摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
上篇 文献综述 | 第10-33页 |
第一章 烟草细菌性青枯病的研究进展 | 第11-17页 |
1 烟草青枯病的研究 | 第11-15页 |
·病害症状 | 第11-12页 |
·病原 | 第12页 |
·青枯病菌的致病性变异 | 第12-13页 |
·青枯菌的致病过程 | 第13页 |
·青枯菌致病基因表达的信号调控 | 第13-15页 |
2 青枯病的防治 | 第15-17页 |
·农业防治 | 第15页 |
·选育抗病品种 | 第15-16页 |
·生物防治 | 第16页 |
·化学防治 | 第16-17页 |
第二章 细菌的群体感应 | 第17-29页 |
1 群体感应系统 | 第17-18页 |
2 细菌群体感应信号分子 | 第18-22页 |
·革兰氏阴性细菌中的群体感应信号分子 | 第18-21页 |
·革兰氏阳性细菌的群体感应信号分子 | 第21-22页 |
3 群体感应与植物病害 | 第22-23页 |
4 细菌的群体感应淬灭研究 | 第23-29页 |
·群体感应淬灭酶的研究 | 第23-25页 |
·植物病原细菌群体猝灭的利用 | 第25-29页 |
第三章 植物转基因技术研究进展 | 第29-33页 |
1 以外植体为受体的基因转化方法 | 第29-31页 |
·农杆菌介导法 | 第29-30页 |
·基因枪法 | 第30-31页 |
·超声波介导法 | 第31页 |
2 以种质系统为受体的基因转化方法 | 第31-33页 |
·子房注射法 | 第31-32页 |
·花粉管通道法 | 第32-33页 |
下篇 研究内容 | 第33-80页 |
第一章 植物表达载体的构建 | 第34-50页 |
1 材料 | 第35-36页 |
·菌株 | 第35-36页 |
·酶和试剂 | 第36页 |
·培养基 | 第36页 |
2 植物表达载体的构建 | 第36-43页 |
·attM基因的克隆 | 第37-42页 |
·pBI-attM载体的构建 | 第42-43页 |
·转化士壤根癌农杆菌 | 第43页 |
3 结果和分析 | 第43-47页 |
·attM基因的克隆验证 | 第44-45页 |
·pBI-attM载体的构建 | 第45-46页 |
·转化农杆菌的重组载体验证 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
第二章 转基因烟草的产生和鉴定 | 第50-72页 |
1 材料 | 第51-52页 |
·植物和微生物材料 | 第51页 |
·抗生素和生长素 | 第51-52页 |
·培养基 | 第52页 |
2 实验方法 | 第52-62页 |
·烟草组培苗的种植 | 第52页 |
·转基因烟草的产生 | 第52-53页 |
·转基因烟草的PCR检测 | 第53-56页 |
·PCR-Southern杂交检测 | 第56-58页 |
·转基因烟草总RNA的提取 | 第58-60页 |
·RT-PCR | 第60页 |
·荧光定量PCR | 第60-61页 |
·gus染色 | 第61页 |
·转基因烟草NPTⅡ蛋白的ELISA检测 | 第61-62页 |
·转基因烟草种子的筛选 | 第62页 |
3 结果与分析 | 第62-70页 |
·转基因烟草的产生 | 第62-63页 |
·T_0代烟草的PCR检测 | 第63-64页 |
·T_0代转基因植株的PCR-Sourthern鉴定 | 第64-65页 |
·转基因烟草总RNA的提取 | 第65页 |
·转基因植株的RT-PCR分析 | 第65-66页 |
·attM实时荧光定量表达分析 | 第66-67页 |
·gus基因表达检测 | 第67页 |
·NPT Ⅱ ELISA检测 | 第67-69页 |
·T1代烟草苗发芽实验 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70-72页 |
第三章 转基因烟草的抗病性鉴定 | 第72-80页 |
1 材料 | 第73页 |
·微生物材料 | 第73页 |
·植物材料 | 第73页 |
·培养基 | 第73页 |
2 方法 | 第73-74页 |
·青枯菌的培养 | 第73-74页 |
·离体叶片接种 | 第74页 |
·活体叶片接种 | 第74页 |
·温室青枯病抗病性试验 | 第74页 |
3 结果与分析 | 第74-79页 |
·离体接种鉴定 | 第74-76页 |
·活体叶片接种 | 第76-77页 |
·伤根法接种 | 第77-79页 |
4 讨论 | 第79-80页 |
附录 | 第80-84页 |
参考文献 | 第84-94页 |
致谢 | 第94页 |