SW620细胞内HIF-1a、Glut1以及LDHA蛋白表达的影响 | 第44-46页 |
2.4 讨论 | 第46-48页 |
第三章 缺氧条件下精脒对SW620细胞糖酵解的影响 | 第48-56页 |
3.1 实验材料 | 第48页 |
3.2 实验方法 | 第48-49页 |
3.2.1 细胞分组和处理 | 第48页 |
3.2.2 SW620细胞糖酵解水平检测 | 第48-49页 |
3.2.3 统计方法处理 | 第49页 |
3.3 实验结果 | 第49-54页 |
3.3.1 缺氧条件下精脒对SW620细胞葡萄糖消耗量的影响 | 第49-50页 |
3.3.2 缺氧条件下精脒对SW620细胞乳酸脱氢酶的活性以及乳酸生成量的影响 | 第50-51页 |
3.3.3 缺氧条件下精脒对SW620细胞内ATP水平的影响 | 第51-52页 |
3.3.4 缺氧条件下精脒对SW620细胞HIF-1a、Glut1、LDHA蛋白表达水平的影响 | 第52-54页 |
3.4 讨论 | 第54-56页 |
第四章 精脒通过HIF-1 通路促进SW620细胞糖酵解的探究 | 第56-71页 |
4.1 实验材料 | 第56-58页 |
4.1.1 试剂 | 第56-57页 |
4.1.2 主要仪器 | 第57-58页 |
4.1.3 试剂配制 | 第58页 |
4.2 实验方法 | 第58-61页 |
4.2.1 细胞分组 | 第58页 |
4.2.2 HIF-1a-siRNA的设计与合成 | 第58-59页 |
4.2.3 si RNA HIF-1a转染SW620细胞 | 第59页 |
4.2.4 Real-time PCR反应检测HIF-1a-si RNA转染效率 | 第59-61页 |
4.2.5 检测精脒对HIF-1a表达沉默后的SW620细胞糖酵解的影响 | 第61页 |
4.2.6 统计方法处理 | 第61页 |
4.3 结果 | 第61-69页 |
4.3.1 HIF-1a-si RNA转染效率mRNA水平分析 | 第61-63页 |
4.3.2 精脒对HIF-1a表达沉默后的SW620细胞葡糖糖消耗量影响 | 第63页 |
4.3.3 精脒对HIF-1a表达沉默后的SW620细胞内乳酸脱氢酶的活性以及乳酸生成量的影响 | 第63-65页 |
4.3.4 精脒对HIF-1a表达沉默后的SW620细胞ATP含量的影响 | 第65-66页 |
4.3.5 精脒对HIF-1a表达沉默后的SW620细胞内HTF-1a、LDHA、Glut1蛋白表达的影响 | 第66-69页 |
4.4 讨论 | 第69-71页 |
结语 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
硕士期间发表论文 | 第79-80页 |
附录 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |