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枯草芽孢杆菌NCD-2群体感应系统comQ基因的克隆和功能分析

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
1 引言第12-18页
   ·枯草芽孢杆菌的生防作用机制第12-14页
     ·竞争作用第12-13页
     ·拮抗作用第13页
     ·诱导植物抗病性第13-14页
   ·枯草芽孢杆菌中的群体感应系统第14-16页
   ·枯草芽孢杆菌的电击转化第16页
   ·本研究的目的和意义第16-18页
2 试验材料第18-23页
   ·供试菌株和质粒第18页
   ·培养基与培养条件第18-19页
     ·培养基第18-19页
     ·培养条件第19页
   ·PCR 引物第19-20页
   ·主要化学试剂与试剂盒第20页
     ·化学试剂第20页
     ·试剂盒第20页
   ·仪器第20-21页
   ·溶液、缓冲液及试剂配制第21-23页
     ·碱裂解提取质粒所需主要试剂第21页
     ·枯草芽孢杆菌NCD-2 基因组DNA 提取试剂第21-22页
     ·枯草芽孢杆菌NCD-2 电击转化所需试剂的配制第22-23页
3 试验方法第23-34页
   ·DNA 操作与序列分析第23-25页
     ·枯草芽孢杆菌菌株NCD-2 总基因组DNA 的大量提取第23页
     ·DNA 的纯化步骤第23页
     ·E. coli DH5α感受态细胞的小量制备第23-24页
     ·质粒的小量提取第24页
     ·质粒热击转化大场杆菌感受态细胞第24-25页
     ·PCR 产物或者酶切产物的纯化第25页
     ·序列测定及分析第25页
   ·NCD-2 菌株电击转化条件的优化第25-27页
     ·NCD-2 菌株感受态细胞的制备第25-26页
     ·NCD-2 菌株的电击转化及转化子的验证第26页
     ·不同质粒对NCD-2 菌株电击转化效率的影响第26页
     ·不同电阻和不同电场强度对NCD-2 菌株转化效率的影响第26-27页
     ·对数生长初期不同阶段对NCD-2 菌株电击转化效率的影响第27页
   ·枯草芽孢杆菌NCD-2 菌株全基因序列的测定及群体感应系统基因的克隆.第27页
   ·comQ 基因缺失突变体菌株的构建第27-31页
     ·PCR 引物的设计第27页
     ·comQ 基因缺失突变盒的构建第27-29页
     ·comQ 基因缺失突变载体的构建第29-30页
     ·NCD-2 菌株突变体菌株的获得第30-31页
   ·NCD-2 野生型菌株及其突变体菌株M6 拮抗测定第31-32页
     ·对病原细菌的平板拮抗作用第31页
     ·对病原真菌的平板拮抗作用第31页
     ·脂肽提取物的平板抑菌测定第31-32页
   ·脂肽提取物的质谱测定第32页
   ·NCD-2 野生型菌株及其突变体菌株M6 相关性状的测定第32-34页
     ·生物膜形成的定性和定量测定第32页
     ·芽孢形成能力的测定第32-33页
     ·生长曲线第33-34页
4 结果与分析第34-45页
   ·NCD-2 菌株电击转化条件的优化第34-36页
     ·不同类型的质粒对NCD-2 菌株转化效率的影响第34页
     ·不同电阻值对NCD-2 菌株转化效率的影响第34-35页
     ·不同电场强度对NCD-2 菌株电击转化效率的影响第35页
     ·NCD-2 菌株不同生长时期对转化效率的影响第35-36页
   ·NCD-2 菌株全基因序列的测定和群体感应系统基因的克隆第36页
   ·comQ 基因突变菌株的构建第36-39页
   ·NCD-2 野生型菌株及其突变体菌株M6 拮抗测定第39-42页
     ·comQ 基因对NCD-2 菌株抑制细菌生长的影响第39页
     ·comQ 基因对NCD-2 菌株抑制真菌生长的影响第39-40页
     ·脂肽提取物的质谱测定第40-42页
   ·NCD-2 野生型菌株和M6 菌株的相关性状测定第42-45页
     ·生物膜形成的影响第42-43页
     ·细胞形态及芽孢形成能力的测定第43-44页
     ·菌落形态的测定第44页
     ·菌株生长速率的测定第44-45页
5 讨论第45-47页
   ·枯草芽孢杆菌NCD-2 菌株的电击转化第45-46页
   ·群体感应系统在枯草芽孢杆菌NCD-2 菌株生防中的功能第46-47页
6 结论第47-48页
参考文献第48-53页
附录第53-59页
在读期间发表的学术论文第59-60页
作者简历第60-61页
致谢第61-62页

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