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转群体感应淬灭基因attM烟草抗青枯病的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
上篇 文献综述第10-33页
 第一章 烟草细菌性青枯病的研究进展第11-17页
  1 烟草青枯病的研究第11-15页
   ·病害症状第11-12页
   ·病原第12页
   ·青枯病菌的致病性变异第12-13页
   ·青枯菌的致病过程第13页
   ·青枯菌致病基因表达的信号调控第13-15页
  2 青枯病的防治第15-17页
   ·农业防治第15页
   ·选育抗病品种第15-16页
   ·生物防治第16页
   ·化学防治第16-17页
 第二章 细菌的群体感应第17-29页
  1 群体感应系统第17-18页
  2 细菌群体感应信号分子第18-22页
   ·革兰氏阴性细菌中的群体感应信号分子第18-21页
   ·革兰氏阳性细菌的群体感应信号分子第21-22页
  3 群体感应与植物病害第22-23页
  4 细菌的群体感应淬灭研究第23-29页
   ·群体感应淬灭酶的研究第23-25页
   ·植物病原细菌群体猝灭的利用第25-29页
 第三章 植物转基因技术研究进展第29-33页
  1 以外植体为受体的基因转化方法第29-31页
   ·农杆菌介导法第29-30页
   ·基因枪法第30-31页
   ·超声波介导法第31页
  2 以种质系统为受体的基因转化方法第31-33页
   ·子房注射法第31-32页
   ·花粉管通道法第32-33页
下篇 研究内容第33-80页
 第一章 植物表达载体的构建第34-50页
  1 材料第35-36页
   ·菌株第35-36页
   ·酶和试剂第36页
   ·培养基第36页
  2 植物表达载体的构建第36-43页
   ·attM基因的克隆第37-42页
   ·pBI-attM载体的构建第42-43页
   ·转化士壤根癌农杆菌第43页
  3 结果和分析第43-47页
   ·attM基因的克隆验证第44-45页
   ·pBI-attM载体的构建第45-46页
   ·转化农杆菌的重组载体验证第46-47页
  4 讨论第47-50页
 第二章 转基因烟草的产生和鉴定第50-72页
  1 材料第51-52页
   ·植物和微生物材料第51页
   ·抗生素和生长素第51-52页
   ·培养基第52页
  2 实验方法第52-62页
   ·烟草组培苗的种植第52页
   ·转基因烟草的产生第52-53页
   ·转基因烟草的PCR检测第53-56页
   ·PCR-Southern杂交检测第56-58页
   ·转基因烟草总RNA的提取第58-60页
   ·RT-PCR第60页
   ·荧光定量PCR第60-61页
   ·gus染色第61页
   ·转基因烟草NPTⅡ蛋白的ELISA检测第61-62页
   ·转基因烟草种子的筛选第62页
  3 结果与分析第62-70页
   ·转基因烟草的产生第62-63页
   ·T_0代烟草的PCR检测第63-64页
   ·T_0代转基因植株的PCR-Sourthern鉴定第64-65页
   ·转基因烟草总RNA的提取第65页
   ·转基因植株的RT-PCR分析第65-66页
   ·attM实时荧光定量表达分析第66-67页
   ·gus基因表达检测第67页
   ·NPT Ⅱ ELISA检测第67-69页
   ·T1代烟草苗发芽实验第69-70页
  4 讨论第70-72页
 第三章 转基因烟草的抗病性鉴定第72-80页
  1 材料第73页
   ·微生物材料第73页
   ·植物材料第73页
   ·培养基第73页
  2 方法第73-74页
   ·青枯菌的培养第73-74页
   ·离体叶片接种第74页
   ·活体叶片接种第74页
   ·温室青枯病抗病性试验第74页
  3 结果与分析第74-79页
   ·离体接种鉴定第74-76页
   ·活体叶片接种第76-77页
   ·伤根法接种第77-79页
  4 讨论第79-80页
附录第80-84页
参考文献第84-94页
致谢第94页

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